四川省16家大型禽类养殖场抗生素残留调查和细菌耐药性分析

为评估禽类养殖场粪便中抗生素的残留及细菌耐药性情况,本研究以四川省16家大型规模化禽类养殖场为监测点,重点分析粪便中抗生素残留特征和肠杆菌耐药特征,并对粪便中抗生素的选择性耐药风险熵进行评估。16份粪便样品中共检出18种抗生素,抗生素检出浓度0.54~2780.00μg·kg^(−1),其中,ZJZX中多西环素检出浓度最高,达到2780.00μg·kg^(−1);抗生素的选择性耐药风险熵为0.0040~10561.13,呈现出高选择性耐药风险;其次,从粪便中共筛选鉴定出14株肠杆菌科Enterobacteriaceae细菌,均表现出多重耐药性,且有33种耐药基因被不同程度检出。畜禽粪便中磺胺类、四环素类、氯霉素类和喹诺酮类抗生素残留较为严重,且养殖环境中肠杆菌科细菌表现出多重耐药性,建议有关部门加强畜禽养殖中多西环素、氟苯尼考和恩诺沙星等抗生素的管控,同时应加强对畜禽养殖企业中肠杆菌耐药性的监控。

沱江流域水体抗生素残留对微生物多样性的影响及生态风险评估

为调查评估沱江流域水体中抗生素残留水平和生态风险,并探究抗生素对微生物群落结构和多样性的影响。以沱江流域6个国级/省级水环境质量监测点为采样点,分析水体抗生素浓度,评估环境风险,并研究残留抗生素与微生物群落结构之间的相关性。结果显示,沱江流域水体中抗生素检出浓度在0.71~177.98 ng/L,这可能与城市生活废水与养殖企业废水的排放有关,中下游区域抗生素的检出浓度远高于上游区域。6个监测点位中有4个处于高风险等级。高通量测序结果显示,Shannon指数、Simpson指数和Chao1等微生物多样性指数在中游最高,下游最低;变形菌门、拟杆菌门和放线菌门是水体中优势细菌种群,在SHM监测点中种群丰度占比高达92.72%。水体中部分抗生素种类与水体微生物种群分布相关性显著,微生物群落结构受残留抗生素影响。

基于人脸特征识别技术的ATM防盗取软件设计与实现

近几年,银行ATM机屡次发生他人盗取持卡人现金的问题,如何有效防止ATM机盗取事件发生,成为民众关注的热点。利用人脸识别技术,设计一套ATM机防盗取软件。当ATM机软件识别到当前取款人的面部主要特征与插卡人发生变化时,自动没收银行卡,并终止当前业务操作。测试结果表明该软件能够准确识别人脸特征。

附子内生放线菌EA12432抗真菌次级代谢产物研究

目的对一株分离自四川江油附子的放线菌EAl2432，研究其产生的抗真菌次级代谢产物。方法采用多相分类方法对菌株进行鉴定；采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析和制备型HPLC分离获得活性单体，通过紫外可见光谱、质谱和核磁共振谱测定分析及天然产物数据库检索，对化合物进行结构确证；采用微量液体稀释法对化合物进行抗烟曲霉、抗白色念珠菌和抗新型隐球菌的活性测定。结果鉴定内生菌EAl2432为白长链霉菌，其发酵产物中分离获得5个次级代谢产物，其结构分别与文献报道的SF2738A、B、C、D及F同质。化合物1、2和4具有较强抗真菌活性，其IC90值的范围为1．74—57．92μmol／L。结论首次报道了从江油附子样本中分离出内生白长链霉菌EAl2432，其产生5个2，2’-联吡啶类已知化合物，化合物4（SF2738D）具有中等强度的抗真菌活性。

基于页面敏感特征的金融类钓鱼网页检测方法

提出一种基于页面敏感特征的金融类钓鱼网页检测方法,通过获取网页超文本标记语言特定标签中的文本信息,利用适合中文的多模式匹配算法(AC_SC,AC suitable for Chinese)匹配出敏感文本条数,计算出敏感文本特征值;定位截取网页的logo图像,采用PCA-SIFT算法提取图像特征,并与预先建立的网页logo图像库进行匹配,计算出logo图像相似度;基于文本特征值和图像相似度实现对金融类钓鱼网页的判定。实验结果表明,该方法具有很强的针对性和时效性,并能取得不低于97%的召回率。

基于SVM的木马流量特征检测方法

针对木马能以隐蔽的方式盗取用户敏感信息、文件资源或远程监控用户行为,对网络安全构成极大威胁,提出一种基于流量特征的木马检测方法,通过统计分析服务器端口有序性、服务器使用客户端端口号、客户端发包数、服务器端发包数等特征,使用支持向量机(support vector machine,SVM)算法进行分类训练并建立基于流量的木马监测模型;基于流量特征的普遍性和通用性,该方法对于未知木马也比较有效。仿真测试结果表明,所提出方法具备对常见木马或未知木马的良好检测能力,实验条件下盲检测准确率可达96.61%。

早期应用踝足矫形器进行康复训练治疗脑卒中患者偏瘫步态的临床效果

目的:分析佩戴踝足矫形器(AFO)进行康复训练对脑卒中患者偏瘫步态的临床效果。方法:选取2021年5月—2022年12月于北流市人民医院康复科就诊治疗的脑卒中偏瘫步态患者80例为研究对象,按区间随机法分为对照组与试验组,各40例。试验组佩戴AFO进行康复训练,对照组康复训练计划与试验组基本相同,但是患者接受康复训练期间不佩戴AFO。比较两组治疗前后步长、步频、步速及下肢功能评分变化情况。结果:治疗后,试验组步长、步频、步速均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);治疗后,试验组患者下肢功能评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:脑卒中偏瘫步态患者佩戴AFO进行康复训练可显著改善步行功能,纠正异常步态,同时可提升患者日常生活能力,值得在临床中应用。

D-环丝氨酸抑制铜绿假单胞菌群体感应活性研究

目的以铜绿假单胞菌模式菌株PAO1为研究对象,研究抗结核药物D-环丝氨酸通过靶向抑制病原菌群体感应(quorum-sensing,QS)系统实现抑制病原菌毒力发挥的新应用潜力。方法用不同浓度的D-环丝氨酸处理铜绿假单胞菌,通过系列表型实验结合荧光定量PCR以评估D-环丝氨酸对群体感应所调节的毒力因子和相应基因表达的影响,并利用秀丽隐杆线虫感染模型评估D-环丝氨酸对铜绿假单胞菌毒力抑制的体内活性。结果 D-环丝氨酸表现出良好的铜绿假单胞菌生物膜、绿脓菌素以及蛋白水解酶抑制活性,显著抑制了QS系统调控基因和下游功能基因的表达,并且可以显著提高秀丽隐杆线虫在铜绿假单胞菌感染过程的存活率。结论 D-环丝氨酸可以有效抑制铜绿假单胞菌群体感应系统,有望开发成功的抗生素替代药物。

前体物质对Glarea lozoyensis发酵产生纽莫康定B_0的影响（英文）

纽莫康定B_0是棘白菌素类化合物,其半合成衍生物卡泊芬净已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗无效或无法耐受其他抗真菌药的患者的侵袭性曲霉病。然而,通过发酵产生的纽莫康定B_0的效价较低,限制了卡泊芬净的工业生产。本研究将优化好的的培养基进行了改良,添加了4种前体物质。研究结果表明,大豆油、亮氨酸、异丁醇和甲硫氨酸显著影响发酵单位;进一步的正交试验结果表明,大豆油(A)对纽莫康定B_0效价的影响极显著(P<0.05),亮氨酸(B)、异丁醇(C)和甲硫氨酸(D)影响次之,最优发酵条件为A2B2C3D2即大豆油6.0g/L,亮氨酸1.0g/L,异丁醇4.0ml/L,甲硫氨酸0.3g/L时,纽莫康定B_0发酵单位达到1295mg/L左右。此外,还应用正交试验验证各因素的显着性。当将kLa作为指导参数,使用A315型叶轮的100L发酵罐进行放大和工业规模生产时,与原始效价相比,纽莫康定B_0产量增加了361%,并达到了2250mg/m L的水平。

林麝化脓病病原菌化脓隐秘杆菌与铜绿假单胞菌互作机制研究

化脓隐秘杆菌Trueperella pyogenes是我国Ⅰ级重点保护野生动物林麝Moschus berezovskii的化脓病原发病原菌,但在化脓病后期的病灶中常能检测到大量铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa。虽然在病灶中能同时分离到这2种病原菌,但是它们的种间关系以及优势菌转换机制很大程度上未知。本研究通过构建多种铜绿假单胞菌群体感应基因敲除菌株并结合平板距离培养实验,探讨了化脓隐秘杆菌与铜绿假单胞菌的种间互作关系。结果发现,野生型铜绿假单胞菌的胞外产物可以显著抑制化脓隐秘杆菌的生长;不同铜绿假单胞菌群体感应关键基因缺失菌株均表现出对化脓隐秘杆菌不同程度的抑制作用,但与单突变菌株相比,lasR和rhlR双突变菌株对化脓隐秘杆菌的抑制作用明显减弱。这些发现表明,铜绿假单胞菌可以通过群体感应系统介导的胞外产物来提高对化脓隐秘杆菌的竞争优势。因此,本研究为林麝化脓病过程中的优势病原菌的替换和病情恶化甚至死亡提供了合理的解释,也有助于进一步提高对林麝化脓病病理的认识、治疗方案的改进和新型抗感染药物的研发。

基于SVM的金融类钓鱼网页检测方法

针对金融服务领域面临的严峻信息安全挑战,以及现有钓鱼网页检测方法的不足,提出一种基于支持向量机(support vector machine,SVM)的金融类钓鱼网页检测方法。采用网页渲染去除常见的页面特征伪装,提取统一资源定位符(uniform resource locator,URL)信息特征、页面文本特征、页面表单特征以及页面logo图像特征,构建特征向量训练SVM分类器模型,实现对金融类钓鱼网页的识别。在特征提取过程中,利用适合中文的多模式匹配算法AC_SC(AC suitable for chinese)提高文本匹配效率,并采用加速鲁棒特征(speeded-up robust feature,SURF)算法实现logo图像的特征提取与匹配。多方法实验结果对比表明,该方法针对性更强,能达到99.1%的检测准确率、低于0.86%的误报率。

非达霉素产生菌氮离子注入诱变及其发酵培养基优化

目的通过氮离子注入对游动放线菌(Actinoplanes deccanensis)SIIA-A2098进行诱变、筛选高产突变株,并采用响应面法对突变株的发酵培养基进行优化,以提高非达霉素产量。方法采用多剂量氮离子注入对菌株SIIA-A2098进行诱变选育高产突变株。采用Plackett-Burman设计法筛选出影响突变株发酵的显著因素,然后采用CDD设计法分析优化显著影响因素参数。结果与结论氮离子注入得到非达霉素高产突变株SIIA M3510,产量为92.8μg/m L,是野生型菌株产量(11.5μg/m L)的8倍。Plackett-Burman设计法筛选出3个显著影响因素为葡萄糖、鱼粉蛋白胨和豆油,响应面法优化出它们的最佳数值分别为2.919%、0.644%和1.078%。在此优化条件下,摇瓶非达霉素发酵产量达到约244.75μg/m L,较优化前提高40.04%。

四川抗生素制药企业废水抗生素残留特征与风险评估

为评估制药企业废水处理系统对抗生素的去除效果及残留抗生素的潜在选择性耐药风险,本研究选取四川省内20家制药企业为研究对象,采用固相萃取-高效液相色谱法对制药废水中残留抗生素进行检测;通过比较废水处理系统进水口和排水口的抗生素浓度,评估废水处理系统对抗生素的去除效果;结合风险熵对残留抗生素的潜在选择性耐药风险进行评估。制药废水中抗生素残留浓度普遍较高;大部分制药企业现有废水处理系统对残留抗生素去除效果不理想;17家制药企业排口抗生素选择性耐药风险处于高风险水平。制药企业废水处理系统对抗生素的处理效果普遍较差,建议制药企业改进其废水处理系统工艺。

Paraglaciecola hydrolytica中新型β-琼胶酶Aga2的异源表达及酶学性质分析

琼胶寡糖具有抗氧化、抗肿瘤和调节肠道菌群等多种生物活性,而微生物来源的琼胶酶是酶法制备琼胶寡糖的重要工具酶。目前报道的琼胶酶数量较少,而具有优良酶学特性的琼胶酶数量更少,极大阻碍了酶法制备琼胶寡糖的工艺开发进程。因此有必要发掘更多微生物来源的新颖琼胶酶。从副居冰菌属Paraglaciecola hydrolytica细菌基因组中挖掘到一个新颖琼胶酶基因aga2,构建至表达载体pET28a(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;通过镍金属亲和层析纯化蛋白并探究温度、pH、金属离子、NaCl浓度对Aga2活性的影响;采用^(13)C核磁共振、薄层色谱和基质辅助激光解吸飞行时间质谱分析酶解产物。Aga2与已知琼胶酶的最高相似度为53.7%。同时Aga2在IPTG(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside)浓度为90μmol/L,20℃下诱导9 h时,可溶性表达量最高。纯化的Aga2最适反应温度为50℃,且40℃孵育3 h后仍保持72.9%的相对酶活力,具有较好的温度稳定性。Aga2的最适pH为6.0,在不同pH(4-9)下放置5 h后,仍保持62.6%以上的相对酶活力,具有较好的pH稳定性。Aga2在NaCl浓度为2.5 mol/L时仍保持78%的相对酶活力,具有较强的盐耐受性。同时Aga2对Ni^(2+)、Ca^(2+)、Ba^(2+)、K^(+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、EDTA、DTT、Urea、SDS、TritionX-100有耐受性。薄层色谱结果表明,该酶属于内切型β琼胶酶,产物为新琼四糖和新琼六糖。Aga2具有温度和pH稳定性、盐耐受性和重金属离子耐受性,具有良好的工业应用前景。

内生真菌SIIA-F13642产生的抗真菌次级代谢产物研究

目的研究植物内生真菌SIIA-F13642产生的抗真菌次级代谢产物。方法基于r DNA-ITS序列对菌株进行分子分类学鉴定;采用乙酸乙酯萃取、C_(18)硅胶柱层析和制备型HPLC分离目标化合物;采用波谱学数据解析其结构。结果鉴定SIIA-F13642为地杨梅粘鞭霉(Gliomastix luzulae(Fuckel)E.W.Mason ex S.Hughes),产生3个主要的已知抗真菌化合物virescenoside A,virescenoside B和[Thr^2,Leu^5,Ala^(10)]Cyclosporin,抗新型隐球菌SIA1017的MIC值分别为0.2、0.78和0.78mg/m L。结论地杨梅粘鞭霉SIIA-F13642产生3个主要次级代谢产物virescenoside B(1)、virescenoside A(2)和[Thr^2,Leu^5,Ala^(10)]Cyclosporin(3),具有抗新型隐球菌的活性。

橄榄链霉菌CD5872产越霉素A的研究

目的放线菌CD5872的分类鉴定及其活性次级代谢产物的研究。方法采用多相分类技术对菌株CD5872进行初步鉴定;菌株发酵液通过离子交换树脂和硅胶柱层析技术分离获得单体化合物CD-1。根据高分辨质谱、核磁共振谱图、天然产物数据库检索和高效液相分析确定活性化合物的结构。结果该菌株为橄榄网状链霉菌(Streptomyces olivoreticuli),化合物CD-1为越霉素A(destomycin A)。结论首次报道越霉素A的新产生菌,具有工业化开发价值。

生姜内生链霉菌SIIA-H10156产生的热休克蛋白90抑制剂的研究

目的对具有热休克蛋白90抑制活性的生姜内生链霉菌株SIIA-H10156进行分类鉴定及活性化学成分研究。方法采用多相分类技术鉴定活性菌株。菌株发酵液经有机溶剂萃取和制备型HPLC反相色谱分离获得两个单体,通过紫外光谱、质谱和核磁共振谱的测定及天然产物数据库检索,确证化合物结构,并采用高通量荧光偏振检测法测定化合物的热休克蛋白90结合活性。结果与结论马来西亚链霉菌SIIA-H10156产生两个苯酚安莎菌素类化合物autolytimycin和reblastatin,其与热休克蛋白90的亲和力是17-烯丙基-17-去甲氧基格尔德霉素的3倍。

α-生育酚琥珀酸酯的酶法合成研究进展

酶法合成具有反应条件温和、选择性高及环境友好等特点,为制备高质量的α-生育酚琥珀酸酯提供了一条新途径。本文首先概述了酶法合成α-生育酚琥珀酸酯的催化剂及其催化机制,重点介绍了酶催化合成α-生育酚琥珀酸酯的研究成果,讨论了酶催化合成α-生育酚琥珀酸酯研究中的若干问题,最后展望了酶催化合成α-生育酚琥珀酸酯的发展前景。

抗焦虑药(RS)/(S)-恩西拉嗪的合成研究

概述抗焦虑药(RS)-恩西拉嗪的合成路线,并进一步介绍(S)-恩西拉嗪的的合成,旨在为解决恩西拉嗪合成反应过程中的立体选择性问题提供参考。

R软件在医学统计学教学中的探索与应用

医学统计学需是一门需要理论和实践有机结合的课程。因为课程知识点多、内容枯燥、和理解难度大的原因,教授过程中,学生学习积极性不高,教授完成后,学生不知道如何应用,因此教学效果差、教授难度大。近年来,研究者发现统计学分析软件与医学统计学有机结合,可以促进学生理解知识点,提高教学效果。因此本研究将着重介绍R软件在医学统计学中的应用,从数据导入、基本统计学参数计算和正态分布调查等方面,展示R软件如何与医学统计学课程有机结合。