2016-2018年东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药表型、耐药机制和分子流行病学分析

目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC-2)基因环境,为临床寻找控制和治疗该致病菌的更优方案提供参考。方法回顾性收集2016年1月—2018年12月东莞市人民医院、东莞东华医院、康华医院、东莞市中医院和东莞市妇幼保健院等十三所医院的住院患者的CRE菌株进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验。以美罗培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最小抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌目细菌进行初筛;采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA双纸片协同试验和CIM试验检测CRE产酶情况;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并鉴定CRE的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(DHA)、bla_(CTX-M)和bla_(CMY)),以及CRKP的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和孔蛋白(OmpK35、OmpK36和OmpK37);通过Junction PCR、Mapping PCR和Crossing PCR检测bla_(KPC-2)基因环境;使用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分离株在标本和科室中的分布与耐药情况,以及碳青霉烯酶基因在科室中的分布情况。结果从37217株肠杆菌目细菌中共检出131株CRE(占0.35%),其中肺炎克雷伯菌79株(占60.31%)、大肠埃希菌21株(占16.03%)和阴沟肠杆菌12株(占9.16%);检出CRE的临床科室主要为ICU(66株,占50.38%);在检出CRE的标本中,位于前3位分别是痰液标本(56株,占42.75%)、尿液标本(21株,占16.03%)、伤口分泌物标本(12株,占9.16%);CRE对目前临床中常使用的抗菌药物表现出高耐药性,仅对阿米卡星耐药率较低,为21.38%。检测104株CRE(包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌)发现的碳青霉烯酶有KPC-2型(57,54.81%)、NDM-1型(7株,6.73%)和NDM-5型(2株,1.92%);其中,CRKP主要为ST11型(49株,占62.03%),其次为ST1型(25株,占31.65%);ompK35(75株,占94.94%)、ompK36(77株,占97.47%)和ompK37(79株,占100%)发生突变的占比高;bla_(KPC-2)的基因环境主要为B1型突变型(38株,占48.10%),其次为A型突变型(14株,占17.72%)。结论2016—2018年东莞地区临床CRE检出率为0.35%,耐药性强,其中,CRKP主要为ST11型,主要流行的是KPC-2型,其基因环境为B1型突变型,而且孔蛋白突变占比极高,这提示东莞地区bla_(KPC-2)基因主要通过质粒进行传播,并且孔蛋白突变在CRE中发挥重要作用,院内感染医务工作者应根据该菌科室分布、耐药情况和耐药机制等特点,采取合理有效的预防和治疗方法。

重症监护病房病原菌分布及耐药性分析

目的回顾性研究重症监护病房(ICU)患者常见病原菌分布及变迁,为合理使用抗菌药物、有效控制感染提供依据。方法对该院ICU2006年1月至2011年12月的所有分离菌株,采用VITEK32全自动微生物分析仪鉴定细菌,用纸片扩散法(K-B法)对常用抗菌药物进行耐药性分析。结果共分离1531株细菌,革兰阴性杆菌共868株(56.7%),革兰阳性菌381株(24.9%),真菌225株(14.7%)。所占比例排前5位的革兰阴性杆菌分别是肺炎克雷伯菌(13.3%)、鲍曼不动杆菌(12.1%)、大肠埃希菌(9.7%)、铜绿假单胞菌(7.8%)、嗜麦芽寡养单胞菌(3.0%)。所占比例排前5位的革兰阳性球菌分别是金黄色葡萄球菌(8.6%)、溶血性葡萄球菌(3.3%)、表皮葡萄球菌(3.1%)、粪肠球菌(2.3%)、肺炎链球菌(1.9%)。革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药率较高,对亚胺培南保持较高的敏感性;未发现对万古霉素不敏感的葡萄球菌。结论 ICU病房感染的细菌仍以革兰阴性杆菌为主,革兰阳性菌感染率有上升趋势。细菌耐药率高,用细菌耐药性检测结果指导临床用药可以控制耐药菌的产生。

2015年广东省东莞市细菌耐药性监测结果

目的了解2015年东莞市细菌耐药性监测情况。方法采用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)或自动化仪器法对东莞市22所医院的临床分离菌进行药敏试验,参照2015版CLSI标准判定药敏结果,并用WHONET5.6软件统计分析。结果东莞市各医院全年共检出细菌29 665株,其中革兰阳性菌9 509株,占32.1%,革兰阴性菌20 156株,占67.9%。MRSA和MRCNS分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的23.3%(705/3 024)和43.6%(1 054/2 419),未发现耐万古霉素葡萄球菌;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL菌株的检出率分别为36.4%(2 554/7 020)和24.5%(792/3 227),耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的检出率为0.2%(30/13 077);耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌(CRPA和CRAB)的检出率分别为16.0%(500/3 116)和53.9%(827/1 533)。青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检出率为10.1%(142/1 404),流感嗜血杆菌产β内酰胺酶率为30.6%(276/902),耐万古霉素的肠球菌(VRE)检出率为0.7%(10/1 441)。结论定期进行细菌耐药性监测有助于了解本地区细菌耐药性变迁,为临床合理规范使用抗菌药物提供依据,指导院感管理防控措施的制定和避免耐药菌株的传播流行。

东莞地区临床分离耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌的耐药特点及其机制研究

目的回顾分析东莞东华医院2011~2013年临床分离的鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药特点,为临床合理用药和防止医源性感染提供依据。方法选取2011~2013年东华医院临床分离的非重复鲍曼不动杆菌菌株30株,采用琼脂稀释法检测该菌对11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),采用乙二胺四乙酸纸片协同实验检测待检菌株的金属酶表型,采用三维实验检测待检菌株的Amp C酶表型和改良Hodge实验筛查碳青霉烯酶,聚合酶链反应进行OXA-23、OXA-24编码基因的检测,应用脉冲场凝胶电泳进行同源性分析。结果在监测的14种抗菌药物MIC中,耐药率>60%的达13种,其中只有头孢哌酮舒巴坦耐药率<50%,共筛选出耐碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌30株,其中金属酶表型和基因检测均为阴性,Amp C酶阳性者21株,改良Hodge实验阳性24株,其中26株OXA-23基因扩增阳性,未检出OXA-24基因,可见OXA-23基因为主要的流行克隆株。结论东莞地区临床分离的鲍曼不动杆菌多重耐药十分严重,产OXA-23碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶类药物耐药的重要机制,且碳青霉烯酶耐药菌株存在克隆流行。

2009-2014年我院临床分离鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析

目的了解东莞东华医院6年间临床分离鲍曼不动杆菌感染的分布情况及其耐药性变化趋势,为临床合理使用抗菌药物及有效控制感染提供依据。方法对我院2009-2014年临床送检标本进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验,并用WHONET 5.6软件统计分析各病区各类标本中鲍曼不动杆菌的分布及耐药性的变化情况。结果于2009-2014年共检出鲍曼不动杆菌1 328株,以病房患者呼吸道标本检出为主,为1 000株,占75.3%,其次为伤口分泌物,为113株,占8.5%;鲍曼不动杆菌主要分布在ICU、脑外科、神经内科和呼吸内科。鲍曼不动杆菌对临床常用的14种抗菌药物耐药率以及临床分离率总体呈现出上升的势头,其中对亚胺培南和美洛培南的耐药率明显上升,亚胺培南的耐药率从2009年的2.9%上升至2014年的58.6%,美洛培南的耐药率从2009年的0.0%上升至2014年的59.4%;喹诺酮类及三代头孢的耐药率均呈不同幅度上升,且耐药率均大于50%。结论鲍曼不动杆菌耐药性呈上升趋势,耐药形势严峻,应了解临床分离的鲍曼不动杆菌耐药情况,及时监测其耐药现状,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。

东莞地区热带念珠菌临床分离株耐药性及基因分型研究

目的分析东莞东华医院临床分离热带念珠菌的科室分布和耐药特点,并对其进行分子特征研究,为临床感染热带念珠菌精准治疗提供抗菌药物选择理论依据。方法收集2016年1月-2017年12月住院患者分离的非重复热带念珠菌共92株,采用ATB FUNGUS 3药物敏感性检测板条分析菌株对抗真菌药物的耐药性,采用多位点序列分型法(MLST)对其进行分型,同时应用MEGA 5.2软件中UPGMA方法对92株热带念珠菌进行同源性分析。结果 92株热带念球菌分别来自重症监护病房(30株)、神经外科(20株)、呼吸内科(16株)、肿瘤内科(8株)、血液科(8株)、内分泌科(4株)以及其他科室6株;对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的敏感率分别为:100%、100%、85.87%、56.52%和89.13%;MLST分型分析结果显示,产生92个序列型(ST型),其中72种为新型别;进化树分析显示,92株临床株分布为三大簇,唑类耐药株中有26株分布于同一簇。结论唑类药物的耐药现象比两性霉素B和5-氟胞嘧啶严重,合理精准使用抗菌药物,减少二重感染和多重耐药的发生,而MLST分型显示与其遗传背景密切相关,值得临床重视。

东莞部分地区感染性腹泻致病菌的培养结果及耐药性分析

目的探讨东莞部分地区引起感染性腹泻致原菌分布及耐药状况，为本地区流行病学研究及临床合理用药提供依据。方法收集2001年1月至2009年12月中山大学附属东华医院住院部和门急诊的5939份腹泻患者的粪便标本进行微生物培养、鉴定及药敏试验，并加以比较分析。结果5939份粪便标本中，共检出致病菌369株，阳性分离率为6．2％，其中分离出志贺菌属118株（32．0％）、沙门菌属115株（31．2％），致病性大肠杆菌81株（21．9％）、弧菌属24株（6．5％）、单胞菌属19株（5．2％）、金黄色葡萄球菌10株（2．7％）及耶氏菌属2株（0．5％）。挑选11种抗菌药物进行体外敏感试验，各菌属对抗生素的敏感性有差异，对复方新诺明及氨苄西林耐药率较高，但对第三代头孢有较强的敏感性。结论东莞地区感染性腹泻的致病菌种类多，且耐药性不同，主要以志贺菌属和沙门菌属为主，应根据微生物鉴定及药敏试验结果指导临床合理使用抗生素，以提高治疗效果。

肠球菌属在血液标本的分布及耐药性分析

目的探讨肠球菌属在血液标本中的分布与耐药性变迁,为指导临床合理用药,控制感染提供依据。方法对该院2007～2009年临床送检血液标本进行常规培养、鉴定和药敏试验,并用WHONET 5.4软件统计分析这3年间肠球菌临床分离株血液标本、病区中的分布与耐药性的变迁情况。结果共检出肠球菌属细菌62株,菌株以粪肠球菌为主,共33株(53.2%),其次为屎肠球菌25株(40.3%);肠球菌属对红霉素、四环素和青霉素G有较高耐药性,无耐万古霉素的菌株。结论 3年来在细菌种类和耐药方面肠球菌属均发生了较大变化,不同种类的细菌其耐药性差异很大,临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗生素敏感性为依据,合理选用抗生素,以提高其疗效。

库尔特STKS全自动血细胞分析仪的性能评价

目的了解COULTER STKS全自动血细胞分析仪的性能,探讨库尔特STKS全自动血细胞分析仪在临床检验中的应用价值。方法随机采取40例EDTA-K_2抗凝静脉血,参考国际血液标准化委员会(ICSH)的有关规定采用COULTER STKS对常用指标,包括准确性、线性、重复性和携带污染率进行测定,并将其分类结果与手工白细胞分类进行比较,同时对120例标本进行病理细胞的筛选。结果 COULTER STKS测WBC、RBC、HGB和PLT相关性较好(r>0.98);批内和批间精密度较高;互染率<2%;其白细胞分类与手工显微镜分类结果相比,对于细胞形态正常标本之间差异无统计学意义;病理细胞筛选特异率为80.7%。结论 COULTER STKS全自动血细胞分析仪的准确性、重复性、线性与携带污染率良好,测定结果准确、可靠,可满足临床常规诊断工作。

东莞地区肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的表型与基因型分析

目的了解东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)临床感染分布、耐药情况以及产碳青霉烯酶的表型与基因型,完善东莞地区耐药监测信息,为临床控制和治疗CRE的感染提供可靠依据。方法使用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定药敏系统分析仪系统对东莞耐药监测网2020年收集的40株CRE菌株进行菌种鉴定与药敏试验,采用纸片扩散法(K-B法)和E-test法测定药敏。采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型,采用GeneXpert Carba-R检测和鉴定碳青霉烯酶的基因型。使用WHONET 5.6软件和SPSS23.0软件进行统计分析。结果40株CRE菌株中检出最高的是肺炎克雷伯菌27株(占67.5%),其次是大肠埃希菌10株(占25%);标本中检出率最高的是呼吸道标本(16株,占40%),其次是尿液标本(7株,占17.5%);40株CRE药敏结果显示,亚胺培南的耐药率为92.5%,美罗培南的耐药率为97.5%,替加环素的耐药率较低为40%;碳青霉烯酶型检测结果显示有37株(占92.5%)产生碳青霉烯酶,其中产A类丝氨酸碳青霉烯酶阳性24株(占60.0%),产B类金属β内酰胺酶阳性13株(占32.5%),未检出碳青霉烯酶菌株3株(占7.5%);GeneXpert Carba-R测定法检测出碳青霉烯酶基因共37株(占92.5%),检出13株blaNDM(占32.5%),24株blaKPC(占60%);携带blaKPC的CRE菌株对阿米卡星、替加环素和氨曲南的耐药率比携带blaNDM的CRE菌株的高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论东莞地区分离的CRE菌株以产A类丝氨酸碳青霉烯酶和产B类金属β-内酰胺酶的菌株为主。检出的碳青霉烯酶基因型主要为blaNDM和blaKPC,其中携带blaNDM的CRE菌株对阿米卡星、替加环素和氨曲南的耐药率较低。GeneXpert Carba-R可以快速检测并鉴定碳青霉烯酶基因型。建议实验室同时进行表型和基因型的检测,指导临床合理使用抗生素。

2015-2017年东华医院热带念珠菌的临床分布及耐药分析

目的分析东莞东华医院近三年热带念珠菌的临床分布及耐药情况,为临床防控该类菌奠定基础。方法收集中山大学附属东华医院2015-2017年热带念珠菌,采用科玛嘉显色培养基和VITEK-2-COMPACT全自动微生物分析仪鉴定筛选热带念珠菌,用ATB FUNGUS3药敏试剂条(MIC法)和纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,分析其临床分布特点和耐药性。比较两种方法测试热带念珠菌对同种抗菌药物的敏感性有无差异,并对相同药物的药敏结果进行统计学分析。结果三年间共分离获得174株热带念珠菌,样本主要来源于ICU、神经外科和普外科,样本种类主要是尿液和分泌物。ATB FUNGUS3药敏试剂条中,对氟康唑、两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶的耐药率为16.1%、0、13.8%、12.6%、0,纸片扩散法中,氟康唑、两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素的耐药率为13.8%、0、6.9%、4.6%、2.3%、0;两种方法测试热带念珠菌对两性霉素B、氟康唑和伏立康唑的敏感性比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但对伊曲康唑的敏感性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 K-B法的耐药率普遍低于MIC法,唑类药物的耐药现象比两性霉素B、5-氟胞嘧啶、制霉菌素严重,合理使用抗菌药物,减少二重感染和多重耐药的发生。

东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的临床分布及耐药性

目的了解东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布及其耐药性。方法回顾性分析2015年1月—2016年6月东莞市22所二级甲等及以上参加细菌耐药监测的医疗机构的住院患者分离的CRE菌株,应用WHONET5.6软件进行耐药性分析。结果共检出CRE71株,检出率0.34%(71/20 713)。CRE来源患者主要为15~60岁(53株,74.65%);男性(46株,64.79%);来源科室主要为重症监护病房(36株,50.70%);来源标本主要为痰(34株,47.89%),其次为尿(11株,15.49%)、伤口分泌物(6株,8.45%);感染类型主要为医院感染(64株,90.14%);主要来源于三级医院(56株,78.87%)。三级医院CRE检出率为0.41%(56/13 677),二级医院为0.21%(15/7 036)。71株CRE对亚胺培南均耐药,对美罗培南耐药率81.12%,耐药率<40%的药物仅有阿米卡星(21.38%)和妥布霉素(38.79%),对复方磺胺甲口恶唑的耐药率为48.23%,而对氟喹诺酮类、第三代头孢菌素及其含酶抑制剂等药物的耐药率均超过60%。结论东莞地区医疗机构CRE检出率低于全国及其他省份,应针对CRE检出的重点人群、科室采取有效预防控制措施,合理使用抗菌药物。

东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的临床分布特点及耐药性分析

目的:了解东莞市2016-2020年耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布特征,对其耐药性进行分析,为东莞地区抗菌药物使用和CRE防控策略提供研究基础。方法:从东莞地区细菌耐药监测网筛选2016-2020年期间收集的肠杆菌科细菌菌株,使用全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验,使用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果:从东莞地区细菌耐药监测网筛选2016-2020年肠杆菌科细菌共88047株,其中CRE占0.98%,共864株;CRE检出率最高的为阴沟肠杆菌(3.77%),其次为肺炎克雷伯菌(2.14%);尿液标本(288株)、呼吸道标本(248株)和分泌物标本(117株)是CRE菌株的主要的来源标本,占其菌株检出总数的1.12%、1.55%、0.61%;CRE主要分布于重症医学科(15.39%);864株CRE药敏结果显示,替加环素的耐药率10.0%,其他耐药率均大于30%,864株CRE菌株中三种主要菌株的药敏结果显示,替加环素对三种主要菌株均有较好的敏感性。结论:CRE菌株分布广泛,医院内主要来源于重症医学科;呼吸系统和泌尿系统是CRE的高发生率部位。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌在CRE菌株中所占比例最高;临床大多数常用抗菌药物被CRE所耐受,建议医院加强预防意识,合理使用抗菌药物,全面有效地控制CRE的发生和扩散。

外周血淋巴细胞亚群分布对同种免疫型复发性流产病因及淋巴细胞免疫治疗效果的评估价值

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群对同种免疫型复发性流产病因及淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)效果的评估价值。方法:选取2015年4月-2018年4月本院收治的自愿接受LIT的同种免疫型复发性流产患者85例作为观察组,以同期正常妊娠者78例作为对照组,比较两组外周血淋巴细胞亚群分布差异。对接受LIT的患者,比较一疗程组与两疗程组患者外周血淋巴细胞亚群分布差异。结果:观察组与对照组的外周血CD3^+T细胞、CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、Th/Ts、CD19^+B细胞、CD3^-CD56^+NK细胞比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05);一疗程组治疗前CD4^+CD25^+T细胞比例显著高于两疗程组,差异有统计学意义(P<0.05);一疗程组与两疗程组治疗前的CD3^+T细胞、CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、CD19^+B细胞、CD3^-CD56^+NK细胞、CD3^-CD56^+CD16^-NK细胞比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:外周血CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、Th/Ts、CD19^+B细胞及CD3^-CD56^+NK细胞比例不能对同种免疫型复发性流产进行病因评估,外周血淋巴细胞亚群是否能评估同种免疫型复发性流产的发生仍需多组数据论证。患者外周血CD4^+CD25^+T细胞可在淋巴细胞免疫治疗前预评估封闭抗体转为阳性情况,为评估治疗效果提供参考。

300株鲍曼不动杆菌琼脂稀释法与纸片扩散法药敏检测结果比较

目的:比较琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌的药敏试验结果。方法:随机挑选的300株鲍曼不动杆菌,检测其标本及科室的分布情况,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对环丙沙星(CIP)、庆大霉素(CN)、阿米卡星(AK)、头孢他啶(CAZ)、头孢吡肟(FEP)、左氧氟沙星(LEV)、氨苄西林-舒巴坦(SAM)、妥布霉素(TOB)、美洛培南(MEN)、米诺环素(MH)、头孢哌酮-舒巴坦(SCF)11种抗菌药物的敏感性,比较两种检测结果的差异。结果:300株鲍曼不动杆菌主要分布在痰液标本中,共214株,占71.3%,主要来源于ICU 101株(33.7%)及脑外科59株(19.7%)。药敏检测结果显示,两种检测方法所得的SCF和MH的敏感性差异具有统计学意义(P<0.05),其他9种抗菌药物的药敏检测结果差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌药敏试验结果并不完全一致,临床用药时尤其要注意SCF和MH这两种药物药敏结果的可靠性。

东莞地区1982例孕妇的TORCH检测与分析

目的了解东莞地区孕妇TORCH(TO、RCV、CMV、HSVⅠ和HSVⅡ)感染情况。方法ELISA法检测孕妇血清1982例,回顾性分析TORCH检测结果。结果TOX-IgM,RVU-IgM,CMV-IgM,HSVⅠ-IgM及HSVⅡ-IgM的阳性率分别为6.77%,0.81%,0.86%,11.30%及8.94%。结论孕妇由于内分泌的改变和免疫力的下降,易于发生某些病原体(如TORCH)的原发感染和复发感染,故应进行TORCH感染的检测与预防,以避免出现流产、死胎、先天畸形、发育迟缓等综合征,从而提高人口生育质量。