Q开关翠绿宝石激光和强脉冲光治疗面部雀斑的疗效和安全性

目的比较Q开关翠绿宝石激光(Q-switched Alexandrite Laser,QSAL)和OPT(Optimal Pulse Technology)强脉冲光治疗面部雀斑的临床疗效和安全性。方法将100例单纯面部雀斑患者随机分为QSAL组50例,OPT组50例。QSAL组以Q755nm激光仪治疗1次,OPT组以OPT治疗2次,每次间隔4周。治疗结束后第4、12、24周判定临床疗效,第4周统计PIH发生率以判定安全性,24周进行满意度评价。结果 QSAL组患者治疗后第4周,治愈率82%,显效率14%,进步为4%;治疗后第12周,治愈率84%,显效率14%,进步为2%;治疗后第24周,治愈率86%,显效率14%。OPT组治疗1次后第4周治愈率30%,显效率60%,进步为10%;经过2次OPT治疗后第12周治愈率70%,显效率24%,进步为6%;2次治疗后第24周治愈率70%,显效率24%,进步为6%。患者对治疗的满意度评价,QSAL组非常满意率和满意率分别为78%和20%,轻度满意率2%。OPT组非常满意率和满意率分别为80%和20%。QSAL组有2例患者于术后2～4周开始患处出现炎症后色素沉着(Postinflammatory Hyperpigmentation,PIH),占总例数的4%,于6～24个月内消退;OPT组无PIH的病例出现。结论 Q开关翠绿宝石激光和强脉冲光(OPT)均能很好地治疗雀斑,QSAL组激光治疗效果优于OPT组,而OPT的安全性优于QSAL。

脐血间充质干细胞的培养鉴定及成骨诱导后的免疫原性研究

目的通过观察体外培养人脐血间充质干细胞(Umbilical cord blood-mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)并作诱导成骨分化,探讨其作为组织工程的骨种子细胞的可行性。方法体外分离培养UCB-MSCs,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达及其变化规律;体外成骨诱导UCB-MSCs2周,采用Alizarin Red染色和钙离子半定量测定的方法评价细胞成骨活性。取P2代UCB-MSCs细胞,流式细胞仪检测加入IFN-γ前后的HLA-Ι、HLA-Ⅱ、CD40、CD80等分子的表达情况;流式细胞仪检测UCB-MSCs在成骨诱导分化前后HLA-Ι类分子、HLA-Ⅱ类分子的表达情况以观察成骨诱导分化的MSCs免疫抗原性的变化。结果第1、3、5代细胞的CD29、CD105和CD166均呈阳性表达,而造血细胞系的表面标记CD31、CD34和CD45则呈低表达,且随传代次数增加含量逐渐下降。UCB-MSCs成骨诱导2周后,Alizarin Red染色为阳性。对照组则无明显钙盐沉积。钙离子半定量的检测结果则表明,UCB-MSCs成骨诱导2周后的钙离子含量远高于未诱导组。流式细胞检测结果显示,人UCB-MSCs高表达HLA-Ι类分子,不表达HLA-Ⅱ类分子和CD40,CD80等共刺激分子;经IFN-γ刺激诱导后,HLA-Ι类分子的表达未发生改变,HLA-Ⅱ类分子呈阳性表达,而CD40和CD80的表达仍为阴性。人UCB-MSCs在成骨诱导分化前后HLA-Ι类分子均为阳性表达;而HLA-Ⅱ类分子在成骨分化前为阴性,诱导后阳性表达率增高。结论①UCB-MSCs能诱导分化为成骨细胞,有望成为较理想的组织工程骨种子细胞;②成骨分化使UCB-MSCs的免疫原性发生相应变化。

超脉冲CO_2激光手术创口延迟愈合的成纤维细胞的病理及超微结构特点

目的观察超脉冲CO_2激光手术创口愈合过程中成纤维细胞的病理和超微结构特点,探讨超脉冲CO_2激光手术创口延迟愈合的机理。方法采用6 W功率超脉冲CO_2激光及常规机械方法(常规组)对大鼠背部皮肤致创,随机分成术后9个时相点对组织进行病理观察,并计数成纤维细胞;同时,对其中6个时相点的创缘成纤维细胞进行超微结构观察。结果创口愈合时间常规组于术后8.96 d愈合,6 W激光组愈合延迟至术后12.81 d,两组间有明显差异(P<0.01)激光组创伤愈合过程中成纤维细胞细胞增殖受抑制,术后5 d时成纤维细胞数量少于对照组(P<0.05);常规组成纤维细胞计数高峰为术后第7天,6 W激光组成纤维细胞计数高峰为术后第10天,7 d以后激光组成纤维细胞数量持续超过常规组。电镜观察结果显示,激光组伤口成纤维细胞增殖出现滞后,持续时间长。结论激光引起了创伤周围组织的热损伤,导致了愈合过程中的成纤维细胞增殖的时相改变、早期成纤维细胞增值功能受抑制等,从而使激光创口愈合延迟。

成骨分化的人脐带血间充质干细胞免疫原性研究

目的研究经成骨诱导分化的人脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)表面免疫分子的表达以及体外调节T淋巴细胞增殖反应的功能。方法取自愿捐赠的脐静脉血分离获取UCB-MSCs,体外扩增至第3代,行成骨诱导培养2周。流式细胞仪检测成骨诱导分化前后UCB-MSCs免疫分子人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类分子、HLA-Ⅱ类分子的表达。首先以成骨分化的UCB-MSCs刺激异体T淋巴细胞增殖,未诱导的UCB-MSCs设为对照。共设立UCB-MSCs 1×102、1×103、1×104和1×105个/孔4种不同细胞密度,分为IFN-γ预处理组和未处理组。然后以植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激T淋巴细胞增殖,分别加入上述不同数量级的未诱导与成骨诱导分化的UCB-MSCs,观察对T淋巴细胞增殖的影响,并同时加入IL-2检测对UCB-MSCs抑制T淋巴细胞增殖作用的逆转。最后建立Transwell共培养体系,研究成骨诱导分化的UCB-MSCs对混合T淋巴细胞反应的抑制作用是否为接触抑制性。结果未诱导的UCB-MSCs高表达HLA-Ⅰ类分子,不表达HLA-Ⅱ类分子;经成骨诱导分化的UCB-MSCs HLA-Ⅱ类分子的阳性表达率升高。未诱导的UCB-MSCs对异体T淋巴细胞增殖有显著抑制效果,而成骨诱导分化的UCB-MSCs对T淋巴细胞增殖的抑制作用明显减弱(且无细胞数量依赖性),并且在IFN-γ作用后,有刺激T淋巴细胞增殖的效果。密度为1×104个/孔及1×105个/孔时未诱导的UCB-MSCs可抑制PHA刺激的T淋巴细胞增殖,但加入IL-2后该抑制作用被逆转;而成骨诱导分化的UCB-MSCs则不具有抑制T淋巴细胞增殖的作用。Transwell共培养结果表明,与直接接触培养相似,未诱导的UCB-MSCs可显著抑制T淋巴细胞增殖反应,而成骨诱导分化的UCB-MSCs抑制能力明显减弱。结论经成骨诱导分化的UCB-MSCs抑制混合T淋巴细胞增殖反应的效果明显低于未经成骨诱导分化的UCB-MSCs,不适合作为骨组织工程或细胞治疗的同种异体种子细胞来源。

自体脂肪干细胞移植对兔骨质疏松的影响

目的观察自体脂肪干细胞（adipose．derivedstemcells，ASCs）移植对双侧卵巢切除术后骨质疏松（ovariectomyosteoporosis，OVX—OP）兔的影响。方法15只成年新西兰雌性大白兔随机分为OVX模型组（A组，n=12）与假手术组（B组，n=3）。A组行双侧卵巢切除术，B组行假手术。术后6个月，A、B组行双能量x线吸收测定（dualenergyX-rayabsorptiometry，DXA）检测骨密度（bonemineraldensity，BMD），验证造模效果。取OP兔皮下脂肪，体外培养并成骨诱导ASCs，行细胞计数，碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）、茜素红染色及骨钙素（osteocalcin，OCN）等检测。取第3代成骨诱导ASCs复合藻酸钙凝胶（calciumalginatehydrogel，CAH），于OP模型兔左侧股骨远端注射ASCs—CAH，而右侧股骨注射单纯CAH材料作为治疗对照组。移植12周后作骨密度测定、Micro-CT检测及骨组织形态学分析。结果与B组相比，A组股骨骨密度明显降低（P〈0．05），证实OVX造模成功；体外成骨诱导培养的ASCs细胞计数与未诱导组相比，差异无统计学意义（P〉0．05），而ALP、OCN检测及茜素红染色证实ASCs已分化为成骨细胞；自体细胞移植治疗12周后，与对照组相比，细胞治疗组股骨远端骨密度、骨小梁数量、厚度、分离度及结构模型指数均明显改善（P〈0．05）。组织学检测发现实验组骨小梁厚度增宽，植入的CAH材料已降解完全，而对照组骨小梁较纤细，CAH材料有部分残留。结论ASCs自体移植对兔OP有一定的治疗效果，为OP治疗提供新思路。