石菖蒲醇提液主要化学成分GC-MS分析

目的探讨石菖蒲乙醇提取液的主要化学成分。方法用GC-MS对4批次石菖蒲80%乙醇提取液及其浓缩液直接进样分析。结果石菖蒲第一、第二次醇提液及浓缩液中均含有挥发油的6个特征性成分,在醇提浓缩液中,还检出相对含量较大的4个水溶性成分,鉴定了其中2个:2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮(4H-Pyran-4-one,2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl)和5-羟甲基糠醛(2-Furancarboxalde-hyde,5-犤hydroxymethyl犦-)。结论石菖蒲乙醇提取液中除含有挥发油成分外,还含有较多的水溶性成分,其药理作用的物质基础可能与水溶性成分有关,其非挥发性成分尤其是醇提部分值得进一步研究与开发。

石菖蒲不同部位对戊四唑点燃大鼠皮质P-糖蛋白表达的影响

目的研究石菖蒲不同部位对戊四唑点燃癫痫模型大鼠皮质多药耐药基因(MDR)表达产物P-糖蛋白表达强度的影响。方法 SD大鼠80只,腹腔注射戊四唑(PTZ)溶液35mg/kg体质量,隔天1次,共14次。点燃成功的大鼠,分8组,每天灌胃1次,分别给予石菖蒲挥发油50mg/kg体质量、石菖蒲去油水提液高剂量28g/kg体质量、中剂量14g/kg体质量、低剂量7g/kg体质量、β-细辛醚100mg/kg体质量、α-细辛醚70mg/kg体质量,阳性对照组给予丙戊酸钠(VPA)126mg/kg体质量,模型组给予等体积生理盐水。另设正常组5只,正常喂养,不作任何处理。治疗36d后注射同剂量戊四唑点燃测试药效,取大脑皮质制成蜡块,免疫组织化学染色,200倍镜下观察神经元中多药耐药基因表达产物P-糖蛋白的表达强度。结果与正常组及阳性对照组(VPA)比较,石菖蒲去油水提液中、低剂量组大鼠皮质P-糖蛋白(P-gp)表达强度降低(P<0.05),β-细辛醚组大鼠皮质P-糖蛋白表达强度降低(P<0.01);与模型组比较,β-细辛醚组大鼠皮质P-gp表达强度降低(P<0.05);与α-细辛醚组、石菖蒲挥发油组、石菖蒲去挥发油水提液组高剂量组相比,β-细辛醚组P-gp表达强度降低(P<0.05)。结论β-细辛醚和石菖蒲去挥发油水提液中、低剂量组能降低戊四唑点燃大鼠皮质P-gp表达强度,以β-细辛醚作用最强。

不同产地九节菖蒲挥发油成分分析

九节菖蒲为毛茛科植物阿尔泰银莲花Anemonealtaica Fisch ex C. A. Mey之干燥根茎,又名小菖蒲、外菖蒲、京玄参、菊形双瓶梅等,由于石菖蒲药材中"一寸九节"之优质品也称为"九节菖蒲",两者存在同名异物情况,在北方一些地方存在混用现象[1].

舒金克喘胶囊制备过程中麻黄、厚朴有效成分追踪

目的:考察舒金克喘胶囊制备过程中麻黄、厚朴主要有效成分的转移率和保留率。方法:用HPLC法追踪药材、醇提液、25%浓缩液、50%浓缩液、100%浓缩液、成品中盐酸麻黄碱、和厚朴酚、厚朴酚的去向。结果:成品中盐酸麻黄碱、和厚朴酚、厚朴酚的转移率分别为56.32%、14.43%、14.56%。结论:浓缩、干燥工艺应该在减压、低温下进行。

石菖蒲挥发油、β-细辛醚对高脂血症大鼠血管舒缩与抗血小板聚集的作用

目的研究石菖蒲挥发油、β-细辛醚对高脂血症模型动物血管舒缩与抗血小板聚集的作用。方法大鼠喂养高脂饲料造成高脂血症模型,采用流式细胞术检测血液中 CD_(62p)、CD_(63)表达率,并用放免法测定脑组织中内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)的舍量。结果石菖蒲挥发油能降低脑ET 的含量而升高脑 CGRP 的浓度;β-细辛醚能降低血 CD_(62p)表达率、降低脑 ET、NPY 的含量。结论石菖蒲挥发油、β-细辛醚有舒张血管、抗血小板聚集活性的作用。

GC-MS建立石菖蒲挥发油特征指纹图谱方法学研究

目的 :建立石菖蒲挥发油GC MS分析色谱条件 ,初步拟定挥发油指纹特征图谱指标成分群。方法 :采用GC MS法分析 10批石菖蒲挥发油化学成分。结果 :在进样口温度 2 5 0℃ ,接口温度 2 30℃ ,载气流速 1.3mL·min-1,柱压 80kPa ,电离电压 1.4kV ,升温速率 3℃·min-1的色谱条件下 ,石菖蒲挥发油主成分可达到较好分离 ;挥发油主要含有甲基丁香酚 (2 .13% )、顺式甲基异丁香酚 (4 .4 8% )、反式甲基异丁香酚 (0 .82 % )、γ 细辛醚 (4 .5 1% )、β 细辛醚 (6 6 .15 % )、α 细辛醚 (6 .35 % )等 6个特征成分 ;以此 6个主要共有峰为评价指标 ,GC MS色谱条件的精密度、稳定性、重现性良好。结论 :方法准确可靠 ,重复性好 。

石菖蒲提取液对脑缺血-再灌注诱导的神经细胞凋亡的保护作用

目的 观察石菖蒲提取液对脑缺血 -再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的防治作用 ,探讨其神经保护作用的机制。方法 将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、石菖蒲挥发油治疗组、石菖蒲去油水煎液治疗组及醒脑静注射液对照组 ,上述药分别灌胃给药 7d后建立双侧颈总动脉短时闭塞模型 ,采用原位细胞凋亡TUNEL染色和图像分析观察鼠大脑皮质的细胞凋亡情况。结果 各治疗组较生理盐水对照组凋亡神经细胞积分光密度减少 ,且以石菖蒲挥发油治疗组最为显著。结论 石菖蒲提取液可显著抑制由缺血 -再灌注诱导的脑神经细胞凋亡 ,从而起到一定程度的神经原保护作用 ,且以挥发油的疗效最为显著。

石菖蒲开窍醒神物质基础的药学系列研究

目的 探讨石菖蒲开窍醒神作用的物质基础。方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法建立石菖蒲挥 发油特征指纹图谱;采用GC-MS及HPLC法比较石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲成分的异同;采用GC-MS法分析水煎液 与醇提液主要化学成分;采用HPLC法测定β-细辛醚、α-细辛醚含量;采用GC-MS法分析挥发油入脑成分。结果 以 甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细辛醚6个特征成分为指标, 建立了挥发油的GC-MS指纹图谱辨识技术;石菖蒲、水菖蒲及九节菖蒲挥发油以及β-细辛醚、α-细辛醚的含量 存在明显差异,不应混用;在GC-MS可检出成分中,石菖蒲水煎剂、醇提液除含挥发油外,尚含有2,3-二氢-3,5二 羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮(4H-Pyran-4-one,2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-)与5-羟甲基糠醛(2- Furancarboxaldehyde,5-[hydroxymethyl]-)等成分;精制β-细辛醚纯度达99％以上;6批次药材中β-细辛 醚含量为1．09％-2．87％,α-细辛醚含量为0．011％-0．172％;顺式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细 辛醚4个挥发油成分能进入脑组织。结论 石菖蒲挥发油及β-细辛醚可能是药效活性的最主要有效部位(成分)。

黄连素通过S1P2-MAPK信号通路抗糖尿病肾纤维化作用机制研究

目的观察黄连素干预后四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肾组织、高糖培养的系膜细胞中S1P2受体表达变化情况,以及对高糖条件下S1P2受体介导的纤维连接蛋白(FN)生成和MAPK信号通路的影响。方法腹腔注射四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠肾损伤模型。随机分成正常、糖尿病、黄连素低剂量和高剂量组。12周实验结束时比较各组小鼠血糖、肾脏肥大指数(肾重/体重)、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白等肾功能相关指标的变化。应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测肾组织中S1P2受体mRNA和蛋白水平的表达变化。Western blot检测黄连素干预后高糖培养的系膜细胞中S1P2受体、FN表达及MAPK磷酸化改变。结果黄连素有效抑制糖尿病小鼠血糖升高,明显降低血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白等肾功能相关指标,下调肾脏S1P2受体mR-NA和蛋白表达。体外研究中黄连素降低高糖培养的系膜细胞S1P2受体蛋白和FN蛋白表达,还不同程度抑制MAPK(ERK1/2、p38MAPK和JNK)磷酸化水平。结论减少S1P2受体表达,抑制S1P2-MAPK(主要是ERK1/2和p38MAPK)通路介导的FN表达增加是黄连素抗糖尿病肾纤维化可能的作用机制之一。

不同剂量石菖蒲对中枢神经系统影响的实验研究

目的研究不同剂量石菖蒲对中枢神经系统的影响。方法观察不同剂量的石菖蒲对小鼠睡眠时间、缺氧生存时间的影响,以及对脑缺血大鼠脑含水量、细胞凋亡、内皮素(ET)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)等指标的影响。结果与对照组比较,各种剂量的石菖蒲能缩短小鼠睡眠持续时间及延长小鼠缺氧的生存时间;高剂量石菖蒲能明显降低脑缺血大鼠脑含水量和MDA水平,抑制脑组织细胞凋亡,增加SOD含量及GSH-Px活性。结论高剂量的石菖蒲对中枢神经系统保护作用最强,中、低剂量次之。

石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 :观察石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡影响的有效部位。方法 :提取石菖蒲 (去油水提液、含油水提液、挥发油、β -细辛醚 ) ,灌胃给药 7d ,1次 /d ,观察大鼠脑皮质和海马神经细胞凋亡的情况。结果 :β -细辛醚有明显抑制大鼠脑皮质神经细胞凋亡的作用 ,石菖蒲组分 (含油水提液、挥发油、β -细辛醚 )也有减少大鼠海马神经细胞凋亡的作用。β -细辛醚能抑制大鼠脑皮质和海马神经细胞Bax基因表达。石菖蒲挥发油和 β -细辛醚能增强大鼠脑皮质神经细胞Bcl -X基因的表达。结论 :石菖蒲挥发油尤其是 β

石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用

[目的]探讨石菖蒲、冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用。[方法]在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤,测定空白对照组、模型对照组、石菖蒲挥发油组、冰片组、冰片+石菖蒲挥发油(低、中、高配比)组神经元细胞数、神经细胞支配面积。[结果]石菖蒲挥发油、冰片、冰片+挥发油(低、中、高配比)给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组。[结论]石菖蒲、冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用。

GC-MS建立醒神滴鼻液中间产物质量控制标准研究

目的 :建立醒神滴鼻液两个“中间产物”(麝香芳香水、石菖蒲挥发油 )的质量控制标准 ,以确保成品批次间主要成分含量及组成保持稳定 ;方法 :采用GC MS制定了麝香芳香水中麝香酮的含量限度 ,同时建立了石菖蒲挥发油的特征指纹图谱 ;结果 :麝香芳香水中麝香酮可控制在 0 .16 6～ 0 .2 0 2mg/mL之间 ,3批成品麝香酮含量差异RSD =4.49% ,不超过10 % ;以甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、榄香素、β 细辛醚、α 细辛醚 6个主要成分的出峰先后顺序及其相对含量为特征构成了石菖蒲挥发油的特征指纹图谱 ,以上特征在成品中可以重复。结论 :建立“中间产物”的质量控制标准可提高中药复方的质量水平 ,GC MS是有效手段之一。

石菖蒲对中枢神经系统兴奋性的有效部位研究

目的 :探讨石菖蒲影响中枢神经系统兴奋性的有效部位。方法 :通过小鼠阈下剂量戊巴比妥钠睡眠试验、士的宁惊厥模型试验、硫代氨基脲惊厥模型试验 ,观察石菖蒲系列提取部位对小鼠入睡时间、睡眠延续时间以及对 2种惊厥模型小鼠的影响。结果 :挥发油能明显缩短小鼠睡眠延续时间 ,延长 2种惊厥模型的惊厥潜伏期 ,降低士的宁惊厥模型的惊厥率及死亡率 ;β 细辛醚能延长两种惊厥模型的惊厥潜伏期 ;其他部位除水提液外均能延长士的宁惊厥模型的惊厥潜伏期 ,乙醚提取部位和正丁醇提取部位能降低士的宁惊厥模型的死亡率 ,增加硫代氨基脲惊厥模型的死亡率。结论 :石菖蒲影响中枢神经系统兴奋性的有效成分是挥发油。

石菖蒲醒脑开窍的有效部位筛选

目的 :对石菖蒲醒脑开窍的有效部位进行筛选。方法 :采用小鼠常压耐缺氧试验、小鼠正常血脑通透性试验 ,观察石菖蒲系列提取部位对缺氧小鼠生存时间和小鼠正常血脑通透性的影响。结果 :石菖蒲挥发油能明显延长小鼠的生存时间 ,有 4个部位能提高血脑通透性 ,其中以挥发油、β-细辛醚作用最好。结论

石菖蒲对缺血-再灌注脑损伤大鼠脑电图和脑水肿的影响

目的 观察石菖蒲提取液对缺血-再灌注损伤大鼠脑电图和脑水肿的影响。方法 制备药液后,取大鼠随机分为石菖蒲去油水提液组(A组)、石菖蒲含油水提液组(B组)、石菖蒲挥发油组(C组)及β-细辛醚组(D组)、醒脑静对照组(E组)、模型对照组(F组)。分别灌胃给药7d后用动脉夹闭法造成缺血-再灌注脑损伤模型。于造模前、造模中、成模后观察大鼠脑电图的变化和脑含水量。结果A、B、D组大鼠造模前脑电波幅增大;造模中,A、C组大鼠脑电活动受到抑制,而D组则呈脑电活动兴奋;成模后,A～D组大鼠脑电活动均受抑制,且脑水肿均有减轻。结论上述结果可能是石菖蒲醒脑开窍作用的病理生理学基础之一。

石菖蒲配伍冰片对缺血再灌注脑损伤大鼠内皮素的影响

目的 :探讨石菖蒲配伍冰片对大鼠缺血再灌注脑损伤内皮素的影响。方法 :大鼠灌胃给药 7d,造成脑缺血再灌注损伤模型 ,采用放射免疫法测定血浆和脑组织内皮素含量。结果 :石菖蒲配伍冰片高、中剂量组脑组织内皮素含量明显下降 ,并显量效关系。结论 :石菖蒲配伍冰片能够降低脑缺血再灌注大鼠脑组织中内皮素含量 。

石菖蒲去油水煎液的高效液相色谱分析

目的 :研究石菖蒲去油水煎液的组分。方法 :采用美国惠普 10 5 0型高效液相色谱仪及色谱工作站 ,Hypersil ODS2 5 μm,4 .6 mm× 15 0 mm色谱柱 ,以甲醇 -水 (用氨液调 p H=9.6 2 ) (5 5∶ 4 5 )为流动相 ,流速 1.0 ml/ min,检测波长 λ0～ 3 min=336 nm,λ3～ 2 0 min=2 6 0 nm,检测温度为室温 (2 8℃ ) ,对去油水煎液进行 HPLC图谱研究。结果 :在此条件下 ,分离出来的色谱峰最多 ,总共可分离出 10个色谱峰。结论 :石菖蒲去油水煎液中至少含有