目的:探究高糖高脂对成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:以完全培养基为对照组培养基,以含20.0mM葡萄糖(D-glucose)、0.4mM棕榈酸(Palmitic acid,PA)及0.5%牛血清白蛋白(Bovine ser um albumin,BSA)的完全培养基为实验组模拟高糖高脂环境...目的:探究高糖高脂对成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:以完全培养基为对照组培养基,以含20.0mM葡萄糖(D-glucose)、0.4mM棕榈酸(Palmitic acid,PA)及0.5%牛血清白蛋白(Bovine ser um albumin,BSA)的完全培养基为实验组模拟高糖高脂环境,分别处理成骨细胞0-48h后,显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8检测细胞增殖活性,Annex in V/PI双染流式检测细胞凋亡率,Western blotting检测caspase-3及cleaved caspase-3蛋白水平。结果:成骨细胞在高糖高脂环境下培养24h时观察到细胞皱缩变圆,胞间间隙增宽;CCK-8检测提示高糖高脂培养成骨细胞24h时与同时刻对照组相比出现增殖抑制(F_(24h)=24.489,P=0.001),48h后增殖活性(0.027±0.022)较同时刻对照组差异有统计学意义(F_(48h)=272.440,P<0.001);Annex in V/PI双染流式检测显示,24h时高糖高脂组细胞凋亡率为9.68%±3.33%,36h时细胞凋亡率上升至12.89%±3.40%,可达对照组(1.96±1.32)约6.6倍;Western blotting检测发现健康成骨细胞极少表达cleaved caspase-3,高糖高脂可时间依赖性上调cleaved caspase-3蛋白水平,24h时cleaved caspase-3相对蛋白表达量(0.349±0.068)约为对照组(0.146±0.033)2.4倍,36h时(0.468±0.136)达对照组3.2倍(F=9.603,P=0.001)。结论:高糖高脂可时间依赖性抑制成骨细胞增殖,促进凋亡。展开更多
文摘目的:探究高糖高脂对成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:以完全培养基为对照组培养基,以含20.0mM葡萄糖(D-glucose)、0.4mM棕榈酸(Palmitic acid,PA)及0.5%牛血清白蛋白(Bovine ser um albumin,BSA)的完全培养基为实验组模拟高糖高脂环境,分别处理成骨细胞0-48h后,显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8检测细胞增殖活性,Annex in V/PI双染流式检测细胞凋亡率,Western blotting检测caspase-3及cleaved caspase-3蛋白水平。结果:成骨细胞在高糖高脂环境下培养24h时观察到细胞皱缩变圆,胞间间隙增宽;CCK-8检测提示高糖高脂培养成骨细胞24h时与同时刻对照组相比出现增殖抑制(F_(24h)=24.489,P=0.001),48h后增殖活性(0.027±0.022)较同时刻对照组差异有统计学意义(F_(48h)=272.440,P<0.001);Annex in V/PI双染流式检测显示,24h时高糖高脂组细胞凋亡率为9.68%±3.33%,36h时细胞凋亡率上升至12.89%±3.40%,可达对照组(1.96±1.32)约6.6倍;Western blotting检测发现健康成骨细胞极少表达cleaved caspase-3,高糖高脂可时间依赖性上调cleaved caspase-3蛋白水平,24h时cleaved caspase-3相对蛋白表达量(0.349±0.068)约为对照组(0.146±0.033)2.4倍,36h时(0.468±0.136)达对照组3.2倍(F=9.603,P=0.001)。结论:高糖高脂可时间依赖性抑制成骨细胞增殖,促进凋亡。
