高氧对香蕉果实采后生理的影响

【目的】研究高氧处理对香蕉果实采后腺苷酸库、能荷的影响及探讨高氧对其成熟、衰老的作用机制。【方法】在100%、60%、40%和21%O24种不同氧浓度条件下,检测香蕉果实采后色泽、硬度、呼吸速率、乙烯释放量、细胞膜透性、腺苷酸库和能荷的变化。【结果】高氧促进了采后香蕉果皮的转黄、果实的软化、呼吸高峰和乙烯释放高峰的提前出现、呼吸作用的增强和细胞膜的渗透性增大。另外,采后香蕉在贮藏过程中,ATP、ADP的含量和能荷出现最高峰值,而AMP含量则出现最低峰值。经100%、60%O2处理后果实的ATP含量和能荷在第4天达到最高峰值(分别约25、15nmol·g-1FW和0.48、0.35),在第8天迅速下降,果实的AMP含量在第4天则达到最低峰值;而40%O2处理后果实的ATP含量和能荷在第8天达到最高峰值(11.5nmol·g-1FW和0.42),在第16天迅速下降,果实的AMP含量在第12天达到最低峰值。【结论】高氧处理显著降低了采后香蕉果实组织的腺苷酸库的量和能荷值,增强了呼吸作用,并促进果实成熟、衰老。因此,该处理不适合采后香蕉果实的贮运保鲜。

香蕉束顶病毒复制酶基因克隆及转基因表达

以广州市郊获得的香蕉束顶病毒(BBTV)的DNA为模板,进行PCR扩增得到香蕉束顶病毒复制酶基因的1.1kbDNA。所获得的DNA序列与澳大利亚的BBTV序列的同源性达90%,这部分序列编码香蕉束顶病毒复制酶基因的羧基端。将改造的BBTV复制酶基因克隆到pBI121的CaMV35S和NOS终止序列之间,构建表达载体,并采用基因枪轰击香蕉试管苗生长点组织的方法,经PCR检测和Westernblot分析,获得4株具有BBTV复制酶基因整合表达的T0代转基因香蕉。转基因植株的抗病性正在检测之中。

香蕉花蕊中生物碱对糖尿病小鼠的降糖作用

本文主要研究香蕉花蕊中生物碱对糖尿病小鼠的降糖作用。香蕉花蕊经粉碎、醇提、酸水提、碱化后再用氯仿提取得到总生物碱。将上面得到的生物碱分三个不同浓度灌胃喂养四氧嘧啶糖尿病造模小鼠后测定其第3、7、12天空腹血糖的变化情况,结果显示生物碱浓度越大,其降糖效果越好。

旋扭山绿豆快生型根瘤菌不结瘤突变株的分离

旋扭山绿豆快生型根瘤菌D1202菌株在吖啶橙(20ug/ml,30μg/ml)的作用下(28℃培养7天),可以诱发不结瘤Nod^-突变株。从单菌落结瘤试验表明,Nod^-突变个体占群体数的10—20%。随机挑取的未经吖啶橙处理的20个单菌落的回接试验,旋扭山绿豆植物能正常地结瘤固氮。说明控制结瘤作用的基因对吖啶橙处理敏感。

旋扭山绿豆快生型根瘤菌高度抗碱及共生固氮

从旋扭山绿豆根瘤中分离得到快生型根瘤菌。该菌株的时/代为3.85h,高度抗碱,略耐盐;能利用供试的所有双糖和单糖,在BTB反应中培养基由乳黄色变黄色;不产生3-酮基乳糖,表明并非根癌农杆菌。快生型菌株抗原性比慢生型菌株强,共生效应的固氮酶活性比慢生型菌株差。

广州香蕉束顶病毒分离和核酸鉴定

经液氮冷冻、差速离心和蔗糖密度梯度离心，从广州地区香蕉束顶病株中获得大小为２５ｎｍ的病毒颗粒。该病毒与香蕉束顶病毒单克隆免抗血清呈阳性反应，该病毒核酸可被Ｄｎａｓｅ和Ｓ１核酸酶降解，但不能被ＲＮａｓｅ降解，属于ｓｓＤＮＡ；分子量大小约为１１６５碱基。

酿酒酵母原生质体融合的研究

本实验通过酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)营养缺陷型菌株H802-9A(a ade^-his^7 cys^2 tyr^1)和H802-3 A(a ade^- cra^1)进行原生质体融合,获得营养互补的重组融合子,选择两亲株的对数生长早期细胞(2-4×10~7个/m1),在0.1％β-琉基乙醇及1-2％蜗牛酶的作用下,原生质体形成率达99-100％,在35％聚乙二醇(MW6000)-10mMCaC1溶液的作用下,可获得融合率为2.6×10^(-6)-2.1×10^(-7)的杂合子,自发回复突变率1.5-7×10^(-9)。

香蕉束顶病感染及抗病试验

研究香蕉束顶病病原感染健康蕉苗对香蕉束顶病病原的抗病性．初步结果表明香蕉束顶病病原可通过香蕉交脉蚜、伤口接触、土壤三种途径感染健康蕉苗，经过多糖处理的蕉苗对香蕉束顶病具较高的抗性，其次是青霉素，而用中药：路边菊、田基黄、半边莲等处理的蕉苗抗病性较弱．

南亚热带森林中种群在群落中地位各测度指标间相关关系初探

本文根据广东省肇庆市鼎湖山自然保护区厚壳桂群落的研究结果，运用ＱＢＡＳＩＣ语言编制运算程序进行相关和回归分析，分析了反映种群在群落中结构、功能地位的各个指标间的相关关系，探讨了易于准确测定、便于大面积南亚热带森林群落调查的综合指标．

时间分辨免疫荧光分析检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)是当前标记免疫分析研究应用领域的热点之一,具有高灵敏性和高特异性,用于生物分子的超微量检测。本研究者在建立一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。方法以Eu-DTTA{N1-(P-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸铕钠}为示踪物,建立了用TRFIA检测乙型肝炎血清学标志物乙型肝炎病毒表面抗原的方法。结果所建立的标准曲线分析范围分别为0.2～300ng/ml,分析灵敏度为0.05ng/ml,检测参考标准品的批内变异系数均小于10%,与免疫放射测定同时定量检测多份血清样本,相关系数高达95%。结论TRFIA分析范围宽,灵敏度高,操作简便,具有优越的定量检测能力,价格适中,十分适合临床推广应用。

抗药标记酿酒酵母菌株间原生质体融合的研究

酵母属中的一些种是生产单细胞蛋白的主要菌株,通过遗传工程选育高赖氨酸酵母有重要的理论意义和价值,采用100mg/ml蜗牛酶制备亲株的原生质体,在35%聚乙二醇(MW6000)的作用下,成功地获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的株间融合重组子,融合频率为10^(-8)-10^(-7),经过五代的移接验证,融合子稳定,融合子抗药性产生叠加效应,个体形态发生了变化,DNA含量加倍,赖氨酸含量有所提高.

酵母原生质体融合的研究

本文报道了酵母原生质体的制备、再生及融合过程.培养亲株对数生长早期的细胞(浓度为2.5×10~7细胞/ml),在1.5-2%蜗牛酶及0.1%β-巯基乙醇的作用下,45-60分钟后,原生质体的形成率可达99-100%,在35%聚乙二醇(分子量为6000)和10mMCaCl_2溶液的作用下进行融合实验,可得融合率为2.6×10^(-6)-2.1×10^(-7),它是自发回复突变率的100-1000倍.

一种适合于富含多糖和酚类物质的香蕉果实RNA提取方法

酚类化合物和多糖是影响香蕉组织RNA提取的几个主要干扰因素。研究通过在裂解液中加入聚乙烯吡咯烷酮去除多酚类化合物和利用水饱和乙醚去除多糖,改进了香蕉果实RNA的提取方法。该方法具有快速、简单等特点。

了哥王挥发油的化学成分分析

用常规水蒸气蒸馏法提取出药用植物了哥王精油,经气相色谱-质谱联机分析,共分离出30多个峰,鉴定出其中37种化合物。挥发油主要成分是十六烷酸、9 十八碳烯酸、9, 12 十八碳二烯酸、9 十六碳烯酸、十五烷酸、十二烷酸、癸酸,其质量分数分别为60 44%、7 13%、5 48%、2 42%、1 21%、0 76%、0 51%,所鉴定的成分占挥发油总质量的77 95 %。

欧蓍草花粉主要过敏原Parj1的重组表达及鉴定

目的:克隆、表达和纯化欧蓍草花粉主要过敏原Par j1。方法:根据Parj1.0102在GenBank中的序列号获得其核苷酸和氨基酸序列,确定开放阅读框,采用DNAstar软件优化密码子,合成全基因,并克隆到表达载体pET-44a中,转化表达宿主大肠杆菌Rosetta,优化蛋白表达条件并进行亲和层析纯化和Western blot鉴定。结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET-44a+/Par j1.0102原核表达质粒。对表达菌表达条件进行优化,最终确定在30℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导4小时时蛋白表达量最高,重组蛋白经亲和层析纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在23 kD处有明显的条带。Western blot表明重组蛋白具有与StrepII标签抗体结合活性。结论:国内首次获得融合StrepII标签的Par j1.0102重组蛋白,为欧蓍草花粉过敏诊断及特异性免疫治疗奠定基础。

时间分辨荧光免疫分析技术研究现状及进展

时间分辨荧光免疫分析是一种新型的超微量的免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,且无放射性污染等。本文主要介绍了时间分辨荧光免疫分析的原理、优点,螯合剂的种类,以及各种分析技术及其应用现状和进展。

果实成熟乙烯相关基因工程研究进展(综述)

果实成熟是一个复杂的生理生化过程,而乙烯是引发果实成熟的主要因素。本文简述乙烯合成过程中S-腺苷甲硫氨酸水解酶、ACC合成酶与ACC氧化酶、ACC脱氨酶基因和乙烯受体突变体的特性及克隆;同时,评述利用基因工程技术控制果实成熟的应用前景。

14个黄皮品种(系)的RAPD分析

对14个黄皮(Clausena lansium)品种(系)进行RAPD分析,从150个随机引物中筛选出16个能在种质间表现出多态性的引物,共扩增出87条谱带,其中多态性带47条,多态性比例为54.0%。结果表明,除龙川无核黄皮、龙山无核黄皮和冰糖黄皮外,其它11个品种(系)间的遗传距离较近(D≤0.1),说明大多数黄皮品种遗传差异较小,亲缘关系较近。UPGMA聚类分析表明,14个黄皮品种(系)在遗传距离0.15处可划分为3个类群,基本反映了黄皮品种间的遗传多样性。

苄基腺嘌呤对小麦幼苗乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶活性的影响

本研究结果表明,用20～140mg/L.的苄基腺嘌呤(BA)喷施小麦幼苗2天后,体内乙醇酸氧化酶活性比对照提高10.78%～64.71%,其正相关系数是r=0.9839,其直线回归方程是Y=0.1007+0.00048X.用20～140mg/L的BA喷施小麦2天后,体内过氧化氢酶活性比对照提高13.62%～24.27%,正相关系数r=0.9015.20～100mg/L的BA处理2天后,蛋白质含量升高14.68%～43.29%.用100mg/L的BA处理幼苗后1～4天内,乙醇酸氧化酶活性升高25.71%～89.52%;过氧化氢酶活性升高12.02%～30.10%.用BA处理离体的乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶,乙醇酸氧化酶活性下降,而过氧化氢酶活性则不受影响.100mg/L的苄基腺嘌呤使DNA和RNA的含量分别升高22.26%和15.82%.500μg/L的放线菌酮使乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶活性分别下降41.03%和24.53%.本文讨论了苄基腺嘌呤影响乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶活性的可能机理.

赤霉素对小麦幼苗乙醇酸氧化酶活性的影响

研究结果表明，３００～１０００ｍｇ／Ｌ的赤霉素处理小麦幼苗后，小麦体内乙醇酸氧化酶活性提高１８．７５％～４３．７５％，正相关系数ｒ＝０．９６５５；５００ｍｇ／Ｌ赤霉素处理后，乙醇酸氧化酶活性变化与处理时间呈正相关，直线回归方程为ｙ＝０．０７９６＋０．００１２３ｘ。３００～１０００ｍｇ／Ｌ的赤霉素处理使小麦蛋白质含量升高１５．１６％～３７．７４％，正相关系数ｒ＝０．９７１４；赤霉素对离体乙醇酸氧化酶活性无影响。