IL-17D调控CD93^(+)CTL在肺脏肿瘤微环境中的杀伤功能及桔梗的促进作用

目的:探讨IL-17D调控CD93^(+)CTL在肺脏肿瘤微环境(TME)中的杀伤功能及桔梗(PG)的促进作用。方法:采用PG或IL-17D处理小鼠肺脏B16黑色素瘤模型和对照小鼠,观察肺脏肿瘤克隆形成;应用单细胞测序、免疫荧光染色、流式细胞术等方法检测肿瘤小鼠肺脏IL-17D表达变化;采用单细胞测序、流式细胞术等方法分别检测各组小鼠肺脏CD93^(+)CTL含量、细胞表型和功能因子改变(包括CD107a、穿孔素、颗粒酶B、趋化因子CCL2、CXCL9及趋化因子受体CCR2、CXCR3等);利用EL4细胞系,采用Western blot、RT-PCR检测桔梗皂苷D对IL-17D及其转录调控因子NRF2表达的作用。结果:小鼠肺脏CD93^(+)CTL较CD93−CTL高表达穿孔素、CD107a等细胞毒性效应因子和趋化因子受体CXCR3、CCR2等,而颗粒酶B分泌能力无显著差异;小鼠肺脏肿瘤模型中,肺脏IL-17D表达及其CD93^(+)CTL含量明显下降(P<0.001);肿瘤小鼠经IL-17D回补实验,或经PG处理10 d后,肺脏IL-17D和CD93^(+)CTL比例和数量明显增多(P<0.05),肿瘤克隆明显减少。同时,肿瘤局部CD93^(+)CTL募集和功能相关细胞因子CCL2、CXCL9、IL-17D等表达明显上调。PG对IL-17D的上调作用在EL4细胞系体外实验中也得到了验证,桔梗皂苷D可显著上调EL4细胞IL-17D及其转录调控因子NRF2表达。结论:中药PG及其提取物可上调肺脏IL-17D表达,增强肺脏CD93^(+)CTL浸润和杀伤功能,拮抗肿瘤在肺脏的恶性进展,是PG改善肺脏TME的重要药理机制。

桔梗-姜半夏配伍促进小鼠NK细胞在肺脏募集并抑制肿瘤肺脏转移

肺脏肿瘤是一种高发病率、高致死率疾病[1],在发展早期主要依赖NK细胞等淋巴细胞发挥抗肿瘤作用[2],其中CXCR3^(+)NK细胞可依赖CXCL9/10等趋化因子的招募作用[3]而快速迁移,并大量分泌IFN-γ和穿孔素等效应因子,发挥免疫监视等作用[4]。桔梗-姜半夏配伍(the combination of Platycodon Grandiflorum and Pinella Ternata,PG+PT)常用于肿瘤的临床治疗中[5]。本研究旨在探讨PG+PT对肺脏肿瘤微环境中NK细胞、特别是CXCR3+NK的免疫药理作用,以明确该配伍发挥抗肿瘤作用的部分药理机制。

葛根素干预软骨氧化应激和Nrf2/HO-1通路改善PTOA大鼠软骨退变的机制

旨在研究葛根素干预软骨氧化应激和Nrf2/HO-1通路改善创伤后骨关节炎(post-traumatic osteoarthritis,PTOA)大鼠软骨退变的作用机制,探究葛根素对骨关节炎的治疗作用。将40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:对照组(n=8)、模型组(n=8)、塞来昔布组(n=8)和葛根素组(n=16)。葛根素组随机分为低剂量组(n=8)和高剂量组(n=8)。除对照组外,其余各组通过前十字韧带横断(anterior cruciate ligament transection,ACLT)建立大鼠PTOA模型。低剂量组(50 mg·kg^(-1))、高剂量组(100 mg·kg^(-1))和塞来昔布组(2.86 mg·kg^(-1))进行灌胃给药,对照组给予等量生理盐水,连续干预5周。每周进行关节肿胀程度、冷敏感反应和膝关节伸膝发声检测,评估大鼠关节肿胀和疼痛程度。给药结束后,收集各组大鼠膝关节和血清样本。对胫骨和股骨组织进行HE染色和改良的Mankin评分,以评估病理组织学变化。检测大鼠软骨中基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)、基质金属蛋白酶13(MMP13)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)的水平以及血清中Ⅱ型胶原羧基末端肽(CTX-Ⅱ)和软骨寡聚基质蛋白(COMP)的含量,以评估葛根素对大鼠骨关节炎软骨退变的改善作用。通过检测大鼠血清中抗氧化酶(SOD、GSH-Px和CAT)活力以及大鼠软骨中丙二醛(MDA)含量和Nrf2/HO-1通路水平,以评估葛根素对大鼠机体氧化损伤的保护作用。检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,以评估葛根素对机体的抗炎作用。结果显示:与模型组比较,使用高剂量葛根素干预可以显著减轻大鼠关节肿胀程度和疼痛反应,改善关节软骨损伤程度,降低Mankin评分(P<0.01),激活软骨中Nrf2/HO-1通路,抑制MDA、MMP3、MMP13和ADAMTS4表达(P<0.05),上调血清中抗氧化酶活力(P<0.01),抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α以及软骨代谢标志物CTX-Ⅱ和COMP水平(P<0.05)。综上,葛根素通过激活Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激与炎症损伤改善PTOA大鼠软骨退变。

桔梗汤促进肺脏Th1细胞募集及拮抗肿瘤肺脏转移的作用机制研究

目的:探讨桔梗汤(platycodon decoction,PD)促进肺脏Th1细胞募集及拮抗肿瘤肺脏转移的作用机制。方法:24只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(CTRL组)和PD用药组(PD组),PD组灌胃PD 2.925 g/(kg·d);18只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(CTRL组)、B16黑色素瘤肺转移模型组(B16组)和PD治疗组(B16+PD组),除正常对照组外,B16组和B16+PD组小鼠尾静脉注射B16黑色素瘤细胞,其中PD治疗组前3 d开始灌胃PD。利用流式细胞术检测小鼠肺脏Th1细胞及其特征性趋化因子受体CXCR3和功能因子IFN-γ的表达变化;RT-qPCR技术和单细胞测序检测肺脏中CXCL9、CCL5、IFN-γ、GZMB的表达水平。结果:与未用药小鼠相比,连续灌胃桔梗汤10 d后,小鼠肺脏Th细胞比例和数量显著升高(P<0.001);Th细胞中CXCR3、IFN-γ表达阳性比例均明显上升(P<0.001,P<0.01);肺组织中CXCL9(P<0.001)、CCL5(P<0.05)、IFN-γ(P<0.01)、GZMB(P<0.05)表达升高。在B16黑色素瘤肺脏转移模型中,桔梗汤治疗可显著降低小鼠肺脏肿瘤克隆数(P<0.01)。与肿瘤模型组相比,桔梗汤治疗组小鼠肺脏CXCR3+Th细胞、IFN-γ+Th细胞比例和数量升高(P<0.001,P<0.01);肺脏肿瘤微环境中趋化因子CXCL9和CCL5的转录水平上调,肺脏Th1细胞IFN-γ、GZMB的转录水平也显著上调。结论:桔梗汤可通过增强肺脏趋化因子CXCL9、CCL5的表达,促进CXCR3+Th1细胞在肺脏肿瘤微环境中的募集,增强局部IFN-γ和GZMB的表达,改善肺脏免疫微环境,发挥拮抗肿瘤肺脏转移的药理作用。

基于改进的定子电流MRAS无速度传感器在牵引电动机中的应用研究

通过基于定子电流的模型参考自适应(MRAS)法来估算转速。采用改进的积分策略代替传统的积分环节,以避免转速估算算法中由纯积分所引起的直流偏置、误差累积等问题。相比于基于转子磁链的MRAS转速估算法,该方法避免了由于参考模型的不准确所带来的转速估计误差。将整个控制算法应用于轨道交通车辆的牵引控制系统中,利用Matlab/Simulink对整个系统进行了仿真,仿真结果表明该系统运行稳定,具有良好的转速估算准确度,能满足牵引控制需要。