青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠足细胞损伤的干预作用及机制分析

目的探讨青藤碱对阿霉素诱导的局灶节段肾小球硬化大鼠的干预作用及其机制。方法采用单侧肾切除术加两次尾静脉注射阿霉素建立局灶节段肾小球硬化模型。将大鼠随机分为正常组,模型组,青藤碱低、中、高剂量组和FK506组,干预4周。检测24 h尿蛋白、血生化、肾组织病理,免疫组化检测肾组织Podocin和TRPC6,Western blot检测Nephrin、Podocin和TRPC6表达,电镜观察肾小球微观结构。结果与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量明显升高(P<0.05),血白蛋白明显减少(P<0.05)。经青藤碱低、中、高剂量干预后,24 h尿蛋白量呈剂量依赖性降低,血白蛋白呈剂量依赖性升高,FK506组24 h尿蛋白量亦显著下降,血白蛋白显著升高(P<0.05)。免疫组化和Western blot提示模型组肾组织Podocin、Nephrin表达显著下降,TRPC6表达显著升高,经青藤碱低、中、高剂量干预后,Podocin、Nephrin呈剂量依赖性升高,TRPC6呈剂量依赖性下降,FK506组Podocin、Nephrin表达亦显著升高,TRPC6表达下降(P<0.05)。模型组电镜下肾小球足突广泛融合,经青藤碱或FK506干预后,足细胞融合减轻。结论青藤碱可能通过下调TRPC6表达对足细胞损伤进行修复,进而减轻肾组织病理改变。

时间平均尿红细胞水平影响IgA肾病患者预后的临床研究

目的:探讨不同尿红细胞水平与IgA肾病患者临床指标、病理、及预后的关系。方法:经肾活检确诊为原发性IgA肾病患者,根据时间平均尿红细胞(time average urinary red blood cell,TA-uRBC)检测结果的三分位数分为低、中、高三组,分析比较各组的临床病理及预后,主要结局事件定义为死亡,或到达肾脏结局[包含终末期肾衰竭(透析,移植),或肾小球滤过率下降大于40%]。结果:共纳入540例IgAN患者,尿红细胞水平与年龄(r=-0.142,P=0.001)、平均动脉压(r=-0.094,P=0.049)、与eGFR水平(r=0.091,P=0.04)正相关。尿红细胞水平与病理损伤中的新月体比例(r=0.196,P<0.0001)、系膜细胞增生程度(r=0.097,P=0.03)、毛细血管内细胞增生程度(r=0.093,P=0.04)呈正相关。与节段性硬化、小管萎缩/间质纤维化无相关性(P>0.05)。随访65(IQR 51.00~103.00)个月,随访期间共计40例患者(7.41%)到达终点事件,其中6例进入ESRD,34例GFR下降>40%。Kaplan-Meier生存分析结果表明低、中、高组的肾脏生存率依次降低(P=0.045);多因素COX回归提示TA-uRBC每升高10/HP,肾功能进展至结局的风险增加45.4%,(95%CI 1.185~1.785),P=0.0003。进一步进行亚组分析,对24 h尿蛋白定量>0.74 g(中位数)的患者,各组生存曲线差异有统计学意义(P=0.045),肾脏预后与TA-uRBC水平(r=1.063,P=0.0005)正相关;而24 h尿蛋白定量<0.74 g的患者各组间则差异无统计学意义。结论:IgA肾病血尿水平与新月体形成正相关。持续存在血尿且其平均水平与IgAN的预后相关。

“率意沉雄”——徐渭写意笔画在文字创新设计中的运用

徐渭是中国传统美术界中最具特色和代表性的艺术家之一,他的写意性绘画和独特的书法风格在艺术创作中占有重要地位。本文旨在以写意性笔画为基础,通过对徐渭的作品《墨葡萄图》的风格和特点进行分析,研究了其构图、造型和笔画等方面的特点以及写意性的表现,提取这些特点进行创新文字设计,追求逸笔草草、不求形似的意境。探究徐渭在写意画中展现的“率意沉雄”风格对于当代艺术价值的探索具有深刻的启示,同时也凸显了写意性手法对于传播中国传统文化内涵的重要性。

基于真实世界回顾性分析糖皮质激素干预IgA肾病的临床研究

目的:评估糖皮质激素对IgA肾病的疗效性与安全性。方法:基于真实世界研究方法,选取2009年05月—2015年05月于杭州市中医院经活检证实IgAN的患者,分为糖皮质激素联合RAS阻断剂治疗组和单用RAS阻断剂治疗组。比较两组患者的一般资料及两种治疗方案的疗效和副作用,分析影响IgAN疾病进展的因素;同时比较初始激素剂量大小对治疗疗效及副作用的发生率。结果:(1)共纳入符合标准IgAN患者共287例,除年龄和基线24 h蛋白尿外,两组间一般资料均无差异。激素组M1、S1、新月体比例高于RAS组;(2)激素组预后优于RAS组,预后与激素初始剂量无相关性。感染发生率激素组高于RAS组,常规剂量激素组高于小剂量激素组;(3)当基线24 h蛋白尿>0.75 g/d,或基线eGFR≤90 ml·min^(-1)·1.73 m^(-2),或肾脏病理提示球性硬化、M1、S1、C1时,激素组肾脏预后优于RAS组;(4)多因素COX比例风险模型提示糖皮质激素是影响IgAN疾病进展的独立因素。结论:在尿蛋白定量>0.75 g/d,或肾脏病理提示M1、S1、C1情况下,糖皮质激素干预有益于延缓肾功能进展,且小剂量的糖皮质激素可获得和常规激素同等的获益,而副作用更低。

肾小球疾病患者尿沉渣足细胞分子podocin和podocalyxin分析

目的:以ELISA法检测尿沉渣足细胞podocin,podocalyxin排泌并观察其与不同肾小球疾病的关系。方法:共收集我院自2010年5月～8月以来行肾活检证实为肾小球疾病的患者,收集其临床资料,并以ELISA法检测尿沉渣足细胞分子podocin,podocalyxin。结果:共40个患者,男15例,女25例,平均年龄(38.27±16.33)岁,增殖性肾小球疾病患者19例:IgA肾病10例,新月体性肾炎2例,IgM肾病2例,Ⅳ(A/G)型狼疮性肾炎5例;非增殖性肾小球疾病患者19例:微小病变型(MCD)5例,局灶节段硬化性肾小球肾炎(FSGS)8例,膜性肾病(MN)6例,另原发性肾淀粉样变性2例,对照健康自愿者10例。尿podocin分子排泌在正常对照组最低,在增殖性肾小球疾病和非增殖性肾小球疾病间差异无统计学意义(P>0.05),增殖性肾小球疾病尿podocin排泌高于肾淀粉样变性患者(P<0.05)。新月体肾炎的尿podocin排泌显著高于其他肾小球疾病(P<0.05),后依次FSGS,IgA肾病,狼疮性肾炎,MN,IgM肾病,MCD;尿沉渣podocalyxin排泌在正常对照组最低,而增殖性肾小球肾炎和非增殖性肾小球肾炎间差异无统计学意义(P>0.05)。新月体肾炎尿podocalyxin排泄量最高,其后依次为FSGS,IgA肾病,MN,狼疮性肾炎,MCD,IgM肾病,以肾淀粉样变性最低。尿podocalyxin与podocin呈正相关,尿podocin与血C3呈负相关。结论:ELISA法检测尿沉渣足细胞分子检测可对肾小球疾病患者的肾病理类型提供参考,以正常人尿podocin,podocalyxin排泌最少,增殖性肾小球疾病和非增殖性肾小球疾病间差异无统计学意义,新月体性肾炎尿沉渣podocin及Podocalyxin高于其他疾病患者,FSGS患者的尿沉渣podocin及Podocalyxin排泌量也较多,肾淀粉样变性患者的尿沉渣podocin及Podocalyxin最低,血清C3与尿podocin的排泌呈负相关。

青藤碱对Heymann肾炎大鼠足细胞损伤的干预作用及机制研究

目的探讨青藤碱对Heymann肾炎大鼠足细胞损伤的干预作用及机制。方法采用往大鼠尾静脉注射0.4 ml/100 g体重羊抗大鼠Fx1A血清的方法建立被动型Heymann肾炎(PHN)大鼠模型,随机分为6组,每组17只。青藤碱低、中、高(20、40、60 mg/kg体重)剂量组(青藤碱干预组)予腹腔注射青藤碱注射液,雷米普利组(5 mg/kg体重)予雷米普利混悬液灌胃,模型组和对照组按雷米普利组等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。给药第10、20、30天末收集大鼠尿液,腹主动脉取血后,每组分别在第10、20天处死5只大鼠,第30天全部处死,测定24 h尿蛋白水平,检测血常规、血生化;处死后剥取肾脏组织,行免疫病理学检查。结果与模型组及对照组相比,青藤碱干预组的24 h尿蛋白水平降低(均P<0.05),且呈青藤碱高剂量组<青藤碱中剂量组<青藤碱低剂量组的趋势;青藤碱干预组的血清白蛋白水平,肾脏组织podocin、nephrin阳性区平均积分光密度均升高(均P<0.05),且呈青藤碱高剂量组>青藤碱中剂量组>青藤碱低剂量组的趋势;青藤碱低、中、高剂量组的血清肌酐、WBC、ALT、AST及IgG阳性区平均积分光密度比较均无统计学差异(均P>0.05)。结论青藤碱可呈剂量依赖性减少PHN大鼠尿蛋白排泄,但不能减少PHN大鼠肾脏组织IgG沉积。青藤碱或通过上调PHN大鼠肾脏组织podocin、nephrin表达,修复足细胞损伤,且对肝功能及骨髓无明显不良影响。

采用超敏C反应蛋白评估显微镜下多血管炎预后的临床研究

目的:探讨超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)病情及预后的影响。方法:以2008年6月23日~2017年1月20日共149例MPA患者为研究对象,收集患者人口学特征、实验室指标、病理资料等,并按照hs-CRP的中位数分组,以中位数7.05为界点,大于中位数者为高hs-CRP组,小于等于中位数者为低hs-CRP组,比较两组患者的临床特征及其预后。结果:高hs-CRP组患者基线新月体型MPA患者比例显著高于低hs-CRP组,硬化型比例低于低hs-CRP组,高hs-CRP组患者到达终点事件(全因死亡,肾替代治疗)显著高于低hs-CRP组,经多因素Cox回归分析表明hs-CRP水平及肾间质炎细胞浸润是MPA患者发生终点事件的独立危险因素。结论:血清hs-CRP水平是MPA患者预后不良的危险因素,提示血清hs-CRP可作为MPA患者评估病情及预后指标。

防己黄芪汤对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及足细胞病变的影响

目的:探讨防己黄芪汤对蛋白尿及其发生原因——足细胞病变的影响。方法:采用阿霉素肾病大鼠造成肾病综合征模型,以防己黄芪汤、2倍剂量防己黄芪汤、防己黄芪去甘草汤灌胃。于14d、28d、42d测24h尿蛋白定量;实验42d取血、取肾,检测血生化,观察肾组织病理改变,免疫组织化学法、Western-blotting、RT-PCR检测肾组织nephrin、podocin蛋白及基因水平。结果:模型组大鼠蛋白尿明显增加,伴血Alb下降;与模型组比较,防己黄芪汤组大鼠尿蛋白定量在实验14d、28d、42d明显减少。2倍剂量防己黄芪汤组、防己黄芪去甘草汤组大鼠尿蛋白定量在42d明显减少。模型组大鼠nephrin蛋白表达上调,药物干预后表达明显下降;模型组podocin蛋白和基因表达下调,药物干预后表达明显增加。结论:防己黄芪汤明显改善阿霉素肾病大鼠蛋白尿,这可能与其对足细胞关键结构nephrin、podocin表达的调节有关。

复方积雪草有效组分干预肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的实验研究

目的:探讨复方积雪草有效组分-积雪草苷/大黄素干预肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的小鼠肾小管上皮细胞(mTEC)Toll样受体4(TLR4)mRNA及蛋白的表达水平。方法:采用mTEC,模型组用TNF-α5ng/mL诱导,治疗组在TNF-α诱导的同时,以不同浓度的积雪草苷合大黄素进行干预,于24h后分别提取细胞RNA及上清,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM)分别检测mTECTLR4 mRNA和膜蛋白的表达。结果:正常mTEC具有TLR4 mRNA和蛋白表达,经TNF-α诱导后TLR4表达明显上调,当积雪草苷合大黄素干预浓度达4μg/mL+0.4μg/mL时,能够抑制TLR4 mRNA及蛋白的表达水平。结论:复方积雪草有效组分能够抑制TNF-α上调所致的肾小管上皮细胞TLR4过度表达,从而缓解肾脏局部失控性炎症反应。

复方积雪草胶囊对肾小球硬化症大鼠肾组织细胞外基质的影响

目的探讨复方积雪草胶囊对局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的影响。方法建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠FSGS模型,采用半定量病理分析法观察复方积雪草胶囊对肾组织ECM的影响,并生化检测尿蛋白、血脂、肾功能的变化。结果FSGS大鼠经复方积雪草胶囊治疗8周后,肾组织ECM积聚减少(P<0.01),血脂、肌酐、尿素氮和尿蛋白较模型组明显降低(P<0.05～0.01),疗效优于尿毒清组。结论复方积雪草胶囊可以抑制肾组织ECM积聚,改善肾功能,防治肾纤维化。

低剂量甲基强的松龙诱导淋巴细胞糖皮质激素耐药与P-糖蛋白关系的研究

目的研究低剂量甲基强的松龙(糖皮质激素)诱导淋巴细胞糖皮质激素耐药与P-糖蛋白的关系。方法取健康人外周血,分离纯化淋巴细胞,予小剂量(2μg·mL-1)甲基强的松龙刺激72h为耐药组,对照组常规培养;用流式细胞术检测P-gp表达;MTT法检测激素耐药倍数;甲基强的松龙(200μg.mL-1)刺激2组细胞24h,用流式细胞术检测AnnexinⅤ(%)并分析P-gp与其相关性;耐药组,用5μg·mL-1维拉帕米联合甲基强的松龙(200μg·mL-1)刺激,检测AnnexinⅤ(%)。结果小剂量甲基强的松龙诱导后的淋巴细胞P-gp表达,耐药组较对照组显著升高,为对照组的(2.89±0.21)倍;甲基强的松龙刺激后,耐药组细胞凋亡率显著低于正常组,与AnnexinⅤ呈显著负相关;维拉帕米干预可显著增加甲基强的松龙诱导细胞凋亡的敏感性。结论 P-gp介导耐药可能是导致临床治疗后期的耐药或药物依赖的重要机制之一。

MiR-30c-2-3p对足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素干预作用研究

目的:探讨miR-30c-2-3p对小鼠足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素(TP)干预作用。方法:采用嘌呤霉素(PAN)致小鼠足细胞损伤的体外模型,将足细胞分成5组:空白组、转染阴性质粒组(阴性质粒组)、转染阴性质粒+PAN组(阴性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN组(阳性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN+TP组(阳性质粒+PAN+TP组)。瞬时转染miR-30c-2-3p mimics,质粒终浓度均为50 nmol/L,转染6 h后进行药物干预,PAN干预浓度均为45 mg/L,TP干预浓度均为1 ng/ml,药物干预时间均为48 h。CCK-8法检测足细胞活力;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-30c-2-3p表达;Western Blot检测足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达。结果:(1)阴性质粒+PAN组足细胞活力明显低于空白组及阴性质粒组(P<0.01),阳性质粒+PAN组较阴性质粒+PAN组足细胞活力提高(P<0.05),使用TP干预后其活力进一步提高(P<0.05)。(2)与空白组、阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组miR-30c-2-3p表达减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN+TP组miR-30c-2-3p表达均增加(P<0.05);但与阳性质粒+PAN组相比,雷公藤甲素干预组未见统计学意义(P>0.05)。(3)与空白组及阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组Nephrin、Podocin两者表达均减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组Nephrin、Podocin蛋白表达增加(P<0.05);在使用了TP干预后两者表达进一步增加(P<0.05)。结论:PAN能降低足细胞活力,降低miR-30c-2-3p表达,而增加其表达可以上调足细胞活力以及Nephrin、Podocin的表达。TP可以减轻PAN诱导的足细胞损伤以及Nephrin、Podocin的表达下降,但其作用机制似乎与miR-30c-2-3p无关。

肾性血尿中医分型与尿液炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1表达和肾脏免疫病理的相关性研究

目的：探索尿液炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）表达与肾性血尿中医分型的相关性。方法：收集原发性单纯性血尿（肉眼或镜下血尿且24 h尿蛋白定量〈1.0 g）或血尿伴蛋白尿（24 h尿蛋白定量〈3.5 g）的行肾穿刺的患者,排除继发性、遗传性及其他非肾小球来源的血尿患者共237例,通过中医症候辨证分型,将其分为气阴两虚型80例,风湿内扰型59例,脉络瘀阻型98例,并设40例正常对照;采用酶联免疫吸附剂测定法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测患者尿液炎症因子IL-6、TNF-α和MCP-1表达,通过免疫荧光检测肾脏组织病理改变。结果：气阴两虚型、风湿内扰型和脉络瘀阻型之间,尿液的IL-6、TNF-α和MCP-1浓度差异存在统计学意义,以风湿内扰型尿液的IL-6、TNF-α和MCP-1浓度最高（P〈0.05-0.01）;气阴两虚型、风湿内扰型和脉络瘀阻型不同中医证型与肾脏免疫病理存在相关性,气阴两虚型肾脏Ig A、Ig G和Ig M表达最低,Ig A和Ig M表达差异有统计学意义（P〈0.05-0.01）,IgG表达差异无统计学意义（P〉0.05）;肾脏补体C_3、C1q和Fib亦以气阴两虚型表达最低,其中C3和C1q表达差异有统计学意义（P〈0.05-0.01）,Fib表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：肾性血尿中医辨证分型之气阴两虚型、风湿内扰型和脉络瘀阻型,各型尿液中IL-6、TNF-α和MCP-1浓度差异存在统计学意义,肾脏免疫病理的IgA、IgG、IgM和补体C3、C1q表达亦不尽相同,该类生物标志物是中医辨证论治的物质基础的补充。

基于Voronoi图法的移动机器人路径规划

研究了一种在随机静态环境条件下移动机器人的路径规划方法.在环境地图信息的基础上,运用Voronoi图理论,建立了移动机器人运行的无碰撞路径网络.按特定的算法将给定的移动机器人起始点和目标点连入该路径网络,然后采用Dijkstra最短路径搜索算法,找出一条从起点到终点的最短路径.最后控制机器人沿着找到的最短路径运行到目标点位置,实现移动机器人的智能避障.整个系统以TI公司生产的TMS320LF2407A型号数字信号处理器(DSP)为控制器的核心.

基于DSP的半自主移动机器人远程控制系统

介绍自行开发的半自主远程控制移动机器人系统的软硬件设计方案。以TI公司TMS320LF2407A型号的DSP芯片为机器人小车控制器核心,重点阐述系统定位模块、图像采集模块及无线数据传输模块等,并给出PC机和DSP之间的数据传输协议以及实验结果。

尿转化生长因子-β_1及Ⅳ型胶原与肾内微型癥积的相关性研究

目的:通过无创检测方法早期发现肾内微型癥积。方法:对98例肾活检的患者进行中医辨证分型;检测血/尿TGF-β1、尿ColⅣ、Scr、Ccr、24h尿蛋白排泄;对肾组织运用CMIAS计算机病理图像分析系统作半定量测定;观察尿TGF-β1、ColⅣ水平,与肾硬化程度、中医辨证间的相关性。结果:(1)肾病患者尿TGF-β1、ColⅣ明显高于健康人(P<0.01)。(2)尿TGF-β1、ColⅣ与肾小球基质基底膜面密度、肾间质纤维化程度、间质浸润细胞数呈正相关(P<0.05),与尿ColⅣ呈负相关(P<0.05)。随着硬化程度加重尿TGF-β1、ColⅣ水平逐级增高。(3)尿TGF-β1、ColⅣ分别与Scr正相关,与Ccr负相关(P<0.01);与血TGF-β1、24h尿蛋白定量无关。(4)在轻度肾硬化组,Scr和Ccr尚正常时尿TGF-β1、ColⅣ已高于正常组(P<0.01),尿ColⅣ敏感程度要高于尿TGF-β1和Ccr。(5)98例肾脏病患者的中医辨证以脾肾气虚型为主,占66.3%,以传统"四诊"辨为兼瘀血证者仅占8例(8.16%),肾硬化均属于重度,肾功能已减退,尿TGF-β1、ColⅣ水平显著高于无瘀血证者。结论:尿TGF-β1、ColⅣ能早于Scr和Ccr的异常反映肾硬化及硬化程度,不受血TGF-β1和24h尿蛋白定量的影响,可以作为监测肾硬化及其进展的一项无创性早期标志性指标,以尿ColⅣ更为敏感;同时揭示肾微癥积的病因为正虚邪郁,中医传统的宏观辨证加上微观辨证可明显提高辨证的准确性,尿TGF-β1、ColⅣ可以作为中医微观辨证的一项量化指标早期诊断肾内微癥积,监测病情的动态变化,指导早期应用消癥散积中药防治肾硬化。

苯那普利对FSGS大鼠肾组织细胞外基质影响

目的探讨苯那普利对局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的影响。方法建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠FSGS模型,经苯那普利进行灌胃治疗8周,然后采用半定量病理分析苯那普利对肾组织ECM影响,以及生化检测尿蛋白、血脂、肾功能变化。结果FSGS大鼠经苯那普利治疗后,肾组织ECM积聚减少(P<0.01),血脂、肌酐、尿素氮和尿蛋白较模型组降低(P<0.05-0.01)。结论苯那普利可以抑制肾组织ECM积聚,改善肾功能,防治肾纤维化。