体外评估hDPCs-PRF复合体内hDPCs的迁移行为

目的:在前期成功构建人牙髓细胞(hDPCs)—富血小板纤维蛋白(PRF)复合体基础上,观察hDPCs在复合体中的迁移能力。方法:采用组织块法分离培养hDPCs,制备hDPCs-PRF复合体,培养7 d、14 d、21 d后行苏木精—伊红(HE)染色,观察hDPCs的形态及迁移行为。结果:初期hDPCs-PRF复合体中,白细胞、牙髓细胞主要存在于白膜层中;随着培养时间的延长,白膜层逐渐溶解消失,白细胞及牙髓细胞沿着复合体边缘游走,hDPCs由原来的椭圆形变成长梭形。培养21 d后,显微镜下可见hDPCs-PRF复合体培养基中大量hDPCs的存在,大部分细胞生长状况良好。结论:hDPC-PRF复合体可缓慢降解并同步释放复合体内的牙髓细胞;hDPCs-PRF复合体中释放的牙髓细胞仍具有继续增殖分化的潜力。

SDF-1/CXCR4信号轴在牙髓血运重建中的作用

目的:研究基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4(SDF-1/CXCR4)信号轴在牙髓血运重建中对组织再生的作用。方法:18只8周龄SD大鼠随机分为常规组(N组)、常规+SDF-1水凝胶组(N+SDF-1组)和常规+抗SDF-1抗体中和作用组(N+antiSDF-1组),每组6只,实验牙为双侧下颌第一磨牙,建立无髓根管模型后,按照分组进行处理。14 d后,收集双侧下颌骨,分别进行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学检测,观察根管新生组织类型以及CXCR4+细胞情况。结果:N组、N+SDF-1组根管新生组织冠方为不规则矿化基质,根尖方向可见成纤维样细胞组成的致密结缔组织,N+SDF-1组部分根管内可见新生小血管;N+anti SDF-1组典型组织学表现为根管内无明显的新生结缔组织,根尖孔区有大量的幼稚成纤维样细胞和小血管集聚,细胞无进入根管内的趋势。N组和N+SDF-1组根管内CXCR4+细胞,N+anti SDF-1组根管内见少量CXCR4+细胞。结论:SDF-1/CXCR4信号轴在牙髓血运重建中通过趋化细胞归巢进入根管内的方式,参与了组织再生,并具有促进血管新生的作用。

利格列汀应用于牙髓血运重建治疗的安全性探索

目的:研究DPP-4抑制剂利格列汀对大鼠牙髓血运重建治疗中血糖与体重的影响。方法:将18只SD大鼠随机分为3组,每组6只。实验组:下颌第一磨牙行牙髓血运重建术并灌胃利格列汀;对照组:下颌第一磨牙行牙髓血运重建术并灌胃羧甲基纤维素钠;空白组:下颌第一磨牙不作处理并灌胃羧甲基纤维素钠。在实验前及灌胃后7d、14d、21d、28d检测大鼠空腹血糖及体重。结果:在实验前和灌胃7d、14d、21d、28d后3组大鼠空腹血糖值及体重差值比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:DPP-4抑制剂利格列汀对于牙髓血运重建中大鼠的血糖与体重无明显影响。

试剂盒法与差速超速离心法所提取的人牙髓细胞外泌体的鉴定与比较

目的:采用试剂盒法以及差速超速离心法提取的人牙髓细胞外泌体(hDPC-DEs),并进行鉴定与比较。方法:培养原代人牙髓细胞(hDPCs)并鉴定,收集hDPCs培养上清,分别采用试剂盒法和差速超速离心法提取hDPC-DEs,在透射电镜下进行形态学观察,利用免疫印记(Western blotting)法对外泌体表面标记蛋白CD9的表达进行检测,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外泌体表面标记蛋白CD63的浓度。结果:透射电镜下试剂盒法与差速超速离心法所提hDPC-DEs均表现为典型的茶托状双层膜结构,直径在50～120nm,试剂盒组背景杂质较多,差速离心组背景较为清晰。两种方法提取的hDPCDEs特异性标志蛋白CD9均呈阳性表达。试剂盒组外泌体标志蛋白CD63的浓度高于差速超速离心组(P<0.05)。结论:试剂盒法与差速超速离心法均可获得hDPC-DEs,前者操作简便,所提取的hDPC-DEs的浓度较高,但杂质可能比较多。

数字化切片技术在实验教学中的应用

阐述在口腔组织病理学实验课中引入数字化切片平台,探讨传统实验教学模式和数字化切片教学模式的特点,并分别评估两者的教学效果,数字化切片的应用效果。