一株链霉菌的鉴定及其产格尔德霉素的发酵工艺研究

【目的】对链霉菌Streptomyce sp.FIM18-0592进行菌种鉴定,并对其胞外格尔德霉素产量进行发酵工艺优化,旨在提高产量并降低发酵成本。【方法】通过形态特征、培养特征和生理生化特性,结合16S rDNA序列分析构建系统发育树进行菌种鉴定;采用单因素试验优化培养条件及培养基配方,进一步使用最陡爬坡试验和响应面试验优化培养基配方的含量。【结果】通过对链霉菌FIM18-0592的形态特征、培养特征及生理生化特征进行初步培养观察发现,其在ISP2等培养基上生长较好,气生菌丝旺盛,产黑色素。结合16S rDNA分子鉴定,确定该菌为格尔德霉素链霉菌(Streptomyces geldanamycininus)。通过单因素试验对发酵条件以及培养基配方进行优化,得到最适宜菌株发酵的培养条件为转速140 r/min、装液量12%(体积分数)、接种量7%(体积分数)、培养时间144 h。最佳的碳源、氮源、无机盐分别为葡萄糖、黄豆饼粉和硫酸铵。采用最陡爬坡试验和响应面优化试验确定了其最优的发酵培养基为:葡萄糖10.42%、黄豆饼粉1.68%、硫酸铵0.3%、乳酸0.3%、甘油4%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.4%,在此条件下,格尔德霉素的发酵效价达到2887μg/mL,较原始发酵工艺效价提高了66%。【结论】链霉菌FIM18-0592为格尔德霉素链霉菌,通过对其发酵工艺进行优化显著提高格尔德霉素的产量,为格尔德霉素及其衍生物的开发和利用奠定基础。

经方辨治癌痛的研究和展望

为促进经方在中医肿瘤学中的应用及发展,提高癌性疼痛的中医疗效,发挥经方优势、改善癌痛患者的生活质量,本文收集经方治疗癌性疼痛的临床文献并进行整理,从经方方证的角度来以方测证,依照六经辨证的体系对癌痛的辨治进行分类归纳,综述及探讨癌性疼痛的六经辨治规律,以希为制定六经辨证阶梯治疗癌性疼痛的诊疗方案提供文献依据。

重组弹性蛋白的表征及在紫外诱导皮肤光老化过程中的作用

采用基因工程技术构建重组弹性蛋白工程菌,再利用发酵纯化技术得到重组弹性蛋白,并经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸组成、蛋白纯度分析、内毒素含量测定及其红外光谱和圆二色谱分析对其进行表征鉴定。通过测定重组弹性蛋白对L929小鼠胚胎成纤维细胞粘附能力和细胞活力影响,以及在中波紫外线(UVB)诱导L929细胞光老化模型中,考察重组弹性蛋白对Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、弹性蛋白(Elastin)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA转录水平的影响,探究重组弹性蛋白在UVB诱导皮肤光老化过程中的作用。结果表明,获得的重组弹性蛋白与天然弹性蛋白二级结构相似;在0.1 mg/mL质量浓度下无细胞毒性且具有一定的细胞活力,显著促进L929细胞的粘附和增殖。此外,重组弹性蛋白可通过下调UVB辐射后L929细胞内MMP-1转录水平,提高细胞中的CollagenⅠ,CollagenⅢ和Elastin表达,对UVB诱导的L929细胞光损伤具有良好的保护作用,显著提升L929细胞的存活率。

海南省滨海型体育旅游项目发展的SWOT分析

《海南省国家体育旅游示范区发展规划(2020-2025)》指出“体育旅游化”和“融体于旅”两大路径,其中以滨海+体育的滨海型体育旅游项目为其重要组成部分。本文采用文献资料、SWOT分析、实地调查等方法,分析海南省滨海型体育旅游项目发展现状与特征,旨在为海南省滨海型体育旅游项目建设与发展提供理论支持与建议。结果表明:①海南省滨海型体育旅游项目优势(S)包括自然资源丰富、体育特色加持、政策支持显著。②劣势(W)包括基础设施建设欠佳、国内竞争力不足、缺乏老年体育项目。③机遇(O)包括国家政策支持、市场需求增加、旅游产业升级等。④威胁(T)包括自然灾害、环保压力、人才匮乏。通过SWOT分析矩阵,可以推演出扭转型、增长型、多元发展型和防御型四种发展策略,据此建议:充分利用政策红利,打造精品项目,优化基础建设,加大宣传力度,完善管理体系,提高旅游品质。

β-catenin在乳腺癌中的表达及预后分析

目的:检测乳腺癌术后标本中β-catenin的表达,探讨其与乳腺癌预后相关临床病理指标之间的关系,并分析影响总生存(OS)、无疾病生存期(DFS)及5年复发率的因素。方法:采用免疫组织化学方法检测43例手术切除的女性乳腺浸润性导管癌标本中β-catenin的表达;运用SPSS11.5统计软件进行统计分析。结果:β-catenin主要定位于细胞膜,高表达者15例,占34.9%。β-catenin高表达是对OS及DFS不利的单因素,P值分别为0.049及0.0395。β-catenin高表达在腋淋巴结转移>4、脉管癌栓(+)、ER(-)时更为常见,但无统计学意义。COX回归分析发现,ER(-)伴β-catenin高表达与分期是OS(P值均为0.018)及DFS(P值分别为0.007、0.010)的独立预后因素。ER(-)伴β-catenin高表达、腋淋巴结转移>4、分期为Ⅲ与5年内复发正相关,P值分别为0.029、0.018、0.021。β-catenin高表达标本中CD44+/CD24-染色占66.7%(10/15),高于β-catenin低表达标本中42.9%(12/28);虽无统计学意义,但在一定程度上表明Wnt信号途径的异常活化与乳腺癌肿瘤干细胞之间可能存在联系。结论:β-catenin作为在乳腺癌发生、发展及预后中有重要作用Wnt经典途径的主要成员,可成为临床判断乳腺癌预后的指标之一。

人-牛异种克隆胚构建及其线粒体来源

通过人-牛异种核移植技术获得异种克隆囊胚,便于在不消耗人类卵母细胞的情况下从异种克隆胚中分离出人类干细胞。通过透明带下注射法将人胎儿成纤维细胞和牛胎儿成纤维细胞分别注入去核牛卵母细胞中构建异种和同种胚胎,并比较两者之间的融合率、卵裂率、8-细胞发育率以及囊胚率。并对处于2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚、囊胚阶段的异种克隆胚的线粒体DNA来源进行检测。结果表明,异种克隆胚体外各个阶段的发育率均低于同种克隆胚,尤其是8-细胞到囊胚阶段的发育率,以及囊胚率都显著低于同种克隆胚(P<0.05)。异种克隆胚在2-细胞到桑椹胚阶段检测到人、牛线粒体DNA共存,囊胚阶段只检测到牛线粒体DNA。结果表明:牛卵母细胞可以重编程人胎儿成纤维细胞,完成异种克隆胚植入前的胚胎发育,异种克隆胚由于核质相互作用的不谐调,影响其发育能力,使其囊胚率显著低于同种克隆胚。牛线粒体DNA存在于植入前异种胚胎发育的各个阶段。异种克隆胚胎用于人类胚胎干细胞分离具有可行性。

美联储超预期宽松政策的影响及应对措施

在新冠疫情席卷全球的背景下,美国感染人数最多,疫情对经济金融的影响超出预期。美国政府多部门都纷纷制定法案、出台政策予以应对,其中美联储推出的经济救助计划无论从规模和范围上都是史无前例的。本文梳理了美联储应对新冠疫情的诸多政策,剖析政策或将对全球经济金融的影响,并就我国应如何应对提出若干建议。

徐振晔辨治无驱动基因晚期非小细胞肺癌验案1则

总结徐振晔教授治疗肺癌的经验,对其辨治无驱动基因晚期非小细胞肺癌医案1则进行介绍和分析。徐振晔教授以益气养精、补肺益肾、解毒散结为法,分阶段、动态地调和机体阴阳平衡,使晚期多发转移肺癌患者带瘤生存,在提高患者生活质量的基础上延长其生存期,值得中医同仁临床借鉴。

外来物种入侵的法律防范

外来物种入侵现象严重危害了我国的生态安全和经济发展。因此,本文借鉴了国际社会关于防范外来物种入侵的立法和实践经验,分析了当前我国相关法律制度的不足,进而提出了一些建议,希望对我国防治物种入侵有所裨益。

肺癌胰腺转移的临床特点及预后分析

背景与目的由于缺乏特异的临床症状,70%的肺癌患者确诊时为局部晚期或晚期,多数患者伴有实性器官转移,不同部位转移患者的临床表现及预后不同。随着诊断技术的发展,肺癌伴胰腺转移似有逐渐增多趋势。本研究针对肺癌胰腺转移的临床特点、诊治、预后及生存情况进行统计分析,探讨肺癌胰腺转移的相关预后因素。方法回顾性分析1996年7月-2017年6月于北京肿瘤医院胸部肿瘤内一科就诊的35例经病理确诊的肺癌并胰腺转移或在治疗过程中出现胰腺转移的患者,其中33例有完整随访资料。结果 35例患者中,小细胞肺癌28例(80%),腺癌3例(8.6%),鳞癌4例(11.4%)。初治时即存在胰腺转移者21例(60%),14例治疗过程中出现胰腺转移(40%)。在胰腺转移灶中,胰头转移者15例(42.9%),胰腺体尾部转移者20例(57.1%),单发转移23例(65.7%),多发转移12例(34.3%)。肺癌胰腺转移患者多无明显临床症状,本组病例中,仅4例患者在病程中出现胰腺炎症状。病理类型是影响肺癌胰腺转移患者生存的独立预后因素。结论部分晚期肺癌患者可以出现胰腺转移,多见于小细胞肺癌。肺癌患者出现胰腺转移,治疗原则以全身化疗为主的综合治疗。病理类型是影响肺癌胰腺转移患者生存的独立预后因素。

某地铁深基坑顺逆结合开挖变形性状的实测分析

目前对于软土地区采用顺逆结合法开挖的深基坑变形性状研究还较少。研究了杭州某34.5m深的地铁基坑在顺逆结合开挖方法下的变形性状,分析了基坑开挖对一倍开挖深度距离内邻近地铁隧道附近土体的影响。研究结果表明:(1)逆作板加强了围护结构体系的刚度,有效地限制了地下连续墙的侧移、墙后地表沉降和立柱隆起,进而限制了邻近隧道附近土体的位移;(2)合理的土体开挖顺序能有效地限制基坑中间处的墙体侧移,使得该截面的墙体侧移并非是沿基坑长边所有截面中墙体侧移最大的;(3)隧道与附近土体相互作用明显,附近土体在隧道埋深处都随刚度相对较大的隧道向基坑内呈现一定程度的水平移动,而上部土体的水平移动随着空间位置的不同而表现各异。相关结论对软土地区类似深基坑工程的变形控制具有一定的参考意义。

刍议互联网金融对经济增长的促进作用——以辽宁省为例

近年辽宁省经济发展持续低迷,互联网金融能否起到提振经济、刺激改革的作用?本文选取辽宁省和全国的互联网金融相关指标与经济增长的相关指标进行实证研究,通过ADF方法进行单位根检验,并使用Johansen的MLE方法估计该系统的VECM误差修正模型,通过对比最终得出结论:尽管全国的互联网金融对全国经济增长有积极促进作用,辽宁省互联网金融与辽宁省经济增长之间呈现负相关。基于分析结果为辽宁省经济增长的路径选择提供了新的启示和思路。

TSA处理供体细胞对组蛋白乙酰化和核重编程效果的影响

克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因。试验中以第5代牛胎儿成纤维细胞作为供体核,以牛卵母细胞作为受体胞质进行体细胞核移植,用75 nmol.L-1曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理供体细胞6、12和24 h,通过核移植检测克隆胚胎发育率,并应用激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术检测处理细胞和克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平和细胞周期。结果显示:随着TSA处理时间的延长,供体细胞组蛋白H3K18乙酰化水平不断提高;以75 nmol.L-1TSA处理供体细胞12 h的克隆胚的囊胚发育率显著高于未处理组(23.5%vs 15.7%,P<0.05);供体细胞经TSA处理的克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平与未处理组相比差异不显著(P>0.5);处理组和对照组细胞G0/G1期和S期比例间存在显著差异(P<0.05)。结论:TSA对核供体细胞的处理存在时间效应,75 nmol.L-1TSA处理12 h的牛胎儿成纤维细胞更易被卵母细胞重编程,显著提高了克隆胚的体外发育能力,初步证实TSA是通过提高供体细胞组蛋白乙酰化水平来促进供体细胞重编程的。

541例女性晚期非小细胞肺癌患者的预后因素分析

背景与目的随着女性肺癌发病率的攀升,其独特的临床和流行病学特征及良好预后引起了学界的关注。本研究通过回顾性分析女性晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的临床资料,探讨其预后相关因素。方法收集541例女性晚期NSCLC患者的临床资料,并随访至死亡。主要观察指标为总生存(overallsurvival,OS)。采用SPSS11.0统计软件进行生存分析。结果全组腺癌占80.2%(434/541),总体中位OS为15个月(95%CI:13.87-16.13),1年、2年、5年生存率分别为58.8%、23.7%和3.20%。单因素分析显示,临床分期、ECOG评分、体重下降、临床症状、血行转移和一线治疗后化疗方案数>1、一线化疗有效、曾接受靶向治疗或放疗均与中位OS明显相关(P值均<0.05)。治疗前体重下降、ECOG评分、靶向治疗及一线化疗有效为生存的独立预后因素(P值均<0.05)。结论女性晚期NSCLC患者的病理类型以腺癌为主,体重下降、ECOG评分、接受靶向治疗及一线化疗有效可能成为女性晚期NSCLC患者生存的独立预后指标。

含铂方案联合西乐葆一线治疗晚期非小细胞肺癌的Ⅱ期临床研究

背景与目的目前铂类联合第三代化疗药物的方案为晚期非小细胞肺癌的一线治疗方案,但其对中位生存期及1年生存率的改善已达平台期。本研究的目的是探讨含铂方案联合西乐葆一线治疗晚期非小细胞肺癌的疗效、影响因素及不良反应。方法选择免疫组化证实为COX-2阳性的初治晚期非小细胞肺癌患者接受铂类为基础的二联化疗方案(GP方案:吉西他滨1250mg/m2,d1、8+顺铂80mg/m2,分d1、d2给药;NP方案:长春瑞滨25mg/m2,d1、8+顺铂80mg/m2,分d1、d2给药;TP方案:多西紫杉醇75mg/m2,d1+顺铂80mg/m2,分d1、d2给药),同时在化疗开始前5-7天开始口服西乐葆400mg,Bid,直至病情进展或出现不可耐受的副反应。不良反应采用NCI-CTC标准。采用Kaplan-Meier法估计生存,Cox模型分析影响因素。评价终点:中位生存期、1年生存率、无疾病进展生存期、有效率及不良反应。结果2005年2月至2007年3月入组患者可评价者共44例,有效率为45%,疾病控制率为59%。中位无疾病进展生存期为6个月(95%CI:4-8个月),中位生存期为18个月(95%CI:9-27个月),1年生存率为68%。一线周期数和总体评效是影响PFS的预测因素,未发现明确影响生存期的预测因素。白细胞减少和恶心/呕吐为最常见的不良反应,发生率分别为59%和50%,Ⅲ/Ⅳ度不良反应占15%。结论西乐葆联合铂类为基础的化疗作为COX-2筛选阳性的晚期非小细胞肺癌患者一线治疗是有效的,而且毒副反应可以接受。

非小细胞肺癌肺内转移预后分析

背景与目的 40％以上非小细胞肺癌（NSCLC）确诊即为Ⅳ期，可发生肺内或／和远处转移。不同转移部位对生存期的影响目前报道不多。本研究拟探讨NSCLC患者肺内转移与单一远处血行转移以及肺内转移并其它多部位转移的临床病理特点及生存期差异，从而探讨NSCLC肺内转移的预后相关因素。方法 回顾性分析自1995年10月至2003年12月在我院经病理活检及全面分期检查确诊为Ⅳ期NSCLC、并有完整随访资料的425例患者．其中仅肺内转移而无其它部位转移者（单一肺内转移）81例，单一远处血行转移98例，肺内转移并其它部位转移68例。通过Kaplan-Meier曲线法计算生存率，Log—Rank检验比较三组生存期差异．单因素分析肺内转移的预后因素。结果 81例肺内转移者中位生存期（MST）及1、2、3年生存率（SR）分别为：13个月（95％CI11～15），57％、21％、7％；N1／N2者MST22个月，N3者10个月（P=0．0011）；同侧、对侧及双侧肺内转移者MST及年SR差异无统计学意义（P〉0．05）；单一肺内转移MST及年SR与单一脑或骨转移无显著性差异（P〉0．05），但单一肺内转移生存期长于肺并其它部位转移（MST9个月．1、2、3年SR分别为40％、9．4％、1．5％）（P=0．021）。单因素分析：年龄、病理亚型、分化程度、化疗疗效对单一肺内转移的NSCLC生存期无影响（P〉0．05），性别及淋巴结转移（N1／N2比N3）与生存相关（P=0．018，P=0．001）；将年龄分层进行分析，淋巴结转移（N1／N2比N3）为此组患者的独立预后因素（P=0．002）。在肺并其它部位转移者，转移数目（2vs≥3）系独立预后因素（=0．013）。结论 NSCLC单一肺内转移者生存期与单一脑、骨等远处转移者无显著差异．但长于肺并其它部位转移者。淋巴结转移状况（N1＋2比N3）及远处转移数目（2比≥3）分别影响单一肺内转移及肺并其它部位转移者的预后。

关于水权性质及转让范围的探讨

水权是具有公权性质的私权。虽然水权具备物权的基本特征,是一种财产性权利,但水权是一种用益物权,是对他人所有物享有以使用收益为内容的他物权。水权的法律性质决定了水权转让的范围:水权转让的主体主要是在水权流转中通过水权交易移转水资源使用权的单位或者个人。水权转让的客体,在我国目前情况下只限于多样化的经济用水,且必须是获得取水许可证的水权。从水资源使用权的位次看,家庭生活用水满足人类最起码的生存需求,其第一位次的地位不可动摇,紧随其后的是生态环境用水权。从水资源的用途看,无论是转让人还是受让人,都不能随意变更取水许可证的记载。

原发性肺癌胃肠道转移2例报道并文献复习

原发性肺癌最常见的远处转移部位包括肺、肝、脑、骨、肾上腺等,胃肠道转移鲜有报道。北京大学肿瘤学院胸部肿瘤内科近期先后收治了经病理证实为原发性肺癌发生胃肠道转移的2例患者,本文将就其诊治及随访情况进行报告,并回顾国内外相关文献,以加深对肺癌少见部位转移的认识,避免漏诊和误诊。

开展幼儿武术教学的探索

幼儿时期是儿童身心发展的关键时期,在这个时期合理科学地对幼儿进行武术训练,对其生理及心理的发展都具有极其重要的意义.为了提高我国武术幼儿教学水平,文章针对幼儿的身心特点,较系统地论述了幼儿武术教学的基本要求,幼儿武术教学的特点,幼儿武术教学的内容,幼儿武术教学的基本方法,幼儿武术教学中的技巧等五方面的内容,为幼儿武术教学提供理论依据.

表皮生长因子受体基因扩增在非小细胞肺癌预后中作用的meta分析

背景与目的研究表明探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因扩增与非小细胞肺癌预后的可能相关,但各研究结论不一。本研究通过meta分析,评价了EGFR基因扩增在不同人种以及不同治疗情况下的预后意义。方法检索PubMed、Cochrane图书馆以及CNKI中文数据库中研究细胞EGFR基因扩增与非小细胞肺癌预后关系的文献,根据欧洲肺癌工作组提供的专门的评分标准对纳入的文献进行质量评估,收集每个文献的风险比(hazard ratio,HR)及95%可信区间(confidence interval,CI),应用meta分析对文献进行定量综合分析。结果共入选17篇文献,应用表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosinekinase inhibitor,EGFR-TKI)治疗的12项研究共入选病例1221例,结果显示扩增阳性患者预后优于扩增阴性患者(HR=0.82,95%CI:0.68-0.99,P=0.04);欧美人种基因扩增阳性对EGFR-TKI疗效有明显的预测作用(HR=0.42,95%CI:0.31-0.57,P<0.001)。未应用EGFR-TKI治疗的8项研究共入选病例658例,结果显示扩增阳性与阴性患者死亡风险相当(HR=1.14,P=0.12);其中亚洲人中基因扩增者较未扩增者预后差(HR=1.88,95%CI:1.21-2.93,P=0.005)。结论EGFR基因扩增在欧美人中可能是EGFR-TKI治疗的阳性疗效预测指标,对于亚洲人预测意义不明显。另外,在未接受EGFR-TKI治疗的亚洲人中,EGFR基因扩增阳性者预后较差。