阻断PD-L1和MEK对非小细胞肺癌多细胞球体模型的治疗作用

目的观察阻断细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)对非小细胞肺癌(NSCLC)多细胞球体(MTS)模型的治疗作用。方法收集2019年1月~2020年1月的NSCLC患者样本,培养MTS模型,使用流式细胞技术观察MEK抑制剂与抗PD-L1抗体对NSCLC的MTS模型生长抑制、细胞因子产生和免疫检查点基因表达的影响。结果共成功建立7个MTS模型,成功率63.6%。7个MTS模型MEK、MAPK和PD-L1均呈高表达水平。将7种MTS模型分为空白组、阿特珠单抗组、司美替尼组和阿特珠单抗+司美替尼联合应用组,阿特珠单抗组和司美替尼组产生中度抗增殖作用,细胞死亡中位数为30%和25%,联合应用组表现出高度抗增殖效果,细胞死亡中位数为45%。RT-PCR处理后,联合组IFN-γ、IL-12和IL-6的表达显著增加(P<0.05),PD-L1和CTLA-4表达显著减少(P<0.05),司美替尼和阿特珠单抗组PD-L1表达显著减少(P<0.05)。结论在NSCLC的MTS模型中,双重阻断PD-L1和MEK具有优于单一抑制的疗效。

粒状头样2和表皮生长因子受体蛋白在食管鳞癌中的表达及预后判断价值

目的探讨粒状头样2(grainyhead-like 2,GRHL2)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在食管鳞癌中的表达及对预后判断的意义。方法收集解放军总医院及解放军总医院海南分院根治性切除的食管鳞癌标本63例,应用免疫组化En Vision法检测癌及癌旁正常组织GRHL2和EGFR蛋白的表达。结果 GRHL2和EGFR在食管鳞癌中阳性表达明显高于癌旁正常组织(P均<0.05)。GRHL2高表达与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、分期显著相关(P均<0.05),EGFR高表达仅与分化程度和分期显著相关(P<0.05)。Spearman相关分析表明GRHL2与EGFR呈负相关(r=-0.359,P=0.004)。Kaplan-Meier生存曲线分析表明GRHL2低表达者的总体生存时间为(32.902±1.017)个月,明显短于高表达者的(54.015±2.208)个月(P=0.000)。GRHL2低表达者的无疾病进展时间为(18.447±1.101)个月,明显短于高表达者的(38.976±1.747)个月(P=0.000)。相反,EGFR高表达者的OS为(36.522±1.931)个月,明显短于低表达者的(48.168±3.331)个月(P<0.05),EGFR高表达者的DFS为(22.190±1.564)个月,明显短于低表达者的(31.810±2.487)个月(P<0.05)。COX回归分析显示GRHL2、淋巴结转移和肿瘤分期是影响食管鳞癌患者术后预后的独立危险因素。结论 GRHL2和EGFR在组织中异常表达可能参与食管鳞癌的发生发展,联合检测GRHL2和EGFR有助于判断食管鳞癌患者的预后。

开胸或胸腔镜亚肺叶切除术治疗Ⅰ期非小细胞肺癌疗效比较

目的比较胸腔镜和开胸亚肺叶切除术治疗Ⅰ期非小细胞肺癌的临床疗效。方法回顾性分析2013年1月至2015年6月在解放军总医院海南分院胸外科行手术治疗的210例Ⅰ期非小细胞肺癌患者的临床资料,其中105例接受开胸亚肺叶切除术(开胸组),105例接受胸腔镜亚肺叶切除术(胸腔镜组)。随访至术后18个月,评估所有患者的死亡、复发和并发症情况。结果两组患者年龄、性别、肺癌病理分型、分期、直径和部位比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胸腔镜组手术时间[(137±12)min vs(149±9)min]、住院时间[(11±3)d vs(15±2)d]、失血量[(186±22)m L vs(212±12)m L]明显短于或少于开胸组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后随访发现,胸腔镜组全因死亡人数(9例)少于开胸组(19例),胸腔镜组肺癌致死例数(6例)少于开胸组(15例),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组复发总人数、局部复发人数、远处复发人数、心脏、肺部和其他各种并发症差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胸腔镜亚肺叶切除术缩短了手术时间和住院时间,减少了术中出血,而且减少了全因死亡例数和肺癌致死例数。

肺纯磨玻璃结节的高分辨率CT表现与临床病理学及基因特征

目的探讨肺纯磨玻璃结节的高分辨率CT表现与临床病理学及基因特征。方法回顾性纳入2014年4月~2019年4月在解放军总医院海南医院胸外科行手术切除的86例肺纯磨玻璃结节(pGGOs)患者,其中男性30例,女性56例,年龄21~78岁。分析其围手术期资料,根据术后5年生存率的不同将浸润性腺癌(IA)作为IA组,将微浸润性腺癌、原位腺癌及不典型腺瘤样增生设为对照组。其中IA组患者41例,对照组45例(微浸润性腺癌患者25例,原位腺癌患者14例,不典型腺瘤样增生患者6例)。比较IA组和对照组的高分辨率CT影像特点,组织病理学特征及基因突变情况。结果两组患者在一般资料方面差异无统计学意义(P>0.05),在手术方式上的差异有统计学意义(P=0.001),IA组患者更多接受肺叶切除术,对照组患者更多行亚肺叶切除术。两组患者在pGGOs的直径、体积及质量差异有统计学意义(P<0.001),在平均CT值和转化密度上差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析,以10.8 mm为临界值鉴别肺IA组和对照组,敏感度为58.5%,特异度为84.4%,曲线下面积(AUC)为0.753。体积的临界值为870 mm3,AUC为0.773,诊断敏感度52.5%,特异性95.2%。质量的临界值为306.9 mg,AUC为0.769,诊断敏感度53.7%,特异性93.3%。反映边缘特征方面,在分叶和毛刺上有统计学差异,而在pGGOs的形状、胸膜牵拉征和血管集束征等方面差异并无统计学意义(P>0.05)。基因突变状态方面,对照组8例检测患者中有2例EGFR基因突变,IA组中20例检测患者中有9例EGFR突变,两组基因突变差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺纯磨玻璃结节的病理表现多样,结合高分辨率CT影像特征及图像分析有助于对其定性诊断并指导后续随访策略及制定手术方案。对于直径大于10.8 mm、体积大于870 mm3及质量大于306.9 mg的纯磨玻璃结节,伴有分叶征、毛刺征等恶性影像学特征,应积极微创手术,手术方式根据影像学及患者意愿,主要以亚肺叶切除联合淋巴结活检术,可获得令人满意的预后效果。

Ⅰ期非小细胞肺癌两种切除术式效果比较

目的比较胸腔镜亚肺叶切除术与肺叶切除术治疗Ⅰ期非小细胞肺癌的效果。方法入选Ⅰ期非小细胞肺癌患者210例,随机分为肺叶切除术组和亚肺叶切除术组,每组105例。随访至术后18个月。比较两组的患者特征、肿瘤特点、手术相关指标及预后。结果两组之间,患者年龄、性别、肺癌病理分型、分期、直径和部位均无统计学差异。亚肺叶切除术组住院时间明显短于肺叶切除术组,且出血量也明显少于肺叶切除术组(P<0.05)。两组之间,全因死亡率、肺癌死亡率、复发率、局部复发率、远处复发率、心脏并发症等方面比较,均没有统计学差异。亚肺叶切除术组肺部并发症发生率明显低于肺叶切除术组(P<0.05)。结论相对于肺叶切除术,亚肺叶切除术缩短了住院时间,减少了术中出血,减少了肺部并发症。

硬化剂定位联合单操作孔胸腔镜切除肺部微小结节的临床应用价值

目的探讨CT引导下经皮穿刺肺组织注射硬化剂定位联合单操作孔胸腔镜切除肺部微小结节的可行性与安全性。方法回顾性总结我院2016年6月-2017年11月收治的16例肺部微小磨玻璃密度结节患者(含20个病灶),术日先在局麻下行CT引导下经皮穿刺肺组织注射硬化剂于肺部微小结节旁定位,然后在全麻下行单操作孔胸腔镜病灶切除,根据快速病理检查结果行局部切除、解剖性肺段切除或肺叶切除术。评估定位的准确性、手术切除方式及并发症等。结果 CT显示20个肺部微小磨玻璃密度结节均位于胸膜下,胸膜无改变,结节平均直径(8.44±6.55)mm,病灶边缘距胸膜距离(8.19±2.72)mm。19个结节经CT引导硬化剂注射定位后,在术中可触及,定位准确率95%。因注射出血致硬化剂移位、定位失败1例。穿刺定位平均时间(18.55±8.33)min,手术切除病灶平均时间(15.31±4.35)min。手术方式包括楔形切除13例、肺段切除4例和肺叶切除3例,术后均无并发症。术后病理为浸润性腺癌4例,微浸润性腺癌5例,原位癌3例,不典型增生5例,纤维增生炎症3例。结论 CT引导下经皮穿刺肺组织注射硬化剂注射定位联合单操作孔胸腔镜切除肺部微小结节是一种安全、可行的方法。

miR-339-5p通过抑制NUDT5增强肺癌A549细胞的放射敏感性

目的:探讨miR-339-5p通过调控Nudix结构水解酶5(Nudix hydrolase 5,NUDT5)的表达对肺癌A549细胞放射敏感性的影响。方法:体外低浓度梯度递增结合大剂量间断冲击方法诱导产生耐X射线的肺癌A549细胞株(RA549),qPCR检测miR-339-5p在人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)、肺癌细胞系(A549、L78、H1299、H460和RA549细胞)中的表达水平。根据对RA549细胞的处理,实验分为NC组、5 Gy组(5 Gy X射线处理RA549细胞)、5 Gy+miR-339-5p mimic组、5 Gy+si-NUDT5组和5 Gy+si-NUDT5+miR-339-5p inbibitor组,CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染流式术和WB分别检测各组细胞增殖、凋亡以及NUDT5、γ-H2AX和H2AX蛋白表达的变化,双荧光素酶报告基因系统验证miR-339-5p和NUDT5的靶向关系。结果:miR-339-5p在各肺癌细胞系中表达显著低于BEAS-2B细胞(均P<0.05),其中RA549细胞表达水平最低。验证显示NUDT5是miR-339-5p的靶基因。与NC组相比,5 Gy组RA549细胞增殖活力和NUDT5表达显著降低(均P<0.01),凋亡率显著升高(P<0.01);与5 Gy组相比,5 Gy+miR-339-5p mimic组RA549细胞的增殖活力显著降低(P<0.05)、凋亡率([12.97±1.48)%vs(5.21±0.62)%,P<0.01]和γ-H2AX的表达水平(P<0.05)显著升高,5 Gy+si-NUDT5组RA549细胞中NUDT5的表达水平(P<0.01)和细胞增殖活力(P<0.01)均显著降低,凋亡率([11.21±1.06)%vs(5.54±0.44)%,P<0.01]和γ-H2AX表达水平(P<0.01)均显著升高,而5 Gy+siNUDT5+miR-339-5p inhibitor组细胞中上述指标均回复至5 Gy组水平。结论:过表达miR-339-5p通过靶向下调NUDT5表达肺癌A549细胞的放射敏感性。

肺小结节胸腔镜手术术前定位方法研究进展

肺癌是目前发病率与死亡率最高的恶性肿瘤。2018年美国预计有23万新发肺癌患者,8. 4万人死于肺癌[1],我国肺癌发病率呈现逐年上升趋势,年平均增长达1. 63%[2],增长速度居各类恶性肿瘤之首。随着CT技术发展和健康查体的普及,肺小结节在CT上被发现日益增多,其中有部分小结节不能排除恶性肿瘤可能,需行穿刺确诊或治疗[3]。

磨玻璃结节样肺腺癌的临床及遗传学特征和手术治疗效果研究

目的分析总结表现为肺磨玻璃结节(ground-glass opacities,GGOs)的肺腺癌患者的临床特征、手术治疗效果、基因突变结果及预后情况。方法回顾性纳入2014年1月-2019年1月在解放军总医院海南医院胸外科行手术治疗的肺GGOs患者资料,分析其手术治疗效果、基因突变结果和预后情况。结果共纳入165例GGOs患者,其中男性65例,女性100例,29例(17.6%)患者有吸烟史,均为男性,结节直径平均(13.63±7.16)mm,纯磨玻璃结节56例,部分实性磨玻璃结节109例。102例行电视胸腔镜肺叶切除术,单纯行肺段切除术18例,单纯行肺楔形切除术45例。清扫淋巴结站数平均(4.45±1.50)站,清扫淋巴结数目平均(11.32±7.97)个,其中15例未做淋巴结活检。术后患者均正常出院,无死亡病例,8例(4.8%)出现术后并发症,经积极处理后痊愈。术后病理提示非典型腺瘤样增生(atypical adenoma-like hyperplasia,AAH)7例(4.2%),原位腺癌(adenocarcinoma in situ,AIS)19例(11.5%),微浸润性腺癌(minimally invasive adenocarcinoma,MIA)32例(19.4%),浸润性腺癌(invasive adenocarcinoma,IPA)107例(64.8%)。侵及脏层胸膜31例,150例淋巴结清扫患者均无淋巴结转移。在70例基因检测患者中,有43例EGFR突变,KRAS突变4例。随访时间平均为(20.96±17.41)个月,107例IPA患者无随访资料,32例MIA、19例AIS和7例AAH随访均无局部复发及远处转移情况。结论表现为GGOs的早期肺腺癌,通过肺叶切除或亚肺叶切除手术可获得良好的治疗效果,无淋巴结转移,可获得满意的远期预后。部分患者存在EGFR等基因突变,可为后期复发及转移提供靶向治疗方案。

肺原位腺癌和微浸润性腺癌的影像学表现与临床病理学、分子基因特征及预后

目的总结分析肺原位腺癌和微浸润性腺癌的影像学表现与临床病理学、分子基因特征及预后。方法回顾性纳入2014年1月~2019年3月在解放军总医院海南医院胸外科行手术切除后病理证实为肺原位腺癌(AIS)和微浸润性腺癌(MIA)患者,分析其围手术期资料,区分AIS和MIA的CT影像特点,组织病理学特征,基因突变结果及预后情况。结果共纳入73例患者,其中AIS患者25例,MIA患者48例,MIA组患者年龄小于AIS组(P=0.016),AIS组中有46.4%的纯磨玻璃结节(pGGOs),MIA组中有44.4%pGGOs,并在多发GGOs方面显著多于AIS组(P=0.049)。在反映边缘特征的CT影像学方面,AIS组中患者更少出现毛刺现象(P=0.041),其他影像特征未见明显差异。因AIS组患者行基因检测较少,在表皮生长因子受体(EGFR)基因突变方面两组未见明确差异,Ki-67指数在2.8%的截断点亦无统计学差异,但MIA组有更多的患者Ki-67指数>2.8%。MIA组随访时间明显短于AIS组,但均未出现复发或死亡病例。结论AIS和MIA患者在手术安全性及随访预后方面都有满意的结果,但在CT影像特点、基因突变状态及Ki-67指数上仍存在不同。

电视胸腔镜肺叶切除术细管辅助胸腔闭式引流疗效分析

目的：研究电视胸腔镜（VATS）肺叶切除术后细管辅助粗管胸腔闭式引流置管方式的疗效。方法回顾性分析2014年1月至2014年9月在解放军总医院胸外科接受 VATS 肺叶切除术的89例非小细胞肺癌患者，实验组50例采用细引流管辅助粗引流管胸腔闭式引流术，对照组39例采用常规改良胸腔闭式引流管。观察统计两组患者手术时长、术中出血量、清扫淋巴结数目、下床时间、术后住院时间、术后并发症、术后引流天数、引流量、引流效果，术后疼痛采用视觉模拟评分法（ VAS）。结果实验组和对照组的手术时长[（2.58±0.57）h ：（2.57±0.50）h，t =0.127，P =0.681]、术中出血[（108.00±52.84）ml ：（114.10±107.18）ml，t =0.352，P =0.334]、淋巴结清扫数目[（14.20±5.95）枚：（11.21±4.71）枚，t =2.576，P =0.068]、引流管留置时长[（5.66±2.53）d ：（5.82±2.02）d，t =0.324，P =0.219]、总引流量[（1141.76±819.26）ml ：（1022.95±464.84）ml，t =0.889，P =0.367]及术后并发症发生率（8.00%：10.25%，χ2=1.750，P =0.726）差异均无统计学意义。两组术后下床活动时间[（11.28±8.78）h ：（13.97±7.83）h，t =4.027，P =0.045]、术后住院天数[（8.36±2.63）d ：（9.56±2.89）d，t =2.952，P =0.043]、引流效果（72.0%：46.2%，χ2=5.329，P =0.017）差异有统计学意义。两组患者术后24~72 h 静息及咳痰时 VAS 疼痛评分差异有统计学意义，分别为24 h[（2.78±1.13）：（3.74±1.68），t =3.226，P＜0.001]，48 h[（1.98±0.59）：（3.33±1.72），t =5.189，P ＜0.001]，72 h[（1.94±0.55）：（3.15±1.60），t =5.010，P ＜0.001]，咳嗽时[（3.64±1.23）：（5.33±1.95），t =5.005，P ＜0.001]。结论 VATS 肺叶切除术后细引流管辅助胸腔闭式引流更有效，能减少患者术后痛苦，缩短住院时间，且操作简单，安全性高，易于推广，具有较高的改良价值。

术前血浆D-二聚体水平及血小板计数与局部晚期食管鳞癌临床病理特征的关系

目的:探讨术前D-二聚体(D-dimer)和血小板(PLT)计数与局部晚期食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)临床病理特征的相关性及预后价值。方法:测定99例局部晚期ESCC患者(食管癌组)及30例健康体检者(对照组)血浆D-dimer和PLT水平并进行比较,并分析其与ESCC临床病理因素之间关系及预后价值。结果:食管癌组血浆D-dimer、PLT水平高于健康对照组(P<0.05)。食管癌组D-dimer与淋巴结转移、TNM分期有关,而PLT与ESCC临床病理特征无关。单因素分析提示D-dimer、淋巴结转移、TNM分期与无疾病进展时间(disease free survival,DFS)和总体生存时间(overall survival,OS)相关,而多因素分析仅提示D-dimer是局部晚期ESCC患者的独立危险预后因素。结论:D-dimer增高与淋巴结转移和TNM分期有关,D-dimer可作为评判局部晚期ESCC预后的独立指标,为ESCC个体化治疗提供参考价值。