HNE诱导下PKCδ/θ-Duox1-ROS对气道黏液高分泌影响的体外实验研究

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧(ROS)信号通路对人气道黏蛋白(MUC)5AC的调控作用及机制,为气道黏液高分泌治疗提供新靶点。方法:PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道上皮细胞16HBE,给予人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激建立体外气道炎症细胞模型。试剂盒测定各组细胞ROS生成水平,实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC mRNA水平,Western blot测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白表达。结果:与对照组相比,HNE组ROS生成明显增多,Duox1、MUC5AC mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);给予Duox1抑制剂、自由基清除剂或PKC抑制剂及PKCδ/θ抑制剂后,ROS生成受到明显抑制,Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达减少(P<0.05);给予PKCα/β后,ROS生成、Duox1和MUC5AC mRNA及蛋白表达与HNE组比较无明显变化(P>0.05)。结论:体外细胞模型实验中,HNE可通过PKCδ/θ-Duox1-ROS介导MUC5AC高表达,在气道黏液高分泌发展过程中起重要作用。

Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌

目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。

外周血TAP联合HPV、ICAM-1预测围绝经期宫颈癌变患者术后复发价值及与预后相关性

目的:分析外周血异常糖链糖蛋白(TAP)联合人乳头瘤病毒(HPV)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)指标检测对围绝经期宫颈癌变患者术后复发的预测价值及与预后关系。方法:选择2020年1月-2021年1月在本院接受宫颈癌根治术的围绝经期患者132例,妇科检查健康妇女77例分别为宫颈癌组和对照组,检测宫颈癌组术前及对照组上述3项指标,术后随访1年,将宫颈癌组分为复发组及未复发组,比较临床病理资料、指标检测水平,分析TAP、HPV、ICAM-1检测预测术后复发效能,采用Spearman相关系数分析各指标与术后复发相关性。结果:宫颈癌组术前血清TAP、ICAM-1水平及高危型HPV阳性率均高于对照组,宫颈癌组术后12个月内复发患者血清TAP、ICAM-1及高危型HPV阳性率高于术后3个月,未复发组各指标水平低于术前及术后3个月时,复发组各指标水平均高于未复发组(均P<0.001)。3项指标联合检测的曲线下面积(AUC)=0.979,高于单项指标检测;Spearman相关系数分析显示,血清TAP、ICAM-1水平及高危型HPV阳性率与患者术后预后呈明显正相关(均P<0.05)。结论:TAP、ICAM-1、高危型HPV检测对围绝经期宫颈癌根治患者术后复发预测具有一定效用,且3项指标水平均与患者手术预后相关,提示临床对宫颈癌患者术后加强有关指标检测,提高手术治疗效果及患者生存。

基于数据包络分析法的医养结合型养老机构中护理人力资源效率评价指标体系的构建及评价

目的基于数据包络分析法(DEA)构建医养结合型养老机构护理人力资源效率评价指标体系并进行评价。方法本研究属于横断面调查研究。运用文献研究及调查法初步建立护理人力资源效率评价指标体系库,采用德尔菲法对17名专家(护理管理、养老机构管理、医养结合型养老机构管理、卫生经济学管理、公共卫生等领域的专家)展开两轮函询。通过专家积极性、专家权威程度、专家意见集中程度与协调程度等因素判断指标体系的可靠性,结合专家意见对指标进行调整、修改及完善,以确立最终的指标体系。并于2022年8—12月在该指标体系基础上运用DEA模型对海口市12家医养结合型养老机构进行效率评价。结果构建的评价指标体系分为3级68项,包括一级指标9项,二级指标19项,三级指标40项。两轮专家函询积极系数为100%和94.1%,权威系数为0.88与0.92,肯德尔和谐系数为0.471和0.348,变异系数均值为0.16和0.12(P<0.001)。DEA评价的12家医养结合型养老机构结果显示,综合效率(OE)、技术效率(TE)和规模效率(SE)值均为1.000的DEA有效机构有5家;非DEA有效机构有7家,其中包括SE值<1.000但TE值=1.000的4家,SE值及TE值均<1.000的3家。结论构建的评价指标体系其函询专家的参与积极性高,权威系数和协调度好,对指标体系认可性高,内容涵盖全面、层次分明、可获取强、具有较强的专科特性。DEA模型评价的结果能客观有效地反映医养结合型养老机构护理人力资源效率发挥情况,实用性较强。