沙门氏菌选择性化学限定培养基的研制

目的拟用氨基酸、维生素、无机盐替代牛肉膏和蛋白胨,开发质量可控的化学限定沙门氏菌选择性培养基。方法分别研究20种氨基酸、11种维生素或4种无机盐对大肠杆菌ATCC 25922生长特性的影响,并确定生长最适浓度,替换亚硫酸铋(BS)琼脂或Hektoen Enteric(HE)琼脂中的牛肉膏和蛋白胨,研制出化学限定BS琼脂或HE琼脂培养基。结果在36℃下培养48 h,基础培养基中添加天冬酰胺、天冬氨酸、缬氨酸、盐酸硫胺或核黄素有利于大肠杆菌ATCC 25922生长,OD_(595)值均高于0.1,而添加丝氨酸、赖氨酸盐酸盐、异亮氨酸、尼克酸、生物素或磷酸氢二钠对细菌增殖没有促进作用,OD_(595)值几乎为0。将35种营养物质按照最佳浓度替代牛肉膏、蛋白胨制成化学限定BS琼脂或HE琼脂,经过质控菌株验证,化学限定BS琼脂或HE琼脂在菌体生长指数、菌落形态和特殊显色反应等方面均与商业培养基相似。结论化学限定BS琼脂和HE琼脂均符合国标GB 4789.28—2013对参考培养基的质控要求。