体外表达GLP-1多拷贝的最优条件研究

目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的序列拷贝数及拷贝温度、时间与其体外表达水平的关系。方法:首先将以4拷贝数为单位的GLP-1序列插入到p ET-22b(+)中构建GLP-1多拷贝表达载体,然后将表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白体外培养表达。取不同温度和诱导时间段进行蛋白表达,检测GLP-1在不同条件下的蛋白表达量,优化蛋白最适表达条件。结果:GLP-1多拷贝在BL21菌株中的最佳表达温度为26℃,最适诱导时间为8 h。拷贝数与GLP多拷贝表达量呈负相关性,拷贝数越多,蛋白产量越低。结论:GLP多拷贝最佳体外表达条件为4拷贝,26℃培养IPTG诱导8 h。

成分制备过程实施精细化管理的初体验

血液质量是血站的生命,安全、有效的输血是每个血站人追求的目标,为临床提供安全、优质的血液是成分科承担的重要责任,而成分制备过程环节多、工序复杂,尤其是手工制备过程人为因素较多,所以,成分血制备过程的环节质量控制显得尤为重要,稍有闪失就会酿成大错,因此,成分制备过程实施精细化管理已成当务之急。为此。

制备成分血时血袋破损的原因分析

目的探讨制备成分血时血袋破损原因,以提高制备成分血质量,避免血液浪费。方法采用自行设计血袋破损原因调查表对2013年、2014年、2015年的三年间制备成分血时血袋破损原因进行统计分析,并制定相应预防措施。结果三年共发生血袋破损281袋,其中热合破损占40.20%、离心破损占29.50%、结合破损占5.70%、穿刺破损占24.60%。结论制备成分血时,操作人员必须增强责任心,严格遵守操作规程,不断加强操作技能,避免或减少人为因素造成的血袋破损及血液浪费。

核酸实验室温湿度控制、清洁消毒及防污染措施

核酸检测相对之前采用的酶联免疫吸附测定具有更高的灵敏度特异性,能有效缩短检测"窗口期"以及检测一些变异和隐匿性肝炎,最大限度降低经血传播疾病的风险。为了保证检测结果的有效性,保证工作环境卫生、整洁,符合核酸试验要求,有效预防和控制对工作人员和实验环境造成的感染或污染,核酸实验室温湿度控制、清洁消毒及防污染措施就显得尤为重要。

学科素养理念下小学语文读写结合教学思考

在全面推进小学语文教学改革的过程中,学生读写能力的培养备受瞩目,文章结合小学语文学科素养的具体内容,分析学科素养理念下小学语文读写结合教学现状,针对问题提出教学对策,以期为提升学生的语言组织能力以及口头表达能力提供参考,确保学生能够在阅读过程中积累丰富的写作素材。

新闻编辑过程中让新闻标题更加抢眼

新闻同行常说"题好文一半",新闻标题是新闻内容的门面,一则好的新闻标题能够吸引读者目光,如果新闻标题不吸引人,就算新闻内容再好,恐怕也会失去很多读者,新闻标题是新闻编辑的重要内容。快节奏的生活使新闻标题的作用被扩大,人们在看新闻时首先关注的就是标题,因此,在新闻编辑过程中让新闻标题更加抢眼是促进新闻行业发展的驱动力,然而,在目前激烈的新闻行业竞争下,有些新闻标题逐渐低俗化。本文总结了当前新闻标题制作存在的问题,并提出了如何在新闻编辑过程中使新闻标题更加抢眼。

新闻编辑工作者的必备能力探讨

随着广电行业的快速发展,电视新闻已经成为了大众生活必不可少的一部分,通过电视新闻,百姓足不出户就可了解到与新闻事件相关的具体情况,可以说其与大众的联系非常紧密。但是行业的快速发展,导致新闻节目之间的"争夺战"也非常激烈,因此,若是没有好的创意、新鲜的元素要想在新闻领域创造出优秀的业绩是不可能的。如何吸引观众的眼光,新闻编辑所具有的能力与素养是其中的关键因素。因此,本文就以当前电视新闻之中编辑方面存在的问题作为文章的切入点,对当代新闻编辑应该具备的一些基本能力进行一下细致的分析。

谈谈高层建筑大体积混凝土施工技术——以某工程为例

随着城市化建设的不断推进,大型以及特大型建筑工程与日俱增,在此背景下,大体积混凝土以其结构厚实、整体性强、耐久性好等优势在混凝土墙、地下室、底板等工程中得到了推广应用。然而在施工中,大体积混凝土容易受材料、温度、变形等影响而出现裂缝,本文结合某工程实例,就目前大体积混凝土产生温度裂缝问题的起因作了分析,以供同行参考。

初探基坑工程支护及阻水技术——以厦门某工程为例

结合厦门沿海地区较为复杂的工程地质条件及海水影响,根据某工程实践经验,阐述了基坑支护、阻水和开挖设计。希望能给同行参考借鉴。

源本得法,巧写外貌

学生在描写人物外貌时，往往没能抓住人物的特点，或千人一面，或面面俱到，眉毛胡子一把抓，缺乏鲜明的个性。教师可以结合文本中典型的描写人物外貌语段，引导学生进领悟表达方法，通过相应的迁移练习，使学生掌握抓住人物特点，描写人物外貌的基本方法。

核酸检测在血液HBV筛查中的应用研究

目的:了解沈阳地区乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性献血者中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染状况,探讨HBV核酸扩增检测(nucleic acid amplification testing,NAT)技术应用于血液筛查的意义。方法:在酶联免疫法(enzyme immunoassay,EIA)检测的基础上,应用TaqMan实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法对HBsAg EIA阴性血液标本进行HBV DNA的NAT检测。对NAT阳性标本进一步做乙型肝炎病毒血清标志物(HBV Marker,HBV-M)及核酸定量检测。结果:共检测了105,152例HBsAg阴性的血液标本,检出HBV DNA阳性标本15例,阳性率0.014%。Abbott酶联免疫试剂检测发现,15例标本中有6例标本的HBV-M五项指标检测全部阴性,9例为HBsAg阴性但其它标志物阳性。其中10例HBV DNA阳性标本再经Roche试剂进行核酸定量检测,HBV DNA核酸含量最高为149 IU/ml。结论:在HBsAg ELA阴性献血者中仍有极少数的HBV感染者;核酸扩增检测和酶联免疫检测互补,能够缩短血液筛查中HBV检测窗口期,特别是对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值。

ISO 15189在核酸检测性能验证方法中的应用价值

目的探讨经血传播疾病的核酸检测采用磁珠法-实时荧光PCR检测方法,针对这些方法进行性能验证,以符合国际标准化组织(ISO)15189的申报要求。方法针对血液筛查检测的核酸检测系统,进行重复性实验、灵敏度、特异性、符合率、符合性、检出限、抗干扰试验及稳定性等8个方面进行验证。结果 8个方面的性能验证数据与相应的标准进行比较,所有性能验证结果都符合相应标准的要求。结论针对核酸检测采用的性能验证方法能够满足ISO 15189的要求,还能提高实验室对检测系统性能指标的认识,对实验室技术管理水平的提高起到重要作用。

探讨氢氧化钠溶液冲洗全自动加样针对酶免实验的影响

〔目的〕解决TECAN全自动酰免设备的加样系统在加样时出现的拖尾现象,防止出现假阳性结果。〔方法〕用全自动加样系统RSP加样,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,在标本加样过程中采用不同质量分数的氢氧化钠(NaOH)溶液对加样针及管道进行冲洗,并设蒸馏水对照。对各组检测数据进行比较,并作方差分析。〔结果〕5组数据间比较,方差分析结果为F>F0.01(4.36),故P<0.01,5组间存在着差异;4组间比较,分析结果为F>0.01(3.28),故P<0.01,4间亦存在差异;前3组间比较,方差分析结果为F<F0.01(2.21),故P>0.01,前3组间差异无显著性。〔结论〕(1)质量分数超过2.0%的NaOH溶液冲洗加样针及管道对实验结果会产生影响;(2)用质量分数为1%的NaOH溶液冲洗既可解决拖尾现象,又对实验不会造成影响,可避免假阴性结果;(3)NaOH溶液质量分数过高,也会产生假阴性结果,必须控制范围。