川芎嗪对中波紫外线辐射后细胞光产物影响及其光保护作用机制的研究

目的观察中波紫外线(UVB)辐射后永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)中光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的产生和清除情况,观察川芎嗪对UVB辐射后细胞光产物的影响并探讨其保护作用机制。方法采用30mJ/cm2UVB照射培养的HaCaT细胞,加入川芎嗪干预处理,采用免疫组织化学法检测CPDs,以RT-PCR法和Western blotting法检测各受试组中p53和增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白的表达水平。结果UVB辐射后HaCaT细胞中CPDs生成,0.5h达高峰,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率较慢直至辐射24h。川芎嗪处理UVB辐射的细胞中CPDs少于单纯照射组(P<0.05)。川芎嗪可下调p53(34.9%)和PCNA(30.9%)的mRNA表达,还可下调p53(23.1%)和PCNA(24.9%)的蛋白表达。结论HaCaT细胞对UVB照射所致光产物CPDs的清除存在快速期及慢速期;川芎嗪可降低光产物CPDs水平。川芎嗪的光保护作用可能与其下调修复相关调控分子p53和PCNA基因及蛋白表达有关。

拉米夫定治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化的随机对照研究

目的 用随机对照临床试验研究拉米夫定对失代偿期乙型肝炎后肝硬化患者生存率、肝功能生化指标、并发症及乙肝病毒学的影响。方法 10 7例患者随机分为治疗组 (n =5 9)和对照组 (n =48)。治疗组服用拉米夫定每日 10 0毫克 ,对照组服用复方益肝灵每次四片 ,每日三次。结果 治疗组中位随访时间 96周 (17～ 161周 ) ,对照组为 93周 (12～ 160周 ) ,5 2周时治疗组HBVDNA转阴率 78 7% (37/ 47) ,伴血清白蛋白显著升高 ,胆红素和谷丙转氨酶下降 ,P <0 0 5。治疗组两年生存率为 75 70 % ,对照组40 48% ,P <0 0 5。原发性肝癌发生率分别为 8 5 %和 2 2 9% ,P <0 0 5。治疗组 5 2周后 11例 (2 9 7% )HBVDNA转阳性 ,肝功能下降。结论 拉米夫定能改善乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的肝功能 ,延长生存期 ,但长期疗效有限 。

UVB辐射后HaCaT细胞光产物的产生和清除及EGCG的干预作用

目的:环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)是细胞受紫外线损伤后产生的特征性光产物之一。本文观察UVB辐射后HaCaT细胞光产物CPDs的产生和清除没食子儿茶素没食子酸脂(epigallocatechingallate,EGCG)的干预作用。方法:以一定剂量UVB照射HaCaT细胞并用EGCG干预处理,采用免疫组织化学法在照光后不同时间点检测CPDs的产生和清除。结果:细胞损伤程度随UVB辐射剂量加大而增大。30mJ/cm2UVB辐射后HaCaT细胞开始产生CPDs,0.5h左右达到高峰。同时细胞也开始清除CPDs,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率逐渐降低,至24h基本清除CPDs。EGCG处理UVB辐射的细胞CPDs少于单纯照光组(P<0.05)。结论:细胞损伤程度随UVB辐射剂量增大而加重,UVB辐射后HaCaT细胞对CPDs的清除存在快速期和慢速期;EGCG可以降低UVB辐射所致的光产物水平。

中波紫外线照射对HaCaT细胞p53mRNA和p53蛋白表达的影响

目的:研究中波紫外线(UVB)照射对永生化角质形成细胞株-HaCaT细胞的p53mRNA和p53蛋白表达的影响。方法:以一定剂量UVB照射HaCaT细胞,分别用RT-PCR法和Western blot方法检测照射后不同时间点的p53mRNA和p53蛋白的表达水平;同时检测不同剂量UVB照射后同一特定时间点p53mRNA和p53蛋白的表达水平。结果:30mJ/cm2的UVB照射后HaCaT细胞的p53mRNA和p53蛋白表达逐渐增加,4h达到峰值,后逐渐恢复至照光后24h接近正常值;不同剂量UVB照射4h后,p53mRNA和p53蛋白表达随剂量增加而增加。结论:HaCaT细胞p53mRNA和p53蛋白表达与UVB照射存在一定的时间和剂量关系。

安体舒通对慢性胆总管结扎肝硬化犬门脉高压和门体分流的影响

目的研究安体舒通对慢性胆总管结扎肝硬化犬门脉压力和门体分流的作用。方法用门静脉插管直接测压和９９ｍＴｃ－ＭＩＢＩ心肝放射性摄取比值（Ｈ／Ｌ）来评价安体舒通的作用。安体舒通口服每日２０ｍｇ／ｋｇ，连续四周。结果四周后１６只犬中１３只犬完成了研究。门脉压力从２５８７２±０．５０９６ｋＰａ下降为２４２０６±０．４７０４ｋＰａ（ｐ＜０．０５），Ｈ／Ｌ值从０３３±０．０６下降为０３０±０．０８（ｐ＜０．０５）。伴血浆容量明显减少，肝血流量无明显变化。结论安体舒通能降低肝硬化犬的门脉压力和门体分流，是治疗门脉高压的的有效药物。

5-氨基酮戊酸光动力疗法联合电离子治疗尖锐湿疣的临床研究

目的:观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)联合电离子治疗尖锐湿疣患者的疗效和安全性。方法:治疗组:采用ALA-PDT联合电离子对34例尖锐湿疣患者进行治疗,每7～10天治疗1次,治疗2～4次后判断临床疗效;对照组:采用电离子对30例尖锐湿疣患者进行治疗。两组随访时间均为3个月。结果:治疗组34例患者中,8例经2次ALA-PDT联合电离子治疗、19例3次治疗、6例4次治疗获得完全缓解,完全缓解率为97.1%(33/34),复发4例,复发率11.8%(4/34);对照组30例患者,10例1次性祛除疣体,15例2次祛除疣体,5例3次祛除疣体,完全缓解率为100%(30/30),复发9例,复发率为30%(9/30),经统计学处理,两组间完全缓解率无统计学差异(P>0.05),复发率对照组明显高于治疗组(P<0.05)。结论:ALA-PDT联合电离子治疗尖锐湿疣,具有疗效好、安全性高、副作用小、复发率低等优势,可作为治疗尖锐湿疣较好的选择方法。

绿茶多酚对表皮HaCaT细胞光损伤的干预作用研究

目的:本文旨在观察没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)引起的表皮HaCaT细胞损伤,以及对细胞着色性干皮病蛋白A(XPA)和切除修复互补交叉蛋白1(ERCC1)蛋白表达的影响。方法:以30mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞,照光前后加入50g/mL EGCG进行干预,Western blot法检测细胞XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结果:UVB照射后细胞内XPA和ERCC1蛋白表达水平逐渐增高,在照光后4h达到峰值,后逐渐恢复至接近正常值;加入EGCG干预可明显降低XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结论:EGCG对紫外线光损伤的干预作用可能与调控细胞内XPA和ERCC1蛋白的表达有关。

中波紫外线照射对人原代角质形成细胞XPA和ERCC1蛋白表达的影响以及EGCG的干预作用

目的:研究中波紫外线(UVB)照射对人原代角质形成细胞(KC)的着色性干皮病A组蛋白(XPA)和切除修复互补交叉蛋白1(ERCC1)蛋白表达的影响以及没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的干预作用。方法:以一定剂量UVB照射人原代角质形成细胞,在UVB辐射前后加入EGCG干预处理细胞,用Westernblot方法检测照射后不同时间点的XPA和ERCC1蛋白的表达水平;同时检测不同剂量UVB照射后以及EGCG干预的同一时点XPA和ERCC1蛋白的表达水平。结果:30mJ/cm2的UVB照射后人原代角质形成细胞的XPA和ERCC1蛋白表达逐渐增加,4h达到峰值,后逐渐恢复至UVB照射后24h接近正常值;不同剂量UVB照射4h后,XPA和ERCC1蛋白表达随UVB剂量增大而增加。EGCG可下调UVB诱导的XPA和ERCC1蛋白表达。结论:人原代KC中XPA和ERCC1蛋白表达与UVB辐射存在一定的时间和剂量关系,EGCG可在一定程度上下调上述蛋白表达。

肝硬化患者食管动力与肝功能障碍的关系研究

目的 研究肝功能减退对食管动力的影响。方法 对无腹水或经治疗腹水消退后的肝硬化患者 6 3例 ,进行Child -pugh分级 ,和健康对照组 2 2例分别进行食管测压及 2 4小时pH监测。结果 肝硬化组下食管括约肌压力 (LESP)、远端食管蠕动波幅 (PA)、蠕动时间 (PD)和蠕动传导速度 (PV)与对照组比较显著异常 (P <0 0 5 )。LESP在ChildC级较ChildB级显著下降 (P <0 0 5 ) ,与Child -Pugh分数呈负相关 (r =-0 5 2 3 ,P <0 0 1) ,伴各胃食管酸反流指标显著异常和胃食管反流病 (GERD)发生率升高 ,P均小于 0 0 1。食管静脉曲张程度也显著影响PA、PD和PV(P <0 0 5 ) ,而LESP无明显下降。结论 肝硬化患者食管动力异常和胃食管酸反流的原因除食管静脉曲张外 ,肝功能减退使其加重和LESP下降。

窄谱UVB和宽谱UVB的光疗比较

波长280—320nm的紫外线辐射光疗对于许多疾病是安全有效的治疗。除了标准的宽谱中波紫外线外，用发射311nm几乎单色紫外线的荧光灯进行的窄谱光疗已经成为一些疾病的重要治疗措施，如银屑病、特应性皮炎和白癜风等。除了这些适应证外，窄谱中波紫外线光疗报道有效的疾病数量正在增多。

紫外线反应性黑素瘤实验动物模型的研究进展

皮肤黑素瘤的发生是由遗传因素和日光辐射共同作用引起,黑素瘤实验动物模型的发展对阐明黑素瘤发病的具体机制具有重要意义。杂交剑尾鱼是最早的黑素瘤动物模型,南美负鼠、基因工程小鼠模型和人皮肤异种生物移植模型的相继应用对黑素瘤的预防和治疗提供帮助。

维生素E亚微粒乳液对紫外线损伤角质形成细胞保护作用的研究

目的:研究维生素E亚微粒乳液(VitESME)对中波紫外线损伤永生化角质形成细胞HaCaT株的光保护作用。方法:高压均质法加微乳法制备VitESME,稀释后加入培养基中孵育HaCaT株,高效液相色谱法测定不同时段培养液中VitE含量;中波紫外线(UVB)照射HaCaT株,孵育24h后四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性。结果:培养液中VitE含量在孵育8h后即明显下降,24h后已减少90%以上。VitESME孵育24h后细胞增殖较为明显,与对照组相比活性增加了44.22%。与非加药照光组相比,加药照光组孵育24h后细胞增殖活性在30mJ/cm2,下降17.77%,在90mJ/cm2下降40.42%。结论:VitESME对细胞培养体系无毒性作用,且具有优良的释放性能和通透性。VitESME对UVB照射的保护作用呈时间递增性;预先加入VitESME可以部分减少紫外线介导的损伤。

维生素E亚微粒乳液的体外透皮实验研究

目的:探讨维生素E亚微粒乳液的体外透皮情况。方法:采用高压均质法制备维生素E亚微粒乳液,利用高效液相色谱法测定其浓度。利用离体兔皮和自制简易透皮装置对维生素E亚微粒乳液进行体外透皮实验。在不同时间收集接受液样本,用紫外分光光度法测定其吸光度,根据维生素E标准曲线计算接受液的浓度,按累积透过量公式计算其累积透过量。将累积透过量对时间进行线性拟合,得回归方程,方程的斜率即为渗透系数。结果:维生素E不同时间点的接受液吸光度逐渐增加,从0.5h的0.113增加到24h的0.386;对应的浓度和累积透过量也随着时间的延长而增加。累积透过量渗透系数为30.241。结论:维生素E亚微粒乳液具有较好的皮肤透过性:透过量随着时间的延长而增加,呈现时间依赖性。

非心原性胸痛患者24小时食管pH值监测

近年来，食管原性胸痛逐渐受到重视。但常规体格检查和内镜检查难以确定是胃食管返流病还是功能性消化不良。本研究对７９例以胸痛，烧心或伴有返酸、反胃等表现的患者同时进行２４小时食管ｐＨ值监测和内镜检查，并将两者结果作对照分析。１对象和方法１．１对象：胸痛经...

EGCG对中波紫外线辐射后原代人角质形成细胞中光产物产生和清除的影响

目的:观察中波紫外线(UVB)辐射后人原代角质形成细胞中环丁烷嘧啶二聚体(cycl obut ane pyrimidine dimmer s,CPDs)的生成和清除情况,以及没食子儿茶素没食子酸酯(epigall ocatechingall ate,EGCG)干预对上述过程的影响。方法:以不同剂量UVB照射原代角质形成细胞后并加入EGCG干预处理,采用免疫组织化学法检测UVB照射后不同时段细胞中CPDs的产生和清除情况。结果:UVB照射后细胞中CPDs开始产生,1h左右达到高峰;CPDs在照光后4h内清除速率较快,4h后清除速率逐渐降低,至24hCPDs被基本清除。照光前后加入EGCG干预减少UVB引起的35.7%～42.9%CPDs产生(P<0.05)。结论:UVB可明显引起原代人角质形成细胞损伤,受损程度随辐射剂量增大而加重;EGCG可以减少UVB辐射所致的光产物的产生,加速光产物的清除。

ALA-PDT治疗面部基底细胞上皮瘤一例

1临床资料患者,余某,男,68岁。3月前鼻部出现斑丘疹等皮疹,无瘙痒及疼痛等感觉,后皮疹渐增大,2周前出现局部糜烂破溃。患者于2012-11-07来笔者科室就诊。专科检查：鼻部黑褐色结节、溃疡,呈堤状损害（见图1）。临床诊断考虑为基底细胞上皮瘤。因患者年纪较大,且皮损位于鼻梁部位,考虑到皮肤活检及手术切除后伤口愈合困难,与患者沟通后建议行ALA-PDT治疗。

3种中药对中波紫外线辐射HaCaT细胞的干预及其机制

目的观察中波紫外线(UVB)辐射后HaCaT细胞光产物胸腺嘧啶二聚体(cyclobutanepyrimidine dimers,CPDs)的生成和清除情况及3种中药活性成分:黄芩(baikal skullcap root,BSR)、川芎(szechwan lovge rhizome,SLR)和表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对该过程的干预情况并探讨上述药物对相关调控分子的作用机制。方法以含10%小牛血清的RMPI1640培养基培养永生化人角质形成细胞株HaCaT细胞,根据实验设计定时定量照射培养细胞并预先或UVB辐射后加入相关药物进行干预处理。免疫组织化学法检测CPDs;RT-PCR法检测受试各组细胞p53和PCNA基因mRNA表达;Western blot法检测受试各组细胞p53和PCNA蛋白表达。结果HaCaT细胞损伤程度随照光剂量加大而加重;30mJ/cm2UVB照射后细胞CPDs生成量在辐射后0.5h左右达到高峰,同时细胞也开始清除CPDs,辐射后4h内清除速率较快,4h后清除速率逐渐降低,照光前加入黄芩溶液,可以减少CPDs生成,照光后即刻加入川芎和EGCG溶液,可加快CPDs清除(P<0.05);UVB照射后可明显增加HaCaT细胞中p53和PCNA mRNA及蛋白表达水平,药物可在不同程度上下调上述基因及蛋白表达。结论UVB辐射对HaCaT细胞的损伤程度呈剂量依赖性并导致DNA损伤而产生光产物CPDs,细胞自身有清除CPDs的能力,所试3种中药均可减少光产物水平;这种光保护作用可能与受试中药影响p53和PCNA基因mR-NA和蛋白表达有关。

5%咪喹莫特乳膏对小鼠皮肤3种细胞因子mRNA表达的影响

目的:研究5%咪喹莫特乳膏对BALB/c小鼠皮肤3种细胞因子的mRNA转录水平的影响。方法:以5%咪喹莫特乳膏刺激BALB/c小鼠皮肤,用逆转录(RT)-PCR法检测皮肤组织中α肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6及IL-1βmRNA的含量。结果:经β2微球蛋白内参校正后,RT-PCR示涂药组2d和7d后TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达均较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5%咪喹莫特乳膏可上调BALB/c小鼠皮肤细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达水平。

强脉冲光对成纤维细胞及血管内皮细胞增殖活性及血管内皮细胞生长因子分泌水平的影响

目的:研究强脉冲光照射对皮肤成纤维细胞、血管内皮细胞的生长增殖状态及两种细胞中血管内皮细胞生长因子(VEGF)分泌水平的影响。方法:分离培养原代成纤维细胞和复苏血管内皮细胞株(ECV034),分别采用波长为590～1200nm和520～1200nm的能量密度为29J/cm2强脉冲光照射上述培养细胞。在照射结束后1、12、24及48h,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性情况,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两种细胞培养上清液中VEGF的分泌情况。结果:成纤维细胞经强脉冲光照射24h及48h后,细胞增殖活性增强(P<0.05),而血管内皮细胞增殖活性无明显改变。强脉冲光照射对成纤维细胞及血管内皮细胞VEGF的分泌无影响。结论:强脉冲光能增强成纤维细胞增殖活性,但不影响成纤维细胞及血管内皮细胞VEGF的分泌。

茶多酚单体和黄芩苷对紫外线辐射皮肤成纤维细胞的影响

目的:研究中药活性成分茶多酚单体没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、黄芩苷对紫外线辐射损伤的成纤维细胞形态、增殖活性及产生IL-6、TNF-α的影响,探讨其光保护作用。方法:采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2剂量UVB照射体外培养的原代人皮肤成纤维细胞,以中药单体EGCG和黄芩苷进行干预处理,倒置相差显微镜观察细胞受损程度,以甲唑盐比色试验(MTT法)检测细胞增殖活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液TNF-α、IL-6分泌量。结果:UVB照射引起皮肤成纤维细胞形态受损,其损伤程度呈剂量依赖性,细胞增殖活性下降28%～44%,其下降程度与照射剂量成正相关(P<0.05),UVB照射后细胞因子分泌增加,加入中药单体处理后细胞活性有不同程度恢复(4%～22%),IL-6、TNF-α分泌量显著下降,差异均有统计学意义。结论:EGCG、黄芩苷具有光保护性能,抑制炎症细胞因子IL-6、TNF-α分泌可能是其减轻紫外线辐射损伤的机制之一。