血清游离轻链在鉴别诊断不同病因肾病的应用价值及其与患者肾功能分期的相关性分析

目的:探讨血清游离轻链(serum free light chain,sFLC)对单克隆免疫球蛋白相关肾病的辅助诊断效能,及其与不同病因肾损伤患者肾功能分期间的相关性。方法:收集2017年1月至2021年9月上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的非单克隆免疫球蛋白相关肾损伤患者368例、单克隆免疫球蛋白相关肾病患者64例和正常对照30例。检测各组sFLC,并使用GraphPad Prism v9.0软件进行统计学分析。结果:单克隆免疫球蛋白相关肾病患者的sFLC水平显著高于非单克隆免疫球蛋白相关肾损伤患者(sFLCκ,453.0 mg/L比53.2 mg/L;sFLCλ,382.5 mg/L比56.5 mg/L),且sFLCκ/λ比值异常。当sFLCκ/λ比值阈值设为1.925时,其诊断κ型单克隆免疫球蛋白病的灵敏度为84.4%,特异度为97.0%,受试者操作特征曲线的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.9339。当sFLCκ/λ比值阈值设为0.455时,其诊断λ型单克隆免疫球蛋白病的灵敏度为84.4%,特异度为87.2%,AUC为0.9159。sFLC水平与非单克隆免疫球蛋白相关肾病患者肾功能分期间的相关性(r=0.7)优于单克隆免疫球蛋白相关肾病患者(r=0.4),且sFLC水平与患者肾功能分期间的相关性较sFLCκ/λ比值(r<0.3)更高。结论:sFLCκ/λ比值可用于单克隆免疫球蛋白相关肾病与非单克隆免疫球蛋白相关肾损伤的鉴别诊断,而sFLC水平较sFLCκ/λ比值更适于患者的肾功能评估。

Sysmex XN血液分析仪未成熟血小板比率在血小板减少性疾病中的应用

目的评估Sysmex XN血液分析仪未成熟血小板比率(IPF%)在血小板减少性疾病中的应用。方法选取血小板减少性疾病患者200例[原发免疫性血小板减少症(ITP组)患者45例、再生障碍性贫血(AA组)患者40例、化疗患者(CT组)60例、慢性肝病(CLD组)患者55例]以及体检健康者(健康对照组)50名,采用Sysmex XN血液分析仪检测其外周血血小板(PLT)及IPF%,用Graph Pad Prism 6软件比较各疾病组与健康对照组之间IPF%差异,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析IPF%在各组疾病中的诊断价值。结果 ITP组、AA组、CT组及CLD组PLT计数均显著低于健康对照组(P<0.05),而ITP组与AA组间以及CT组与CLD组间PLT计数差异无统计学意义(P>0.05)。ITP组IPF%显著高于健康对照组、AA组、CT组及CLD组(P<0.05),而AA组、CT组、CLD组及健康对照组之间IPF%差异均无统计学意义(P>0.05)。当IPF%临界值为5.8%时,其鉴别诊断ITP与低增生性PLT减少症的敏感性和特异性分别为82.2%和86.8%,曲线下面积(AUC)为0.92。结论 Sysmex XN血液分析仪IPF%参数在鉴别高增生性及低增生性PLT减少症中有一定应用价值。

人巨细胞病毒pp65蛋白的研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原血症的监测用于HCMV活动性感染的诊断已成为国际公认的相对“金标准”。此外,利用pp65蛋白能刺激、诱导病毒特异性CD8+T细胞活化与增殖特性,用于检测宿主对HCMV的特异性细胞免疫功能,已为疾病的治疗和预防开创新思路和新方法。本文就HCMVpp65蛋白的特性以及在HCMV感染的诊断、治疗和预防上的应用进行综述。

95例意义未明的单克隆丙种球蛋白血症实验室特征分析

目的对意义未明的单克隆丙种球蛋白血症(MGUS)的实验室特征进行分析。方法回顾性分析95例MGUS患者的年龄、性别、M蛋白类型及含量。结果95例MGUS患者中IgG型63例,血清M蛋白水平为5.2(2.6~8.6)g/L,κ轻链/λ轻链比值(简称κ/λ比值)为2.2(0.7~4.2);IgA型22例,血清M蛋白水平为4.9(3.2~8.6)g/L,κ/λ比值为1.7(1.1~3.0);IgM型8例,血清M蛋白水平为5.1(4.2~6.9)g/L,κ/λ比值为1.6(0.9~3.4);此外,还有1例双克隆型和1例轻链型。95例患者血清M蛋白水平为6.3 g/L,其中7例M蛋白≥15 g/L。各亚型患者年龄、性别、血清M蛋白水平及κ/λ比值差异均无统计学意义(P>0.05)。95例MGUS患者中有2例1年内转为多发性骨髓瘤(MM),其中1例为轻链型、1例为IgGλ型;分别有1例IgGκ型和IgMκ型转为冒烟型MM和冒烟型华氏巨球蛋白血症。结论IgG型是MGUS最常见的免疫球蛋白类型,其次为IgA型。临床应进一步规范MGUS患者的危险分层并随访,使高危患者可在疾病进展早期得到诊断和治疗。

不同预后小肠间质瘤的比较蛋白质组学分析

目的:分析不同预后小肠间质瘤病人组织蛋白质质点,寻找判断小肠间质瘤预后的候选蛋白质。方法:预后不良组和预后良好组小肠间质瘤组织各5例,经双向凝胶电泳分离总蛋白质,运用图像分析软件分析,对差异蛋白质点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定部分差异蛋白质点。结果:比较蛋白质组学共鉴定出蛋白质28个(预后不良组中9个蛋白质表达上调,19个蛋白质下调)。预后不良组小肠间质瘤组织中微管不稳定蛋白(stathmin)、血清结合珠蛋白(haptoglobin 2,HP-2)和微管蛋白表达明显升高。结论:不同预后小肠间质瘤组织的蛋白质谱存在差异,stathmin和HP-2及微管蛋白可能成为判断小肠间质瘤病人预后的3种因子,为今后小肠间质瘤病人的临床预后判断提供依据。

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度（A）值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5-1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0-2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致（χ^2=0.078,P〉0.05）。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。

血栓弹力图监测低相对分子质量肝素的探讨

目的尝试使用血栓弹力图(TEG)R时间来监测低相对分子质量肝素(LMWH)的临床用药。方法选取本院肾脏内科肾病综合症住院患者20例,患者首次用药和第二次用药后4 h均抽血进行TEG和抗Xa活性检测:TEG R时间及抗Xa活性的检测;TEG R时间与抗Xa活性的相关性分析;抗Xa活性与首次用药间的相关性分析;TEG R时间与首次用药的相关性分析;不同剂量用药间抗Xa活性的比较分析;不同剂量用药间TEG R时间的比较分析。结果 TEG R时间与抗Xa活性无相关性(P=0.54,R=-0.1449);抗Xa活性与首次用药量无相关性(P=0.26,R=-0.263 6);TEG R时间与首次用药量间有显著相关性(P<0.000 1,R=0.875);2次用药间抗Xa活性存在差异(P=0.000 5,t=4.152);2次用药间TEG R时间存在显著差异(P<0.000 1,t=15.19)。结论 TEG R时间比抗Xa活性更能准确反映出患者的LMWH用药情况。

Reflotron-Hemoglobin干式血红蛋白检测系统的性能评价

目的：对Reflotron-Hemoglobin干式血红蛋白检测系统进行性能评价。方法对仪器的批内精密度、批间精密度、线性、相关性及参考范围进行验证。结果 Reflotron-Hemoglobin干式血红蛋白检测系统的批内精密度为2．54％～2．84％；批间精密度为0．68％～3．38％；线性范围为52～191 g/L；与 BECKMAN-COULTER LH750全自动血液分析仪的相关方程为 Y＝1．0316X-2．7969；参考区间验证符合率为100％。结论Reflotron-Hemoglobin 干式血红蛋白检测系统批内、批间精密度较好；在正常及病理范围内检测结果可靠；常用参考区间适用于本仪器。

UniCel DxH800 Coulter血液分析仪血小板计数准确性评价

目的：评估UniCel DxH 800 Coulter血液分析仪（简称UniCel DxH 800）血小板计数的准确性。方法按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的要求，将UniCel DxH 800血小板计数结果与国际参考方法（流式细胞术）检测结果进行比对。选取556例临床标本（乙二胺四乙酸二钾抗凝），其中包括血小板计数〈50.0×10^9/L的标本113例，经手工分类含巨大血小板的标本36例。所有标本同时进行UniCel DxH 800及Coulter EPICS XL流式细胞仪检测。流式细胞术采用CD41以及CD61双抗标记法。结果UniCel DxH 800血小板计数结果与流式细胞术结果之间具有较好的相关性（相关系数为0.9943）。对于血小板计数〈50.0×10^9/L的标本也能较准确定量（相关系数为0.9480）。对极低血小板计数水平（〈20×10^9/L）、较低血小板计数水平[（20-50）×109/L]、低血小板计数水平[（50-100）×10^9/L]、正常血小板计数水平[（100-275）×10^9/L]及高血小板计数水平（〈275×10^9/L）临床标本的准确性均较高（预期偏移为12.5%，实际偏移分别为2.2%、2.5%、1.0%、0.6%和-1.7%）。对于含巨大血小板的标本，2种方法的相关系数也高达0.9868。结论 UniCel DxH 800用于检测正常和异常的临床标本血小板计数，结果准确性均较高。

Cella Vision DM96自动化数字图像分析系统红细胞形态分类的性能评价

目的评价Cella Vision DM96自动化数字图像分析系统(简称DM96)对异常红细胞形态分类的敏感性和特异性。方法 500份乙二胺四乙酸二钾抗凝外周血仪器制片染色后,分别作显微镜检查和DM96白细胞分类计数及红细胞形态分析,以人工显微镜检查结果为标准,比较DM96异常红细胞形态预分类结果的敏感性和特异性。结果人工显微镜检查发现12种异常红细胞形态。DM96红细胞形态预分类结果的总准确性为94.9%,敏感性随异常红细胞类型而异(23.1%~89.7%),仪器识别各类型异常红细胞形态的特异性和一致性较高(均>90%)。结论 DM96对异常红细胞形态分类有较好的临床应用价值,但必要时需作人工复检。

白介素27基因多态性与克罗恩病的相关研究

目的:探讨白介素27(IL-27)基因rs153109、rs17855750和rs181206位点的多态性与克罗恩病的相关性。方法:选取145例汉族克罗恩病患者和238名正常人作为观察对象,采用聚合酶链反应-连接酶检测进行基因分型,分析病例组和对照组的基因型频率及等位基因频率。结果:2组的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。rs153109位点的C等位基因频率在2组之间的分布差异有统计学意义(45.86%比38.24%,P<0.05),而该位点基因型分布在2组间无统计学意义(P>0.05);rs17855750和rs181206位点的基因型频率及等位基因频率在2组间的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-27基因多态性位点rs153109可能与克罗恩病易感性有关,未发现rs17855750和rs181206多态性与克罗恩病有关。

抗膜突蛋白抗体在抗磷脂综合征中的初步研究

目的 :分析抗磷脂综合征患者抗膜突蛋白抗体表达情况,并探讨抗膜突蛋白抗体在抗磷脂抗体相关性血栓发生中可能的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验检测70例抗磷脂综合征患者(包括50例抗磷脂抗体相关性血栓患者和20例抗磷脂抗体相关性反复流产者)及100名正常对照者的血清抗膜突蛋白抗体及其他自身抗体的阳性率。制备鼠源性单克隆抗膜突蛋白抗体,加入正常人富血小板血浆中,检测其诱导血小板聚集的能力;同时加入单克隆抗体和膜突蛋白,检测血小板聚集抑制率。结果:在50例抗磷脂抗体相关性血栓患者和20例抗磷脂抗体相关性反复流产患者中,抗N端膜突蛋白抗体阳性率分别为76%和65%,显著高于其他自身抗体(抗C端膜突蛋白抗体、抗血小板抗体、抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体)的阳性率。鼠源性单克隆抗N端膜突蛋白抗体有诱导血小板聚集的作用,而该作用可被N端膜突蛋白抑制,但不能被二磷酸腺苷激活途径抑制物精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸四肽所抑制。结论:大部分抗磷脂抗体综合征患者存在抗N端膜突蛋白抗体阳性,且该抗体的产生可能与抗磷脂综合征患者血栓形成的发病机制相关。抗膜突蛋白抗体在诊断和治疗抗磷脂综合征中的应用值得进一步探索。

基质效应对荧光偏振免疫测定技术和酶放大免疫测定方法检测环孢素A结果的影响

目的通过荧光偏振免疫测定（fluorescence polarization immunoassay，FPIA）和酶放大免疫测定技术（enzyme-multiplied immunoassay technique，EMIT）测定环孢素A（cyclosporine，CsA），了解基质效应对检测结果的影响，解释在CsA室间质评结果中两方法的检测结果的差别，并找到纠正方法。方法选择不同浓度的临床全血标本100份，用FPIA和EMIT技术进行检测，对比检测结果；通过添加Cu2＋，Zn2＋评估离子残留对免疫反应的影响；用添加等体积血红蛋白富集液后再次抽提的方法，评价非全血基质对质控品和CsA标准品抽提率的影响。结果检测临床全血标本FPIA（X）和EMIT（Y）检测结果具有良好的相关性（Y=0．9268X-8．115，R2=0．9969）；金属离子残留对FPIA法和EMIT法均不产生干扰（P〉0．05）；非全血基质样本会降低两方法的抽提率；样本中血红蛋白含量≥30g／L就可纠正非全血基质对抽提率的影响。结论下发质控品的非全血基质是导致CsA室间质评结果中两系统的检测结果不一致的主要原因，可通过添加血红蛋白富集液进行纠正；遇器官移植受者有极低血红蛋白（〈30g／L）时，要充分考虑低血红蛋白对CsA检测结果的影响。

梅毒特异性IgG和IgM检测新方法的临床应用

目的:应用免疫吸附法建立一种基于明胶颗粒凝集法的梅毒特异性IgG、IgM抗体分型检测方法 ,并探讨其临床应用价值。方法:用羊抗人IgG、IgM抗血清作为吸附剂,对165例梅毒特异性抗体阳性样本分别进行IgG和IgM型抗体的检测,并将检测结果与免疫印迹法进行比较。结果:原倍纯化的羊抗人IgG抗血清对血清样本IgG含量在6.12～34.70 g/L范围时免疫吸附有效,原倍羊抗人IgM抗血清对血清样本含量在2.67～14.68 g/L范围的免疫吸附有效。该方法对165例梅毒螺旋体明胶颗粒凝集(TPPA)试验阳性的标本检测结果与免疫印迹法结果的符合率为100%。结论:经免疫吸附的血清样本用TPPA试验检测梅毒特异性IgG、IgM抗体,可对抗体阳性标本中的IgG和IgM抗体进行简便、可靠的分型检测,有助于梅毒患者的明确诊断、治疗及随访。

遗传性凝血因子X缺乏一例

患者，女，60岁。近亲结婚，既往有出血愈合不良、输血史，HCV阳性，分型为1b型。胆囊结石伴慢性胆囊炎8年，4个月前腹痛加重伴腰背酸痛，于2017年8月5日入住上海瑞金医院胃肠外科。查体：全身皮肤黏膜无黄染、出血点，两肺呼吸音清，未闻及干、湿性啰音，全身浅表淋巴结无肿大。B超示：胆囊形态正常，胆囊壁毛糙，囊内有强回声团。