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蛇毒类凝血酶研究进展
被引量:
8
1
作者
林奕心
余晓东
+2 位作者
和七一
宋锡迅
李恒
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009年第2期27-32,F0003,共7页
对有关蛇毒类凝血酶(SVTLEs)的分布分类、理化性质、酶学性质、结构特征、基因克隆表达、临床应用等方面的研究资料进行了概括和综述。结果发现:SVTLEs主要分布在蝮亚科和蝰科毒蛇的毒液中;根据SVTLEs水解纤维蛋白原释放FPA和FPB的速度...
对有关蛇毒类凝血酶(SVTLEs)的分布分类、理化性质、酶学性质、结构特征、基因克隆表达、临床应用等方面的研究资料进行了概括和综述。结果发现:SVTLEs主要分布在蝮亚科和蝰科毒蛇的毒液中;根据SVTLEs水解纤维蛋白原释放FPA和FPB的速度不同,可将其分为SVTLE-AB、SVTLE-A和SVTLE-B等3类;多数SVTLEs的分子量在30~50kD,含6个二硫键,pI较低,部分SVTLEs的pI较高;SVTLEs可水解TAME和BAEE,其活性可被DFP和PMSF所抑制,但不被胰蛋白酶trypsin及凝血活性中心His的专一抑制剂TLCK和EDTA抑制;对SVTLEs的一级结构和二级结构研究较多,对高级结构研究有待深入;很多SVTLEs基因在大肠杆菌中成功获得了表达,但表达物不能被糖基化和正确折叠,故没有活性或活性不高,而其在真核表达系统中表达活性较高;部分碳水化合物具有稳定SVTLEs结构及提高SVTLEs的酶活力的作用;SVTLEs的临床应用涉及心肌梗塞、缺血性中风、血栓性疾病等疾病的治疗。SV-TLEs未来的研究重点将集中于其在真核表达系统的表达和对其高级结构的解析。
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关键词
蛇毒
类凝血酶
SVTLEs
凝血活性
蛋白结构
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职称材料
白唇竹叶青蛇毒类凝血酶基因的克隆和序列分析
被引量:
2
2
作者
宋锡迅
余晓东
+2 位作者
林奕心
和七一
李恒
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009年第4期38-42,共5页
通过分析多种已知的毒蛇蛇毒类凝血酶(SVTLEs)基因序列同源性,以保守的N和C末端氨基酸序列设计引物,克隆得到白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)SVTLE基因并分析其序列。以毒腺总RNA为模板进行RT—PCR,纯化并克隆至pMD18-T。...
通过分析多种已知的毒蛇蛇毒类凝血酶(SVTLEs)基因序列同源性,以保守的N和C末端氨基酸序列设计引物,克隆得到白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)SVTLE基因并分析其序列。以毒腺总RNA为模板进行RT—PCR,纯化并克隆至pMD18-T。结果表明,该酶基因大小为777bp;推测出其相应氨基酸序列含258个氨基酸残基,分子量为28.02kD,pI值为6.07;其3个可能糖基化位点为NDT103~105、NNS121~123和NRT251~253;与其它毒蛇的已知SVTLEs基因比较分析,推测出其含6对二硫键即Cys31—162、Cys50-66、Cys98.256、Cys142—210、Cys174—189和Cys200—225;其催化活性中心氨基酸残基为His65、Asp110和Ser204。分子进化树分析表明,毒蛇SVTLEs一级结构的进化具有一定种属特征,可为蛇的系统分类提供参考。
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关键词
白唇竹叶青
蛇毒类凝血酶(SVTLEs)
克隆
序列分析
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职称材料
中华眼镜蛇(Naja Naja Atra)毒神经生长因子对PC_(12)细胞κ阿片受体mRNA表达的影响
被引量:
1
3
作者
李卉
余晓东
+3 位作者
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2008年第3期148-152,共5页
目的研究眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响,探讨nNGF诱导PC12细胞分化的分子机制。方法用RT-PCR方法半定量地考察nNGF及κ阿片受体的一些拮抗剂和激动剂对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响。结果(1)在25...
目的研究眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响,探讨nNGF诱导PC12细胞分化的分子机制。方法用RT-PCR方法半定量地考察nNGF及κ阿片受体的一些拮抗剂和激动剂对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响。结果(1)在25,50和100 ng/mL 3个nNGF剂量组中,50和100 ng/mL nNGF显著下调PC12细胞κ阿片受体mRNA的表达。(2)50 ng/mL nNGF分别处理PC12细胞1,3,5,7,10 d后,结果显示κ阿片受体mRNA表达随时间有降低的趋势,7 d时显著下调(P<0.05),10 d时特别显著(P<0.01)。(3)10μmol/L吗啡上调PC12细胞κ阿片受体mRNA表达,并能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。10μmol/L纳络酮对PC12细胞κ阿片受体的表达无显著影响,也能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。但吗啡和纳络酮共存时不能逆转NGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化时,能下调其κ阿片受体mRNA表达,这种下调能分别被吗啡或纳络酮逆转,但不能被吗啡和纳络酮共存时逆转。
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关键词
中华眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)
PC12细胞
Κ阿片受体
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职称材料
中华眼镜蛇毒神经生长因子对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响
4
作者
李卉
余晓东
+3 位作者
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期88-91,共4页
目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-1...
目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-13个剂量中,50和100μg.L-1nNGF下调PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达,50μg.L-1剂量组下调最明显(P<0.01),100μg.L-1剂量组下调(P<0.05)。②50μg.L-1nNGF分别处理PC12细胞1、3、5、7、10 d后,其κ阿片受体蛋白质表达呈降低趋势,其中d 5、7下调(P<0.05),d 10下调明显(P<0.01)。③10μmol.L-1吗啡可上调PC12细胞κ阿片受体蛋白表达,而10μmol.L-1纳络酮对其无影响,二者分别都能逆转nNGF的下调效应,但是二者共存时不能逆转nNGF的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化中,可引起PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的下调效应,该效应能被吗啡或纳络酮逆转,但二者共存不能被逆转效应。
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关键词
中华眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)
PC12细胞
Κ阿片受体
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职称材料
题名
蛇毒类凝血酶研究进展
被引量:
8
1
作者
林奕心
余晓东
和七一
宋锡迅
李恒
机构
重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室重庆市生物活性物质工程研究中心
出处
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009年第2期27-32,F0003,共7页
基金
重庆市自然科学基金(No.CSTC2006BA503)
文摘
对有关蛇毒类凝血酶(SVTLEs)的分布分类、理化性质、酶学性质、结构特征、基因克隆表达、临床应用等方面的研究资料进行了概括和综述。结果发现:SVTLEs主要分布在蝮亚科和蝰科毒蛇的毒液中;根据SVTLEs水解纤维蛋白原释放FPA和FPB的速度不同,可将其分为SVTLE-AB、SVTLE-A和SVTLE-B等3类;多数SVTLEs的分子量在30~50kD,含6个二硫键,pI较低,部分SVTLEs的pI较高;SVTLEs可水解TAME和BAEE,其活性可被DFP和PMSF所抑制,但不被胰蛋白酶trypsin及凝血活性中心His的专一抑制剂TLCK和EDTA抑制;对SVTLEs的一级结构和二级结构研究较多,对高级结构研究有待深入;很多SVTLEs基因在大肠杆菌中成功获得了表达,但表达物不能被糖基化和正确折叠,故没有活性或活性不高,而其在真核表达系统中表达活性较高;部分碳水化合物具有稳定SVTLEs结构及提高SVTLEs的酶活力的作用;SVTLEs的临床应用涉及心肌梗塞、缺血性中风、血栓性疾病等疾病的治疗。SV-TLEs未来的研究重点将集中于其在真核表达系统的表达和对其高级结构的解析。
关键词
蛇毒
类凝血酶
SVTLEs
凝血活性
蛋白结构
Keywords
snake venom
thrombin-like enzymes
SVTLEs coagulation activity
protein structure
分类号
R973.1 [医药卫生—药品]
Q556.9 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
白唇竹叶青蛇毒类凝血酶基因的克隆和序列分析
被引量:
2
2
作者
宋锡迅
余晓东
林奕心
和七一
李恒
机构
重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室重庆市生物活性物质工程研究中心
出处
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009年第4期38-42,共5页
基金
重庆市自然科学基金(No.CSTC2006BA503)
文摘
通过分析多种已知的毒蛇蛇毒类凝血酶(SVTLEs)基因序列同源性,以保守的N和C末端氨基酸序列设计引物,克隆得到白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)SVTLE基因并分析其序列。以毒腺总RNA为模板进行RT—PCR,纯化并克隆至pMD18-T。结果表明,该酶基因大小为777bp;推测出其相应氨基酸序列含258个氨基酸残基,分子量为28.02kD,pI值为6.07;其3个可能糖基化位点为NDT103~105、NNS121~123和NRT251~253;与其它毒蛇的已知SVTLEs基因比较分析,推测出其含6对二硫键即Cys31—162、Cys50-66、Cys98.256、Cys142—210、Cys174—189和Cys200—225;其催化活性中心氨基酸残基为His65、Asp110和Ser204。分子进化树分析表明,毒蛇SVTLEs一级结构的进化具有一定种属特征,可为蛇的系统分类提供参考。
关键词
白唇竹叶青
蛇毒类凝血酶(SVTLEs)
克隆
序列分析
Keywords
Trimeresurus albolabris
SVTLEs
cloning
sequence analysis
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
中华眼镜蛇(Naja Naja Atra)毒神经生长因子对PC_(12)细胞κ阿片受体mRNA表达的影响
被引量:
1
3
作者
李卉
余晓东
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
机构
重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室重庆市生物活性物质工程研究中心
出处
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2008年第3期148-152,共5页
基金
重庆市教委基金项目
重庆市自然科学基金CSTC2006BA503
文摘
目的研究眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响,探讨nNGF诱导PC12细胞分化的分子机制。方法用RT-PCR方法半定量地考察nNGF及κ阿片受体的一些拮抗剂和激动剂对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响。结果(1)在25,50和100 ng/mL 3个nNGF剂量组中,50和100 ng/mL nNGF显著下调PC12细胞κ阿片受体mRNA的表达。(2)50 ng/mL nNGF分别处理PC12细胞1,3,5,7,10 d后,结果显示κ阿片受体mRNA表达随时间有降低的趋势,7 d时显著下调(P<0.05),10 d时特别显著(P<0.01)。(3)10μmol/L吗啡上调PC12细胞κ阿片受体mRNA表达,并能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。10μmol/L纳络酮对PC12细胞κ阿片受体的表达无显著影响,也能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。但吗啡和纳络酮共存时不能逆转NGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化时,能下调其κ阿片受体mRNA表达,这种下调能分别被吗啡或纳络酮逆转,但不能被吗啡和纳络酮共存时逆转。
关键词
中华眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)
PC12细胞
Κ阿片受体
Keywords
Naja Naja Atra nerve growth factor (nNGF)
PC12 cell
κ opioid receptor
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
中华眼镜蛇毒神经生长因子对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响
4
作者
李卉
余晓东
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
机构
重庆师范大学生命科学学院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期88-91,共4页
基金
重庆市自然科学基金重点资助项目(NoCSTC2006BA5032)
重庆市教委基金资助项目
文摘
目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-13个剂量中,50和100μg.L-1nNGF下调PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达,50μg.L-1剂量组下调最明显(P<0.01),100μg.L-1剂量组下调(P<0.05)。②50μg.L-1nNGF分别处理PC12细胞1、3、5、7、10 d后,其κ阿片受体蛋白质表达呈降低趋势,其中d 5、7下调(P<0.05),d 10下调明显(P<0.01)。③10μmol.L-1吗啡可上调PC12细胞κ阿片受体蛋白表达,而10μmol.L-1纳络酮对其无影响,二者分别都能逆转nNGF的下调效应,但是二者共存时不能逆转nNGF的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化中,可引起PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的下调效应,该效应能被吗啡或纳络酮逆转,但二者共存不能被逆转效应。
关键词
中华眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)
PC12细胞
Κ阿片受体
Keywords
Naja Naja Atra nerve growth factor (nNGF)
PC12 cell
K opioid receptor
分类号
R282.74 [医药卫生—中药学]
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
蛇毒类凝血酶研究进展
林奕心
余晓东
和七一
宋锡迅
李恒
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009
8
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职称材料
2
白唇竹叶青蛇毒类凝血酶基因的克隆和序列分析
宋锡迅
余晓东
林奕心
和七一
李恒
《重庆师范大学学报(自然科学版)》
CAS
2009
2
下载PDF
职称材料
3
中华眼镜蛇(Naja Naja Atra)毒神经生长因子对PC_(12)细胞κ阿片受体mRNA表达的影响
李卉
余晓东
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
《中国生化药物杂志》
CAS
CSCD
2008
1
下载PDF
职称材料
4
中华眼镜蛇毒神经生长因子对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响
李卉
余晓东
和七一
邓敏
陈夏
林奕心
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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