掺杂氰基苯乙烯的胆甾相液晶凝胶的双色性能

为了弥补单色防伪不足,设计了“双色”防伪材料的实验。通过缩合反应合成具有聚集诱导发光特性的氰基苯乙烯化合物,然后与向列相液晶、凝胶剂、手性剂物理混合制备兼具荧光和结构色的“双色”胆甾相液晶凝胶材料;利用薄层色谱、掺水实验、核磁共振波谱仪、紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计等分析材料的化学结构与颜色性能,并制备字符二级加密以及八卦中的“坎”与“离”图像加密模型。结果表明,制备的双色胆甾相液晶凝胶可用于信息存储与防伪领域。

PBL联合CBL教学法在留学生泌尿外科临床见习教学中的应用

目的探讨PBL联合CBL教学法在留学生泌尿外科临床见习教学的应用效果。方法将PBL联合CBL教学法应用于临床医学本科留学生泌尿外科临床见习教学,与传统讲授教学方法相比较,通过考核和问卷调查分析学习效果。结果实验组在对泌尿系疾病的理论知识掌握、激发学习兴趣、自主学习能力、团队合作意识、疾病的诊治分析和临床思维培养等方面更加满意,理论知识考试成绩和病例分析也是优于对照组(P <0.05)。结论PBL联合CBL教学法应用于留学生泌尿外科临床见习教学中能够有效提高教学质量并受到留学生的认可。

PRC1高表达与前列腺癌生化复发的相关性研究

目的研究细胞质分裂调控蛋白1(PRC1)在前列腺癌中的表达情况及其与生化复发的相关性。方法采用实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测PRC1在前列腺癌与癌旁前列腺组织的表达水平,并利用Taylor基因芯片数据库对PRC1基因mRNA水平进行验证。Kaplan-Meier法分析前列腺癌患者总体生存率及生化复发时间与PRC1 mRNA表达水平之间的关系。Cox回归分析临床病理特征与生化复发的相关性。结果 12对前列腺癌及癌旁前列腺组织中,前列腺癌的PRC1 mRNA及蛋白表达均高于癌旁前列腺组织(P均<0.01)。Taylor基因芯片数据库分析显示,PRC1在前列腺癌组织中的表达水平高于非癌组织(P<0.001),且出现生化复发或转移、Gleason评分高、临床分期≥T3A期者的PRC1 mRNA表达水平高于无出现生化复化或转移、Gleason评分低、临床分期<T3A期者(P均<0.05);Kaplan-Meier分析显示,PRC1高表达组的无生化复发率明显低于PRC1低表达组(P=0.008);Cox回归分析显示,PRC1(P=0.001)、Gleason评分(P<0.001)、术前PSA水平(P=0.021)及病理分期(P=0.021)是前列腺癌生化复发的影响因素。结论 PRC1在前列腺癌中的高表达与生化复发呈正相关,PRC1表达水平有助于判断前列腺癌患者的预后。

microRNA-126靶向PIK3R2调控肝癌细胞SMMC-7721的增殖和凋亡

目的研究micro RNA-126(mi R-126)对肝癌细胞SMMC-7721迁移能力的影响以及对靶基因PIK3R2表达的影响。方法通过慢病毒转染肝癌细胞株SMMC-7721使其过表达mi R-126,利用CCK-8法检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡;采用实时定量PCR和蛋白印迹检测细胞PIK3R2表达水平的变化,并通过荧光素酶实验验证mi R-126与PIK3R2基因的直接调控关系。结果与对照组相比,转染mi R-126组的SMMC-7721细胞的增殖能力减弱,凋亡增加。过表达mi R-126后,SMMC-7721细胞PIK3R2的蛋白表达下调(P=0.0135)。荧光素酶报告基因实验显示,mi R-126能明显抑制PIK3R2-3’UTR的荧光素酶活性(P=0.0016)。结论过表达mi R-126可能通过靶向降低PIK3R2基因的蛋白表达,抑制肝癌细胞的迁移。

前列腺癌组织中TRIB1基因和蛋白异常表达与患者不良预后的相关性

目的研究Tribbles同源蛋白1(TRIB1)在良性前列腺增生和前列腺癌中的表达,并分析其表达水平与患者临床特征及预后的关系。方法在公共基因芯片数据库(GEO)中下载前列腺样本中的相关基因芯片数据,分析TRIB1在前列腺样本中mRNA的表达水平。收集临床手术切除或者穿刺活检的前列腺癌和前列腺增生组织,通过免疫组化检测前列腺癌、前列腺增生组织中TRIB1蛋白的表达。分析TRIB1蛋白和基因的表达水平与患者临床特征及预后的关系。结果前列腺癌患者组织中TRIB1蛋白表达显著上调(P<0.01),TRIB1蛋白表达上调与前列腺癌Gleason评分(P<0.01)、病理分期(P=0.02)相关,基因芯片数据提示TRIB1基因表达上调与前列腺癌Gleason评分(P=0.02)、病理分期(P=0.01)、无生化复发生存率(BCR-free survival)(P=0.047)相关。结论 TRIB1在前列腺癌组织中表达上调,前列腺组织中检测TRIB1可能有助于判断前列腺癌分化程度并评估预后。

微小RNA-205通过靶向调控ZEB1抑制前列腺癌细胞迁移能力的研究

目的观察微小RNA-205(miR-205)对前列腺癌细胞PC3迁移能力以及靶基因E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响。方法采用实时定量PCR检测各前列腺癌细胞株(PC3、LNCa P、DU145)和良性前列腺上皮细胞(Pr EC)中miR-205的mRNA相对表达量,通过miR-205模拟物(miR-205 mimics)、miR-205抑制物(miR-205 inhibitor)和相应的空载体分别转染前列腺癌细胞株PC3后,将PC3细胞分为过表达miR-205组、mimics对照组、抑制miR-205组和inhibitor对照组4组,利用细胞划痕试验和Transwell细胞侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭能力。采用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞ZEB1的蛋白表达水平,并通过荧光素酶报告试验验证miR-205与ZEB1基因的直接调控关系。利用蛋白免疫印迹法检测过表达miR-205组、mimics对照组细胞的上皮钙黏素和波形蛋白表达水平。结果前列腺癌细胞DU145、LNCa P和PC3的miR-205 mRNA相对表达量均低于良性前列腺上皮细胞Pr EC(P均<0.01);PC3的miR-205 mRNA相对表达量最低,选为进一步试验的细胞株。24 h后,划痕试验显示过表达miR-205组的迁移细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组的迁移细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01);Transwell细胞侵袭试验显示,过表达miR-205组侵袭细胞数少于mimics对照组,抑制miR-205组侵袭细胞数多于inhibitor对照组(P均<0.01)。过表达miR-205组PC3细胞的ZEB1蛋白表达水平低于mimics对照组(P<0.01)。过表达miR-205组中,携带野生型3'-非翻译区序列载体PC3细胞的荧光素酶活性值低于携带突变型3'-非翻译区序列载体PC3细胞(P<0.01)。与mimics对照组相比,过表达miR-205组的上皮钙黏素蛋白表达水平降低、波形蛋白表达水平升高(P均<0.05)。结论 miR-205可能通过靶向降低ZEB1基因的蛋白表达,抑制前列腺癌细胞的迁移能力。

掺杂天然胶乳的鉴别及分析方法研究

研究影响天然胶乳干胶含量测量值的白糖、食盐、淀粉、尿素、氯化铵、硫酸铵、碳酸氢钠、碳酸钙、滑石粉、高岭土和石灰粉11种可能的天然胶乳掺杂物检测,重点讨论掺入高岭土、碳酸钙、滑石粉和淀粉的天然胶乳的定性及定量分析方法,旨在建立一套简单、快速、准确、可行的掺杂天然胶乳检测方法,以利于收胶站及橡胶加工企业评价天然胶乳质量。

ARRDC3预测人类前列腺癌进展和预后的相关性研究

目的确定含抑制结构域的蛋白3(ARRDC3)与微小核糖核酸-30d(miR-30d)在前列腺癌中的表达及ARRDC3的高低表达与前列腺癌进展和预后的相关性,探讨ARRDC3抑制前列腺癌进展的相关机制。方法采用实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测转染后的抑制表达和过表达miR-30d细胞株中ARRDC3 mRNA和蛋白表达情况,分析Taylor数据库中ARRDC3表达水平与前列腺癌患者的临床特征和预后的关系,构建ARRDC3抑制表达和过表达的DU145和LNCaP细胞株,分别采用细胞增殖实验、划痕实验、侵袭实验分析ARRDC3对前列腺癌细胞功能的影响。结果实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法分析结果显示,ARRDC3 mRNA及蛋白表达水平在抑制表达miR-30d的LNCaP细胞株中均上调(P均<0.001),在过表达miR-30d的LNCaP细胞株中均下调(P均<0.001)。Taylor数据库分析显示,生化复发、术后淋巴结转移和高Gleason评分值者的ARRDC3 mRNA表达水平较低(P均<0.05)。Log-rank检验显示,术后无生化复发者ARRDC3 mRNA表达水平高(P<0.05)。细胞增殖实验结果显示,LNCaP与DU145细胞中,与无过表达ARRDC3(NC组)比较,过表达ARRDC3(ARRDC3组)的OD_(450)均较低(P均<0.001);与无抑制ARRDC3表达(KO-NC组)比较,抑制ARRDC3表达(KO-ARRDC3组)的OD_(450)均较高(P均<0.001)。LNCaP与DU145细胞划痕实验及侵袭实验结果均显示,与NC组比较,ARRDC3组的移行细胞数及穿膜细胞数较少;与KO-NC组比较,KO-ARRDC3组的移行细胞数及穿膜细胞数较多。结论 ARRDC3为前列腺癌的抑癌基因,并与前列腺癌淋巴结转移和术后生化复发有关,可作为前列腺癌进展和预后预测的标志物。

穿心莲内酯通过Notch信号通路抑制前列腺癌骨转移细胞体外生物学行为的研究

目的:研究穿心莲内酯(ANDRO)对前列腺癌骨转移细胞株PC-3和C4-2B体外培养生物学行为的影响及其调控机制.方法:用ANDRO处理人源性的前列腺癌骨转移细胞株PC-3、C4-2B,MTS检测ANDRO对PC-3、C4-2B细胞的半抑制浓度IC 50,将实验分为IC 50药物浓度干预的ANDRO组和对照组,通过MTS检测不同时间下ANDRO对细胞增殖的影响;流式细胞术检测ANDRO对细胞周期的影响;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;纤维连接蛋白检测细胞黏附能力;Western blot检测Notch信号通路Notch-1、NICD、Hes-1,基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及ICAM-1的蛋白表达情况.结果:ANDRO作用48 h的IC 50均约15μmol/L,且随浓度和时间的增加ANDRO对PC-3与C4-2B细胞增殖的抑制作用越显著(P<0.01).ANDRO组PC-3与C4-2B细胞周期分布G1期比例较对照组均呈升高,S期比例相应降低(P<0.05).ANDRO组PC-3与C4-2B细胞相较对照组的迁移、侵袭和黏附能力均明显下降(P<0.01).Western blot检测结果显示,ANDRO能显著抑制PC-3与C4-2B细胞Notch信号通路相关因子Noth-1、Hes-1和NICD的表达,同时也降低肿瘤转移相关蛋白MMP2、MMP9及ICAM-1的表达(P<0.01).结论:ANDRO可以抑制前列腺癌骨转移细胞株体外增殖、迁移、侵袭、黏附的能力,并影响其细胞周期分布,其作用机制可能与ANDRO抑制Notch信号通路蛋白及肿瘤转移相关蛋白表达有关.

桦木酸在缺氧条件下对PC⁃3细胞干性、侵袭、迁移、黏附及HIF⁃1α表达的影响

目的探讨桦木酸(betulinic acid,BA)在缺氧条件下对人前列腺癌骨转移PC⁃3细胞干性、侵袭、迁移、黏附及缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia⁃inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)表达的影响。方法采用CCK⁃8检测BA对前列腺癌骨转移细胞株PC⁃3细胞活力半数抑制浓度(IC_(50)),再分为IC_(50)药物浓度BA组和对照组,检测BA对PC⁃3细胞增殖的影响;在常氧、缺氧及缺氧+IC_(50)(10μmol/L)BA条件下处理PC⁃3细胞,采用Transwell实验检测BA对细胞侵袭、迁移能力的影响;采用细胞黏附实验检测BA对细胞黏附能力的影响;采用肿瘤成球实验检测BA对细胞自我更新能力影响;采用PCR实验及Western blot实验检测BA对细胞表达HIF⁃1α、CD31、CD44的影响;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BA对细胞VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α因子表达的影响。结果BA呈浓度和时间依赖性抑制PC⁃3细胞增殖,其IC_(50)为10μmol/L。PC⁃3细胞在缺氧环境中的干性、侵袭、迁移、黏附能力增加,而加入BA后PC⁃3细胞的干性、侵袭、迁移、黏附能力下降。Western blot实验结果显示,BA能抑制PC⁃3细胞中HIF⁃1α蛋白表达,同时抑制CD31、CD44蛋白表达(P<0.01);PCR实验结果显示,BA下调HIF⁃1α的mRNA表达,同时也下调CD31、CD44的mRNA表达(P<0.01)。ELISA试验结果显示BA可抑制VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α因子的表达(P<0.01)。结论BA能抑制缺氧条件下PC⁃3细胞的干性、侵袭、迁移及黏附能力,其机制可能与BA下调HIF⁃1α、CD31、CD44表达,及抑制VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α等因子表达有关。

微小RNA-126对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭及转移的影响

目的 观察转染微小RNA（miRNA,miR）-126对肝癌细胞生物学行为的影响.方法 通过构建稳定miR-126高表达肝癌细胞株Hep-G2,应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、划痕实验、流式细胞术和Transwell小室检测细胞增殖、迁移、凋亡及细胞周期分布和侵袭能力,建立裸鼠皮下成瘤模型并观察miR-126对肿瘤生长的影响.结果 Hep-G2在miR-126表达升高后,48 h后细胞吸光度值、迁移和侵袭能力（0.783 8±0.050 5、158.1±32.9、45.219±3.687）与空载体对照组（1.121 1 ±0.0637、258.2±51.5、80.387±5.641）比较相对减弱（P＜0.05）,凋亡率（18.621±0.852）％比对照组（5.325 ±0.239）％升高（P＜0.05）,细胞周期出现S期阻滞.裸鼠皮下成瘤模型中,实验组裸鼠瘤体质量及体积明显减小（P＜0.05）.结论 上调miR-126表达可明显抑制肝癌细胞株Hep-G2的增殖、迁移、侵袭能力,促进其凋亡,并且抑制裸鼠皮下成瘤模型肿瘤的生长.

微小RNA-224靶向Tribbles同源蛋白1调控前列腺癌细胞DU145的迁移和侵袭

目的观察微小RNA-224（miR-224）对前列腺癌细胞DUl45迁移和侵袭能力的影响以及对靶基因Tribbles同源蛋白1（TRIBl）表达的影响。方法通过慢病毒转染前列腺癌细胞株DU145使其过表达miR-224，利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力；采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和Westernblot检测细胞TRIBl表达水平的变化，并通过荧光素酶实验验证miR-224与TRIBl基因的直接调控关系。设计拯救实验并重新利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭。结果划痕实验24h后DUl45—224和DU145-vector组细胞的迁移细胞数目分别为（103．2±20．6）、（189．8±34．7）个，miR-224过表达组细胞迁移能力明显下降（P〈0．01）；Transwell细胞侵袭实验显示，DUl45-224组和DU145-vector组细胞分别为（140．8±13．1）、（283．4±15．4）个，组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。过表达miR-224后，DUl45细胞TRIBl的蛋白表达下调（P〈0．05）。荧光素酶报告实验结果显示实验组荧光素酶活性值为0．42±0．06，比对照组（0．97±0．09）显著降低（P〈0．01），提示miR-224能明显抑制TRIB1—3’端非编码区域（3’-UTR）的荧光素酶活性。拯救实验结果表明在miR-224过表达的DUl45细胞中进一步转入高表达TRIBl质粒后，迁移细胞数目为（203．2±31．2）个、侵袭细胞数目为（328．6±25．9）个，对比单纯miR-224过表达DUl45细胞[迁移细胞数目为（73．2-4-17．8）个；侵袭细胞数目为（101．2±13．1）个]，迁移和侵袭能力增强，组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论过表达miR-224可能通过靶向降低TRIBl基因的蛋白表达，抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力。

局限性低危前列腺癌的主动监测

前列腺癌（prostate cancer）是男性泌尿系统最常见的恶性肿瘤.世界范围内,前列腺癌发病率在男性所有恶性肿瘤中位居第二[1].局限性低危前列腺癌的治疗方法现在仍然存在很大的争议.特别是随着前列腺癌特异性抗原（PSA）筛查的普及,越来越多的前列腺癌在临床早期得到诊断,其中相当一部分前列腺癌体积小、对生命威胁小,拥有较低的疾病相关死亡风险,很可能将终身罹患前列腺癌却死于其他原因[2].全球范围内前列腺癌的发病率和生存率存在着广泛的差异,但有趣的是这种疾病的死亡率在各国各地之间的差异却相对小得多[3-4],在美国,尽管男性的前列腺癌患病率为17％,但是死于前列腺癌的却只有大概3％,这就表明了保守治疗对于大部分的早期低危前列腺癌患者来说更有价值[5-6].因此,如何安全而有效地分辨出哪些前列腺癌患者即使不接受过度治疗也将不太可能因此死亡,避免过度治疗、提高患者生活质量,是目前国内外关注的热点.

溶质载体家族6成员9在前列腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨溶质载体家族6成员9(SLC6A9)表达与前列腺癌临床病理特征和预后生存的相关性。方法免疫组织化学检测基因芯片组织(TMA)80例标本的SLC6A9表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系;分析肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中498例原发性前列腺癌患者SLC6A9表达与其临床病理特征的相关性。运用生存曲线研究TCGA和Taylor数据库中SLC6A9表达与前列腺癌无转移生化复发的关系,利用COX回归模型探讨SLC6A9能否作为影响前列腺癌预后的独立风险因子。结果TMA中SLC6A9的表达水平与前列腺癌患者的年龄、Gleason评分、临床T分期无相关(χ^(2)=0.231、0.000、0.739,P>0.05);SLC6A9在前列腺癌组织和非癌性组织的高表达率分别为90.00%(45/50)、66.67%(20/30),两者表达量差异有统计学意义(χ^(2)=6.701,P<0.05)。TCGA数据库中,SLC6A9的表达水平与前列腺癌患者年龄无相关(χ^(2)=1.658,P>0.05),与Gleason评分、临床T分期、远处转移及生化复发明显相关(χ^(2)=10.730、6.620、5.840、6.941,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示SLC6A9低表达组的前列腺癌无转移生化复发时间明显高于高表达组,两者差异有统计学意义(P<0.01)。COX回归单因素和多因素分析结果显示,SLC6A9可作为影响前列腺癌生存预后的独立危险因素[风险比(HR)=2.089、1.735,P均<0.05]。结论SLC6A9在前列腺癌组织中高表达且提示预后差,并与患者不良临床病理特征明显相关,可作为影响生存预后的独立危险因素。