miR-217靶向FOXO3影响非小细胞肺癌对吉非替尼耐药性及相关机制

目的检测miR-217对非小细胞肺癌吉非替尼耐药性的影响,并探讨下游靶基因及相关通路。方法qRT-PCR检测人肺正常上皮细胞系BEAS-2B,NSCLC细胞系A549、HCC827、PC9、NCI-H1975及吉非替尼耐药株PC9/GR中miR-217表达量。选取PC9/GR细胞,利用转染技术构建control组、NC-mimic组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+si-NC组、miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞,CCK8及克隆形成实验检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。Targetscan生物信息学网站预测miR-217下游靶基因,双荧光素酶实验检测miR-217与靶基因FOXO3相关性。结果与BEAS-2B相比,miR-217表达量在A549、HCC827、PC9、NCI-H1975细胞中显著降低(P<0.05),随着吉非替尼培养浓度增加,PC9细胞中miR-217基因表达量逐渐降低(P<0.05),并且miR-217在PC9/GR细胞中的表达低于PC9(P<0.05)。相较于control及NC-mimic组,miR-217 mimic组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),细胞凋亡数量增多(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量降低(P<0.05)。双荧光素酶报告表明FOXO3是miR-217的靶标。回复实验测得,与miR-217 mimic组及miR-217 mimic+si-NC组相比,miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞耐药能力升高(P<0.05),增殖能力显著提升(P<0.05),细胞凋亡数量减少(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量增高(P<0.05)。结论miR-217过表达逆转NSCLC细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药性并抑制PC9/GR细胞增殖加速凋亡,这种机制可能与靶向FOXO3调控PI3K/AKT信号通路相关。

腔内治疗和人工血管搭桥术在治疗股-腘动脉段动脉硬化闭塞症TASCⅡB、C级时的应用及预后

目的比较腔内治疗和人工血管搭桥术两种手术方式治疗股—腘动脉段动脉硬化闭塞症ⅡB、C级的预后情况。方法选择2016年8月—2018年8月在本院血管外科因股-腘动脉段动脉硬化闭塞症ⅡB、C级行手术治疗的患者59例作为研究对象,分为腔内治疗组(39例)和人工血管组(20例)两组,比较分析两组患者术后近期(术后6个月以内)病情好转率、ABI指数恢复情况,以及中远期(1~3年)血管通畅率、肢体存活率。结果腔内治疗组近期好转率为89.74%,人工血管组为70.00%,差异无统计学意义(P>0.05);腔内治疗组术后ABI指数基本或完全恢复(0.80≤ABI≤0.90)的比率为92.31%,人工血管组为75.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。腔内治疗组中远期血管通畅率为94.74%,人工血管组为62.50%(P>0.05);腔内治疗组肢体存活率为93.48%,人工血管组为69.23%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在治疗股-腘动脉段动脉硬化闭塞征ⅡB、C级时,腔内介入和人工血管搭桥在近期都能有效疏通下肢动脉硬化闭塞症患者闭塞血管,而在中远期血管通畅率、保肢率上,介入治疗则有较为明显的优势。