基于复杂网络分析针灸治疗炎症性肠病腧穴配伍规律

目的通过复杂网络技术,分析针灸临床治疗炎症性肠病(IBD)的选穴规律。方法检索中国知网(CNKI)、维普中文期刊服务平台(VIP)、万方数据知识服务平台(Wanfang Data)、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、Ovid建库至2021年5月31日收录的针灸治疗IBD的临床研究文献,采用Excel2019建立处方腧穴数据库,通过SPSS Modeler 18.0软件进行关联规则分析,采用Gephi0.9.2软件构建复杂网络模型并分析拓扑结构。结果共纳入384首针灸处方,涉及81个腧穴,高频腧穴包括天枢、足三里、上巨虚、大肠俞、关元,多选用特定穴中的募穴、下合穴,所用腧穴以足阳明胃经、任脉经穴为主;关联规则分析显示,关联程度最高的是天枢-足三里。结论针灸治疗IBD选穴以足阳明胃经腧穴为主,且多用特定穴,以募穴为主。天枢是治疗IBD核心腧穴,与足三里、上巨虚、大肠俞等穴配伍使用。

近20年针灸治疗克罗恩病的临床研究与选穴规律

目的:汇总分析近20年针灸治疗克罗恩病(CD)的临床研究文献,总结归纳针灸治疗CD的临床研究进展与选穴规律,为优化针灸治疗CD的临床方案、提高针灸治疗CD的临床疗效提供新的思路和参考。方法:检索国家知识基础设施数据库(CNKI)、中国学术期刊数据库(CSPD)、中文科技期刊数据库(CCD)、PubMed数据库、Web of Science数据库,检索时限为2000年1月1日至2020年12月31日,运用Microsoft Excel 2013和Clementine 12.0软件,汇总分析针灸治疗CD的诊断标准、研究类型与分组、治疗方案、选穴规律、疗效评价与结局指标等。结果:共纳入文献15篇,针灸治疗CD临床研究的诊断标准不断更新,主要与西药、针灸、健康志愿者进行随机对照研究;隔药灸、毫针刺、电针是针灸治疗CD的主要方法;气海、天枢、中脘、足三里、上巨虚间存在较强关联关系,是临床常用穴;针灸治疗CD疗效显著,不良反应发生率低;修复肠黏膜损伤,改善肠道免疫功能和大脑功能是当前针灸治疗CD临床研究主要关注的效应机制。结论:针灸治疗CD安全、有效,推荐隔药灸、毫针刺、电针为主要干预方法,气海、天枢、中脘、足三里、上巨虚为主穴。

艾灸调节溃疡性结肠炎小鼠E3泛素连接酶TRIM31的肠黏膜屏障保护机制

目的:观察艾灸对野生型和TRIM31基因敲除(TRIM31^(-/-))溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠紧密连接蛋白以及血清炎症介质的影响,探讨TRIM31能否通过保护UC肠黏膜屏障而降低UC肠道炎症反应以及艾灸对其调节作用。方法:分别采用野生型和TRIM31基因敲除小鼠构建UC模型,免疫组织化学检测结肠组织中TRIM31、闭合蛋白、密封蛋白、ZO-1的蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测法检测结肠组织中TRIM31的mRNA表达;ELISA检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-13、IL-25、IL-33蛋白的浓度。结果:艾灸可改善野生型UC小鼠的结肠炎症,升高结肠TRIM31蛋白及mRNA的表达以及肠黏膜屏障相关闭合蛋白、密封蛋白、ZO-1的表达,降低血清炎症介质IL-1β、IL-13、IL-25、IL-33的浓度;TRIM31^(-/-)小鼠较野生型小鼠相比,结肠炎症加重,肠黏膜屏障相关闭合蛋白、密封蛋白、ZO-1表达降低,血清炎症介质IL-1β、IL-13浓度升高;艾灸还可改善TRIM31^(-/-)UC小鼠的结肠炎症,升高结肠组织肠黏膜屏障相关闭合蛋白、密封蛋白、ZO-1的表达,降低血清炎症介质IL-1β、IL-13、IL-25、IL-33的浓度。结论:TRIM31蛋白可能是艾灸参与调节UC肠黏膜屏障保护的关键靶点;艾灸对TRIM31^(-/-)小鼠肠黏膜屏障相关闭合蛋白、密封蛋白、ZO-1及血清炎症介质IL-1β、IL-13、IL-25、IL-33仍有调节作用,表明艾灸还可能通过发挥其多靶点调节作用参与UC肠黏膜屏障保护。

温和灸足三里穴对自然衰老大鼠的肾脏保护作用及肾组织纤连蛋白、转化生长因子-β_(1)表达的影响

目的:探讨温和灸足三里穴对自然衰老大鼠的肾保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机数字表法分为自然衰老组和艾灸足三里组,同时设立9个月龄对照组,每组10只。自然衰老组常规饲养至20个月龄,艾灸足三里组从14个月龄开始温和灸“足三里”穴,1次/d,20 min/次,两侧穴位交替进行,直至20个月龄。结果:与9个月龄对照组比较,自然衰老组大鼠毛发枯黄,精神不振,活动欠灵活;肾结构改变,肾间质出现炎细胞浸润以及大量蓝色胶原纤维,肾组织中β-半乳糖苷酶表达升高(P<0.05),24 h尿蛋白含量升高(P<0.05),大鼠肾组织纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))mRNA表达均增加(P<0.01)。与自然衰老组比较,艾灸足三里组大鼠毛发润泽,色泽微黄,活动灵活,日常活动均有不同程度改善;胶原染色减少,肾组织中β-半乳糖苷酶表达降低(P<0.05),24 h尿蛋白含量降低(P<0.05),肾组织中FN、TGF-β_(1)mRNA表达降低(P<0.05)。结论:温和灸足三里穴能减轻大鼠因增龄造成的肾损伤,对自然衰老大鼠具有肾脏保护作用,可能与抑制肾组织FN表达及TGF-β_(1)基因转录有关。

基于16S rDNA高通量测序研究针灸对克罗恩病大鼠肠道菌群的调节作用

目的:采用16S rDNA高通量测序技术分析针灸对克罗恩病(CD)大鼠肠道菌群物种相对丰度和多样性的影响,探讨针灸对克罗恩病的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药饼灸组、电针组和西药组,每组8只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸溶液灌肠4周构建CD大鼠模型,隔药饼灸组和电针组选取天枢(双侧)、气海穴进行干预,西药组采用柳氮磺吡啶溶液灌胃干预。干预结束后取结肠组织进行HE染色,收取大鼠粪便进行16S rDNA高通量测序并对进行物种相对丰度、alpha多样性和基因功能代谢预测分析等。结果:隔药饼灸组和电针组大鼠结肠组织病理学评分显著低于模型组(P<0.01)。与正常组比较,模型组拟杆菌门、放线菌门、拟杆菌纲、拟杆菌目、紫单胞菌科、普雷沃菌科、拟杆菌科、普雷沃菌属等的相对丰度升高,厚壁菌门、变形菌门、梭菌纲、梭菌目、毛螺菌科、瘤胃菌科、乳酸杆菌属等的相对丰度降低;在经过隔药饼灸和电针治疗后,上述大多数微生物相对丰度均有不同程度改善。与正常组比较,模型组肠道菌群的Chao1、Observed species、Shannon、Simpson等alpha多样性指数均显著下降(P<0.05);与模型组比较,隔药饼灸组和电针组上述指数均显著升高(P<0.05)。功能预测分析发现隔药饼灸和电针均能调节参与碳水化合物代谢、氨基酸代谢等的功能基因。结论:CD与肠道菌群结构变化有关,针灸能够调节CD大鼠肠道菌群物种相对丰度和菌群多样性。

艾灸对结肠炎相关性结肠癌大鼠细胞增殖相关蛋白PCNA、CyclinD1的影响

目的:观察艾灸“天枢、气海”穴对结肠炎相关性结肠癌(CAC)模型大鼠肿瘤的影响,从细胞增殖角度探讨艾灸对CAC的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组、隔姜灸组。采用AOM/DSS方法构建CAC模型,隔药灸组和隔姜灸组选用“天枢、气海”穴,每穴灸2壮/次,共30次。观察大鼠结肠组织成瘤率、组织病理学改变和肿瘤评分;ELISA法检测血清CysC含量;免疫组化法、Western blot法检测结肠组织PCNA和CyclinD1蛋白表达水平。结果:与正常组比,模型组成瘤率和肿瘤评分均升高(P 【0.05),光镜下结肠组织可见不同级别异型增生,达到腺癌程度;血清CysC含量、结肠组织PCNA和CyclinD1蛋白的表达均显著升高(P 【0.05)。与模型组比,隔药灸组、隔姜灸组成瘤率和肿瘤评分均降低(P 【0.05),血清CysC含量、结肠组织PCNA和CyclinD1蛋白的表达均显著降低(P 【0.05)。结论:隔药灸和隔姜灸可延缓CAC肿瘤生长,其机制可能与降低结肠组织PCNA和CyclinD1蛋白的表达,从而抑制结肠细胞增殖相关。

艾灸对结肠炎相关性结肠癌大鼠P2X7R/STAT3/VEGF途径的影响

艾灸对结肠炎相关性结肠癌大鼠P2X7R/STAT3/VEGF途径的影响中文摘要:目的:观察隔药灸和隔姜灸对结肠炎相关性结肠癌(CACC)大鼠结肠肿瘤的影响,从嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)/转录激活因子3(STAT3)/血管内皮生长因子(VEGF)途径探讨艾灸干预CACC的效应机制.方法:选用Sprague-Dawley雄性大鼠26只,按照随机数字表法选择6只大鼠为正常组,其余20只采用腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM)结合葡聚糖硫酸钠(DSS)给药的方法制备CACC模型.造模后随机选择2只进行模型鉴定,其余18只造模成功的大鼠随机分为模型组、隔药灸组和隔姜灸组,每组6只.隔药灸组和隔姜灸组大鼠分别接受隔药灸和隔姜灸干预,两组均取气海和双侧天枢,每次每穴灸2壮,每日1次,连续干预6次后休息1 d,共干预30次.干预结束后,观察大鼠结肠组织瘤负荷和病理学改变,并进行病理学评分;采用免疫组化法检测结肠组织中VEGF、P2X7R、磷酸化STAT3(p-STAT3)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达;免疫印迹法检测结肠组织p-STAT3和NF-κB p65蛋白的表达.结果:与正常组比,模型组大鼠结肠组织瘤负荷增多,病理学评分显著升高(均P<0.001),结肠组织可见不同级别异型增生形成,达到腺癌程度;结肠组织P2X7R蛋白表达水平显著降低(P<0.001),p-STAT3、NF-κB p65和VEGF蛋白表达水平显著升高(均P<0.001).与模型组比,隔药灸组和隔姜灸组大鼠结肠组织瘤负荷减少,结肠组织病理学评分,p-STAT3、NF-κB p65及VEGF蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05);结肠组织P2X7R蛋白表达水平显著升高(均P<0.05).结论:隔药灸和隔姜灸均能降低CACC大鼠结肠瘤负荷,延缓结肠组织腺瘤的进展;其机制可能与通过P2X7R/STAT3途径抑制STAT3磷酸化,进而降低VEGF蛋白表达有关.

艾灸对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜屏障影响的观察

目的:观察艾灸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜屏障的影响.方法:将雄性Sprague-Dawley大鼠40只随机分成正常组和造模组,每组20只.造模组大鼠连续7 d饮用4%DSS建立实验性大鼠UC模型.随机选取造模大鼠2只,正常大鼠2只用于模型鉴定.确认UC模型成功后,将剩余18只造模大鼠随机分为3组,即模型组、模型+隔药灸组和模型+温和灸组,每组6只;将剩余的正常大鼠随机分为3组,即正常组、正常+隔药灸组和正常+温和灸组,每组6只.隔药灸、温和灸均干预7 d后采用苏木素-伊红(HE)染色技术,在光镜下观察结肠组织病理变化情况;采用免疫印迹法和/或免疫组化技术检测大鼠结肠组织咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白(Claudin)、结合黏附分子1(JAM1)、黏蛋白2(MUC2)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达.结果:与正常组相比,模型组结肠组织损伤严重,病理学评分显著升高,Occludin、Claudin、JAM1、MUC2和TGF-β1蛋白表达显著降低(P<0.01);正常+隔药灸组和正常+温和灸组大鼠的结肠组织病理学评分,Occludin、Claudin、JAM1、MUC2和TGF-β1蛋白表达均无明显变化(P>0.05).与模型组相比,模型+隔药灸组和模型+温和灸组结肠组织损伤修复,溃疡愈合,病理学评分显著降低,JAM1、MUC2和TGF-β1蛋白表达显著升高(P<0.05),模型+温和灸组结肠组织Occludin蛋白表达升高(P<0.01).结论:隔药灸和温和灸均未对正常大鼠的结肠组织病理学和肠黏膜屏障相关蛋白表达产生影响;隔药灸和温和灸均能上调UC大鼠结肠组织JAM1、MUC2和TGF-β1蛋白表达,温和灸能上调Occludin蛋白表达,这可能是艾灸减轻UC结肠黏膜炎症的作用机制之一.