乳腺癌内分泌治疗耐药研究进展

内分泌治疗(ednocrine therapy,ET)是激素受体阳性乳腺癌患者综合治疗中的重要环节,三苯氧胺(tamoxifen,TAM)和第三代芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitors,AIs)是内分泌治疗的标准用药。内分泌治疗中出现的原发性、继发性耐药是影响激素受体阳性[Hormone receptor-positive,HR(+)]乳腺癌患者预后及生存的关键因素,其机制仍不完全清楚。近年针对内分泌治疗耐药发现的信号通路、基因突变而开发的新型药物为激素受体阳性乳腺癌内分泌治疗提供了新的认识与选择。本文对有关乳腺癌内分泌治疗耐药研究新进展进行综述。

RASSF1A基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及对细胞增殖凋亡、体内成瘤能力的影响观察

目的观察Ras相关区域家族1异构体A(RASSF1A)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及对细胞增殖、凋亡、体内成瘤能力的影响,并探讨其作用的可能机制。方法取MCF-7细胞,分别感染RASSF1A过表达慢病毒oe-RASSF1A和空白载体慢病毒vector,记为oe-RASSF1A组和vector组。两组细胞继续培养72 h,采用qRT-PCR法检测两组细胞中的RASSF1A mRNA。两组细胞在培养24、48、72、96 h时,采用MTS法观察两组细胞增殖能力(以OD值表示细胞增殖能力)。两组细胞继续培养72 h,采用流式细胞仪测算各细胞周期比例。两组细胞继续培养72 h,采用流式细胞仪测算细胞凋亡率。两组细胞继续培养72 h,取1×10~7个细胞重悬于100μL PBS中,分别注射入10只4周龄雌性裸鼠右侧腋下,常规饲养4周后处死,解剖瘤体并称重,以瘤体重表示体内成瘤能力。两组细胞继续培养72 h,采用Western Blotting法检测两组细胞中的RASSF1A、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(pPI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(pAKT)蛋白。结果oe-RASSF1A组细胞中RASSF1A mRNA相对表达量为13.25±3.20,vector组为1.00±0.03,两组相比,P<0.05。oe-RASSF1A组细胞在培养24、48、72、96 h时的OD值分别为0.36±0.02、0.53±0.06、0.74±0.13、0.91±0.07,vector组分别为0.35±0.03、0.62±0.14、0.95±0.08、1.34±0.21,在培养72、96 h时两组的OD值相比,P均<0.05。oe-RASSF1A组细胞处于G0/G1期、S期、G2/M期的比例分别为60.02%±3.21%、18.30%±2.31%、22.11%±1.03%,vector组分别为63.67%±4.16%、21.04%±2.65%、15.32%±2.52%,oe-RASSF1A组细胞处于G2/M期的比例与vector组相比,P<0.05。oe-RASSF1A组细胞凋亡率为24.38%±5.80%,vector组为4.25%±0.92%,两组相比,P<0.05。注射oe-RASSF1A组细胞的裸鼠成瘤的瘤体重为(63.29±14.03)mg,注射vector组细胞的裸鼠成瘤的瘤体重为(104.58±17.52)mg,两组相比,P<0.05。oe-RASSF1A组细胞RASSF1A、PI3K、pPI3K、AKT、pAKT蛋白相对表达量分别为8.67±1.32、0.86±0.21、0.26±0.15、0.91±0.11、0.30±0.07,vector组分别为1.05±0.04、1.00±0.00、1.01±0.01、1.04±0.04、1.00±0.00,两组细胞RASSF1A、pPI3K、pAKT蛋白相对表达量相比,P均<0.05。结论感染RASSF1A过表达慢病毒oe-RASSF1A的MCF-7细胞RASSF1A mRNA升高;过表达RASSF1A可抑制MCF-7细胞增殖、诱导细胞周期阻滞在G2/M期、促进细胞凋亡、抑制细胞体内成瘤能力,其机制可能与RASSF1A抑制PI3K/AKT信号通路有关。

沉默MAGI2基因对乳癌耐药细胞增殖与凋亡影响

目的探讨膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白2(MAGI2)对乳癌耐药细胞增殖、凋亡的影响。方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测MAGI2在人乳癌细胞MCF-7与阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR中的表达量。在Lipofectamine 2000介导下将siRNA NC、siRNA MAGI2质粒转染入MCF-7/ADR细胞。以细胞计数(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞术实验检测凋亡。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测MAGI2、磷脂酰肌醇-3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白表达。结果与MCF-7细胞相比,MAGI2在MCF-7/ADR细胞中表达量明显增加(t=19.902,P<0.05)。si-MAGI2可抑制MCF-7/ADR细胞增殖,促进其凋亡(t=4.027~24.651,P<0.05),降低p-PI3K、p-AKT蛋白水平(t=18.266、19.117,P<0.05)。结论 MAGI2可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进MCF-7/ADR细胞增殖,抑制其凋亡。

鸦胆子油乳注射液联合多西他赛和吡柔比星及环磷酰胺治疗晚期乳腺癌的临床效果

目的探讨鸦胆子油乳注射液联合多西他赛、吡柔比星、环磷酰胺(TAC)方案治疗晚期乳腺癌的临床效果。方法选取2017年1月至2018年12月四川省人民医院接收的250例晚期乳腺癌患者,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,各125例。对照组患者予以TAC方案治疗,观察组在对照组基础上联合鸦胆子油乳注射液治疗。比较2组患者临床疗效、免疫功能、血清肿瘤指标,记录治疗期间不良反应情况。结果观察组治疗4个周期后总有效率明显高于对照组[82.4%(103/125)比70.4%(88/125)],差异有统计学意义(P=0.025)。2组治疗后CD8+水平均升高,但观察组低于对照组[(29±4)%比(35±4)%],CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值均下降,但观察组高于对照组[(52±9)%比(44±7)%、(32±5)%比(28±4)%、(1.10±0.24)比(0.80±0.17)],差异均有统计学意义(均P <0.05)。2组患者治疗后血清糖类抗原15-3、癌胚抗原、血管内皮生长因子水平均降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。2组治疗期间不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.562)。结论鸦胆子油乳注射液联合TAC方案治疗晚期乳腺癌疗效确切,可减轻机体免疫抑制,阻止肿瘤进展,且不增加不良反应发生率。