ALKBH5对人肝癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨ALKBH5对肝癌细胞迁移、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)的影响。方法选择手术切除的肝癌标本50例,分析ALKBH5与临床病理学参数的关系。设计ALKBH5短发夹核糖核酸(shRNA)序列,构建pLKO.1-TRC vector载体,慢病毒感染肝癌细胞HepG2和SMMC7721,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达ALKBH5细胞株;检测ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白质水平干扰效率;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白的影响。结果肝癌中ALKBH5蛋白表达与分化程度、临床分期存在相关性(P<0.05),与血清甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤大小、年龄、性别均无相关性(P>0.05);下调肝癌细胞ALKBH5表达,对照组和实验组HepG2细胞迁移数目分别为(123±22)、(335±21)个,侵袭数目分别为(118±29)、(282±17)个;对照组和实验组SMMC7721细胞迁移数目分别为(220±27)、(453±23)个,侵袭数目分别为(200±11)、(388±20)个,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。下调ALKBH5表达后,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低,波形蛋白(Vimentin)、锌指结构转录抑制因子(Snail)表达水平增高。结论ALKBH5扮演了抑癌基因的角色,下调ALKBH5表达能够促进肝癌细胞的迁移、侵袭及EMT。

停电以后……

星期五放学回家，妈妈对我说：“今天停电了，你不能做作业了。”我一听，高兴极了。

可口的午餐

又到了星期五中午,我刚进餐厅就想:今天吃什么呢?一看,原来是咸肉饭和鸡。咸肉饭里还有红红的胡萝卜和香香的肉。我闻了闻,馋得口水都快流出来了。