期刊文献+
共找到33篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪的性能分析及临床应用 被引量:26
1
作者 杭建峰 孙朝晖 +3 位作者 石玉玲 符玉文 杨至宜 罗剑 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第2期108-110,共3页
目的探讨Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪的临床应用情况。方法分别采用UF-1000i尿沉渣分析仪和显微镜检查法对2 000例临床标本进行检测,对比2种方法的结果,并分析UF-1000i尿沉渣分析仪产生假阳性的原因。结果检测白细胞(WBC),红细胞... 目的探讨Sysmex UF-1000i全自动尿沉渣分析仪的临床应用情况。方法分别采用UF-1000i尿沉渣分析仪和显微镜检查法对2 000例临床标本进行检测,对比2种方法的结果,并分析UF-1000i尿沉渣分析仪产生假阳性的原因。结果检测白细胞(WBC),红细胞(RBC),管型和小圆上皮细胞的敏感性分别为99.2%,99.3%,94.7%和95.1%;检测上述成分的假阳性率分别为5.8%、6.1%、10.4%和4.6%;粘液丝、结晶、细菌、酵母菌、小圆上皮、脂肪滴和卵磷脂小体可能影响到UF-1000i对尿有形成分的检测。结论 Sysmex UF-1000i可以有效的检测尿液中的有形成分,当尿液中上述干扰成分呈阳性或增多时,显微镜镜检是十分重要的。 展开更多
关键词 尿沉渣 尿沉渣分析仪 临床应用
下载PDF
时间分辨荧光免疫分析的研究进展及应用 被引量:47
2
作者 杭建峰 吴英松 李明 《热带医学杂志》 CAS 2004年第3期340-343,304,共5页
时间分辨荧光免疫分析(Time-resolvedfluoroimmunoassay,TRFIA)是一种新型的体外超微量分析技术。它具有高精度、自动化、大样本快速测定(1~2h就能出结果)等技术优点。其在灵敏度和准确性方面明显高于ELISA,特异性又明显高于聚合酶链反... 时间分辨荧光免疫分析(Time-resolvedfluoroimmunoassay,TRFIA)是一种新型的体外超微量分析技术。它具有高精度、自动化、大样本快速测定(1~2h就能出结果)等技术优点。其在灵敏度和准确性方面明显高于ELISA,特异性又明显高于聚合酶链反应(PCR)。因而,其应用已不再局限于临床诊断,已渗透入生物学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及应用做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 研究进展 应用
下载PDF
癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量:28
3
作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页
目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA... 目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA—TRFIA,增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果:CEA-TRFIA的线性测量范围为(1~560)μg/L,分析的灵敏度为0.28μg/L,批内和批间的变异系数(CV)分别为7.2%~8.6%和8.9%~13.2%。与AFP,CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应,与CA15—3的交义反应值为1.62μg/L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测,其相关系数(r)为0.946。结论:CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可替代国外同类检测试剂盒,用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多
关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析
下载PDF
Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线复检规则的建立和临床评价 被引量:8
4
作者 杭建峰 孙朝晖 +1 位作者 符玉文 马丽颜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期837-841,共5页
目的:建立适合本实验室的Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线的复检规则,并进行临床评价。方法:用Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线随机检测到我院就诊的患者标本3826份,结合显微镜检查,观察血细胞形态并对白细胞进行分类。参... 目的:建立适合本实验室的Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线的复检规则,并进行临床评价。方法:用Sysmex XN-3000全自动血细胞分析流水线随机检测到我院就诊的患者标本3826份,结合显微镜检查,观察血细胞形态并对白细胞进行分类。参照国际实验血液学学会(ISLH)推荐的41条复检规则和国内XE-2100血液分析仪复检标准制定协作组推荐的23条复检规则,制定适用于本实验室的复检规则。结果:本套规则的阳性预测值为91.24%,阴性预测值为98.67%,假阴性率为3.64%,该规则的复检率为28.04%。结论:自定义Sysmex XN-3000的复检规则能有效地筛选异常标本,提高工作效率,为临床医生的诊断治疗提供有价值的信息。 展开更多
关键词 全自动血细胞分析流水线 复检规则 显微镜检查 临床评价
下载PDF
CA125时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制 被引量:8
5
作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 徐伟文 周志聪 李明 《热带医学杂志》 CAS 2005年第5期567-570,582,共5页
目的研制CA125时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价。结果该试剂盒的工作范围为10~600U/m l,分析灵敏度为1.07U/m l,批内、批间的精密度分别为4.5%~8.1%,6.9%~11... 目的研制CA125时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价。结果该试剂盒的工作范围为10~600U/m l,分析灵敏度为1.07U/m l,批内、批间的精密度分别为4.5%~8.1%,6.9%~11.5%。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~37U/m l。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测,其相关系数为0.939。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。 展开更多
关键词 CA125 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 试剂盒
下载PDF
人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 被引量:9
6
作者 杭建峰 吴英松 +4 位作者 余伟鸿 徐伟文 王从容 裘宇容 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-317,共5页
目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3... 目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%~5.9%,3.7%~6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒. 展开更多
关键词 人甲胎蛋白(hAFP) 时间分辨免疫荧光分析(TRFIA) 试剂盒
下载PDF
总PSA时间分辨免疫荧光分析法的建立 被引量:8
7
作者 杭建峰 吴英松 +1 位作者 徐伟文 李明 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期402-405,共4页
利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术建立人血清总PSA(前列腺特异性抗原)的快速全自动检测方法及其诊断试剂研制,该法采用双抗体夹心法建立tPSA-TRFIA,对该法和研制试剂的指标评价表明:方法的线性测量范围为0.50~250μg/L,灵敏度为0.0... 利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术建立人血清总PSA(前列腺特异性抗原)的快速全自动检测方法及其诊断试剂研制,该法采用双抗体夹心法建立tPSA-TRFIA,对该法和研制试剂的指标评价表明:方法的线性测量范围为0.50~250μg/L,灵敏度为0.06μg/L,批内批间的精密度分别为5.58%~9.71%,6.49%~12.12%。与CEA、CA12-5、CA15-3、CA19-9、AFP无交叉反应。353份血清标本用本试剂与国外其他试剂同时检测,其相关性达到94.4%,结果表明,试剂测定各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品。 展开更多
关键词 总PSA(前列腺特异性抗原) 时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)
下载PDF
SQA-V全自动精子质量分析仪在精液检测中的应用 被引量:2
8
作者 杭建峰 孙朝晖 +3 位作者 马丽颜 符玉文 杨至宜 甘燕玲 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第7期861-862,共2页
目的通过精液质量分析仪在男性不育症中的临床应用,为男性不育患者提供诊断和治疗依据。方法使用SQA-V全自动精液质量分析仪对981例精液标本的一般性状、精子密度、精子活率、精子活力和精子畸形率等主要指标进行分析。结果 981例精液... 目的通过精液质量分析仪在男性不育症中的临床应用,为男性不育患者提供诊断和治疗依据。方法使用SQA-V全自动精液质量分析仪对981例精液标本的一般性状、精子密度、精子活率、精子活力和精子畸形率等主要指标进行分析。结果 981例精液标本中,正常精液171例,占17.4%,异常精液标本810例,占82.6%,其中液化时间异常476例,精子密度异常242例,精子活率异常614例,精子活力异常[(a+b)%<50%]669例,精子活力异常(a%<25%)749例,精子畸形率异常747例,无精子38例。结论应用全自动精液分析仪检测患者指标准确可靠。 展开更多
关键词 精子质量分析仪 不育 男性 液化时间 精子密度 精子活动率
下载PDF
超敏C-反应蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立 被引量:3
9
作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 徐伟文 周志聪 李明 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第3期279-282,共4页
目的:血清超敏C-反应蛋白(CRP)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法的建立.方法:采用双抗体夹心法检测血清CRP水平(1株抗CRP的单抗用于包被微孔板,另1株抗CRp的单抗用于Eu^3+标记).结果:TRFIA的线性测量范围为1—1000mg/L,灵... 目的:血清超敏C-反应蛋白(CRP)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法的建立.方法:采用双抗体夹心法检测血清CRP水平(1株抗CRP的单抗用于包被微孔板,另1株抗CRp的单抗用于Eu^3+标记).结果:TRFIA的线性测量范围为1—1000mg/L,灵敏度为0.06mg/L,批内和批间精密度分别为4.0%~7.2%,6.7%-10,8%.与人IgG和白蛋白未见明显的交叉反应.109份血清标本用本方法与国外试剂盒同时检测,其相关系数为0.916.结论:CRP-TRFIA各项指标均达到临床检测要求,可替代国外产品试剂盒,用于临床血清CRP的测定. 展开更多
关键词 C-反应蛋白 时间分辨荧光免疫分析
下载PDF
人生长激素的时间分辨荧光免疫分析及其诊断试剂研制 被引量:1
10
作者 杭建峰 吴英松 +3 位作者 徐伟文 周志聪 黄颖 李明 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期472-475,共4页
【目的】利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术,建立人生长激素(human growth hormone,hGH)的快速检测方法并研制其诊断试剂。【方法】采用双抗体夹心法(一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单... 【目的】利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术,建立人生长激素(human growth hormone,hGH)的快速检测方法并研制其诊断试剂。【方法】采用双抗体夹心法(一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记)建立hGH-TRFIA。【结果】hGH-TRFIA的线性测量范围为0.1×10-3~100×10-3U/L,灵敏度为0.036×10-3U/L,批内和批间的变异系数分别为5.3%~8.6%和7.6%~12.8%。与促甲状腺激素(TSH)、卵泡生成素(FSH)、人胎盘催乳素(LH)和黄体生成素(HPL)均无交叉反应。将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数(r)为0.957。【结论】hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法,用于临床GH水平的测定。 展开更多
关键词 生长激素 时间分辨荧光免疫分析 试剂
下载PDF
血清铁蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制
11
作者 杭建峰 吴英松 +3 位作者 徐伟文 周志聪 黄颖 李明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第z1期160-163,共4页
目的血清铁蛋白(sFER)时间分辨荧光免疫(TRFIA)分析试剂盒的研制。方法采用双抗体夹心法建立sFER-TRFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的线性测量范围为2.2-1 070 ng/mL,灵敏度为0.22 ng/mL,批内、批间的精密度分别为... 目的血清铁蛋白(sFER)时间分辨荧光免疫(TRFIA)分析试剂盒的研制。方法采用双抗体夹心法建立sFER-TRFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的线性测量范围为2.2-1 070 ng/mL,灵敏度为0.22 ng/mL,批内、批间的精密度分别为4.6%-7.2%、5.4%-8.9%,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和人白蛋白无交叉反应。86份血清样本用本试剂盒与国外其他试剂盒同时检测,其相关系数为0.994。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。 展开更多
关键词 铁蛋白 时间分辨荧光免疫分析 试剂盒
下载PDF
CK-MB时间分辨荧光免疫分析的建立
12
作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 徐伟文 余伟鸿 李明 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第22期2103-2105,共3页
目的:利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术,建立人血清CK—MB的快速定量检测方法.方法:采用双抗体夹心法(1株抗CK.MB的单抗用于包被微孔板,另1株抗CK—MB的单抗用于铕标记)建立CK—MBTRFIA.结果:CK—MBTRFIA的线性测量范围... 目的:利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术,建立人血清CK—MB的快速定量检测方法.方法:采用双抗体夹心法(1株抗CK.MB的单抗用于包被微孔板,另1株抗CK—MB的单抗用于铕标记)建立CK—MBTRFIA.结果:CK—MBTRFIA的线性测量范围为5~400μg/L,分析的灵敏度为0.24μg/L,批内和批间的变异系数分别为4.9%~7.3%和8.4%~11.7%.与CK.MM和CK—BB均无交叉反应.将82份血清标本用本法与化学发光试剂盒同时检测,其相关系数为0.895.结论:CK—MBTRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可用于临床血清CK-MB水平的测定. 展开更多
关键词 肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB) 荧光免疫测定
下载PDF
用Laboman软件建立血液分析双向通信模式与复检规则的优化 被引量:4
13
作者 石玉玲 孙朝晖 +2 位作者 杭建峰 张卫云 石磊 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期63-64,共2页
我们通过将复检规则软件(Laboman)与实验室信息系统(LIS)整合,最大程度地提高了HST-302血液分析流水线的工作效率,报告如下。1材料与方法1.1仪器与试剂LIS(上海科华软件公司)。
关键词 回报时间 复检 条形码
下载PDF
UF-1000i尿沉渣分析仪对尿路感染早期诊断的价值 被引量:4
14
作者 罗剑 孙朝晖 +6 位作者 甘燕玲 马丽颜 符玉文 黄立丽 杨至宜 杭建峰 石玉玲 《华南国防医学杂志》 CAS 2010年第1期61-62,共2页
关键词 尿路感染 UF-1000i尿沉渣分析仪 诊断
下载PDF
时间分辨荧光免疫法定量检测AFP试剂盒临床应用研究 被引量:5
15
作者 徐伟文 吴英松 +5 位作者 杭建峰 王从容 周志聪 余伟鸿 裘宇容 李明 《标记免疫分析与临床》 CAS 2006年第1期43-45,共3页
对自制AFP时间分辨荧光免疫法(TRFIA)试剂盒进行研究,为临床应用评价提供科学依据。收集血清标本450份,分别以化学发光免疫分析(CLIA)和RIA为对照,用AutoDELFIATMhAFP试剂盒为复核试验,测定血样,获取实验数据并计算“真实性”和“可靠... 对自制AFP时间分辨荧光免疫法(TRFIA)试剂盒进行研究,为临床应用评价提供科学依据。收集血清标本450份,分别以化学发光免疫分析(CLIA)和RIA为对照,用AutoDELFIATMhAFP试剂盒为复核试验,测定血样,获取实验数据并计算“真实性”和“可靠性”。结果表明,CLIA及RIA为对照试验,其阳性符合率分别为99.0%和97.4%,阴性符合率分别为97.2%和94.1%,检验均无显著性差异(P>0.05)。本试剂盒的定量测定值与CLIA比较接近,相关系数为0.994,与RIA为0.917,两者相关性好(P<0.01)。本试剂盒检测性能能满足临床应用的需要。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 时间分辨荧光免疫法 化学发光免疫分析法 放射免疫分析法
下载PDF
原发性肝癌患者凝血指标和血小板参数变化的临床意义 被引量:8
16
作者 马丽颜 孙朝晖 杭建峰 《华南国防医学杂志》 CAS 2011年第4期330-331,334,共3页
目的检测原发性肝癌患者(primary hepatic carcinoma,PHC)的凝血指标和血小板参数,探讨其变化及临床意义。方法凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplas... 目的检测原发性肝癌患者(primary hepatic carcinoma,PHC)的凝血指标和血小板参数,探讨其变化及临床意义。方法凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)四项凝血指标采用法国STA-COMPACT全自动凝血仪检测;血小板计数(platelet,PLT)、血小板平均体积(mean platelet volume,MPV)、血小板体积分布宽度(platelet distribution width,PDW)、血小板压积(plateletcrit,PCT)、大血小板比例(platelet large cell ratio,P-LCR)等几项血小板参数使用XE-2100血细胞分析仪检测。比较76例PHC患者与正常对照的差异。结果与对照组比较,原发性肝癌患者的PT、APTT、TT均明显延长,FIB明显下降,PLT、MPV、PCT、P-LCR均较对照组高(P均<0.05),而PDW差异无统计学意义(P>0.05)。结论原发性肝癌患者凝血指标与血小板参数的异常,对监测肝脏受损的严重程度和预防出血倾向有着一定的临床意义。 展开更多
关键词 原发性肝癌 凝血 血小板
下载PDF
Sysmex XN-1000血液分析仪检测血小板3种方法的比较 被引量:7
17
作者 曾珠 邹妞 +4 位作者 杭建峰 张卫云 符玉文 李林海 孙朝晖 《生物技术通讯》 CAS 2017年第6期846-849,共4页
目的:评价Sysmex XN-1000血液分析仪检测血小板(PLT)3种方法的准确性。方法:收集广州总医院2017年1、2月住院病人血液标本共166例,分别用手工法和XN-1000血液分析仪的电阻抗法(PLT-I)、光学法(PLT-O)、荧光染色法(PLT-F)检测同一标本的... 目的:评价Sysmex XN-1000血液分析仪检测血小板(PLT)3种方法的准确性。方法:收集广州总医院2017年1、2月住院病人血液标本共166例,分别用手工法和XN-1000血液分析仪的电阻抗法(PLT-I)、光学法(PLT-O)、荧光染色法(PLT-F)检测同一标本的血小板计数,以手工法为参考标准,比较XN-1000血液分析仪3种方法的准确性。结果:当PLT计数范围为100×10~9~300×10~9/L和>300×10~9/L时,3种仪器法与手工法结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);当PLT<100×10~9/L时,仪器法中的PLT-O和PLT-F法与手工法结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),而PLT-I法与手工法结果比较,差异有统计学意义(P<0.05),其与手工法的相关性比较依次为PLT-F>PLT-O>PLT-I。结论:当PLT>100×10~9/L时,仪器检测血小板计数3种方法的准确性均较好;当PLT<100×10~9/L时,PLT-F和PLT-O法的检测准确性优于PLT-I法。 展开更多
关键词 血小板计数 电阻抗法 光学法 荧光染色法
下载PDF
不合格临床检验标本综合分析在质量控制中的作用 被引量:9
18
作者 孙朝晖 屈琳琳 杭建峰 《解放军医院管理杂志》 2015年第11期1039-1041,共3页
目的对不合格临床检验标本进行综合分析,探讨原因及发生的比例,达到提高标本分析前质量的目的。方法采用回顾性研究方法,分析2012年3月至2013年2月广州军区广州总医院分析前不合格的血液标本1728例、尿液标本829例、粪便标本372例,... 目的对不合格临床检验标本进行综合分析,探讨原因及发生的比例,达到提高标本分析前质量的目的。方法采用回顾性研究方法,分析2012年3月至2013年2月广州军区广州总医院分析前不合格的血液标本1728例、尿液标本829例、粪便标本372例,运用统计学方法对数据进行综合分析。结果血液、尿液、粪便标本不合格率分别是3.71‰、3.61‰、11.53‰。不合格原因:血液标本以标本凝块最常见占3.42‰,其中又以紫色EDTA-K:管发生标本凝块的风险最高(x^2=248.779,P〈0.001);尿液不合格标本主要原因是量少占2.08‰;粪便不合格主要原因是无标本占7.19‰。结论及时反馈结果给临床医护人员,共同建立完善的控制标本不合格率的制度,降低标本不合格率,确保分析前质量。 展开更多
关键词 标本制备 实验室 医院 质量控制
下载PDF
基于Crispr/Cas9技术构建真核细胞激酶敲除文库质粒 被引量:2
19
作者 肖斌 全静雯 +7 位作者 陈丽丹 杭建峰 张卫云 张蓉 廖扬 陈建芸 孙朝晖 李林海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第24期4038-4042,共5页
目的拟靶向细胞内一群重要的信号转导因子—激酶,利用CRISPR/Cas9技术构建真核细胞敲除文库质粒,并探讨其构建方案。方法拟靶向编码人源激酶蛋白的507个基因开放阅读框,针对每个基因片段设计10个作用靶点,通过芯片法合成引物库(oligo po... 目的拟靶向细胞内一群重要的信号转导因子—激酶,利用CRISPR/Cas9技术构建真核细胞敲除文库质粒,并探讨其构建方案。方法拟靶向编码人源激酶蛋白的507个基因开放阅读框,针对每个基因片段设计10个作用靶点,通过芯片法合成引物库(oligo pools)后,将引物从芯片上洗脱下来;合成的引物模板序列经PCR扩增、割胶回收后,与Cas9慢病毒载体连接,电转化至感受态细胞并提取质粒;质粒转化至Stbl3感受态细胞后,随机挑取单克隆进行摇菌,并送测序。结果 (1)对选取的507个激酶基因进行GO分析,发现细胞激酶广泛参与各种重要的细胞信号通路;(2)以oligo pool为模板,利用合成的通用引物进行PCR扩增,得到大小约为140 bp的条带,符合预期;(3)在鉴定的40个文库质粒克隆中,共有34个克隆样品测序成功,其中25个样品与设计的目标序列完全一致,9个样品存在一定引物合成突变。部分克隆存在摇菌失败、测序无信号或双峰等因素。结论构建好的CRISPR/Cas9激酶敲除文库可广泛用于筛选介导细胞增殖、转移、耐药、自噬等表型的重要激酶,为阐明激酶在疾病发生发展中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 基因敲除 CRISPR/Cas9文库 激酶 高通量
下载PDF
时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂临床应用研究 被引量:2
20
作者 徐伟文 吴英松 +5 位作者 杭建峰 王从容 张国兰 余伟鸿 裘宇容 李明 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第6期28-31,共4页
目的对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂盒进行临床应用研究,为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法收集血清标本326份,用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定,并以化学发光法(R oche)为对照方法... 目的对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂盒进行临床应用研究,为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法收集血清标本326份,用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定,并以化学发光法(R oche)为对照方法,W ALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒(A u toDELF IATMhCEA)作为复核试验,获取相关目标实验数据,并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果以化学发光法为对照试验,其阳性符合率为95.83%,阴性符合率为98.73%,检验无显著性差异;自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致,相关系数达0.93,相关性好。结论试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿,能满足临床应用的需要。 展开更多
关键词 癌胚肮原 时间分辨免疫荧光法 化学发光免疫分析法
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部