PCOS对女性健康影响的共识:ESHRE/ASRM在阿姆斯特丹发起的第三届PCOS共识研讨会(上)

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是女性最常见的内分泌疾病。这种遗传异质性疾病的病因学尚不清楚,其表型表达各不相同。由欧洲人类生殖及胚胎学会/美国生殖医学会(ESHRE/ASRM)发起的分别针对其诊断(2004年)和不孕管理(2008年)的两个PCOS共识研讨会,正被广泛引用。目前第三届PCOS共识研讨会概述了当前已有的认识,也明确了关于PCOS对女性健康多方面影响的认识盲区。已研究的相关主题包括青春期问题、多毛症和痤疮、避孕、月经周期异常、生活质量、种族、妊娠并发症、远期代谢和心血管健康问题,以及最终的癌变风险。

PCOS对女性健康影响的共识:ESHRE/ASRM在阿姆斯特丹发起的第三届PCOS共识研讨会(下)

欧洲人类生殖及胚胎学会和美国生殖医学学会(ESHRE/ASRM)举办的第三届多囊卵巢综合征(PCOS)共识研讨会于2010年10月在荷兰的阿姆斯特丹举行,在总结已有的共识基础上,明确了PCOS各种女性健康方面的认识差异。本文目的在于总结第三届PCOS共识研讨会的讨论结果,包括14个主题。本刊已经在2013年第32卷第3期对本文中前言和青春期问题,多毛症、痤疮和秃顶,月经失调,避孕,生活质量,妊娠6个主题做了介绍,本期继续介绍种族差异、肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、远期代谢和心血管健康问题以及最终的癌变风险等8个主题。

利福平预处理通过Nrf2减轻帕金森病小胶质细胞的氧化损伤

【目的】探讨利福平对鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞氧化损伤中的核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。【方法】利用鱼藤酮刺激的BV2小胶质细胞建立帕金森病氧化应激的模型,分别用不同浓度的利福平预处理BV2小胶质细胞,CCK-8法检测细胞存活率;分别用双氯荧光素(DCFH-DA)、罗丹明123染色后使用流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP);使用脂质氧化检测试剂盒测定细胞内脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)的含量。采用Western Blot法检测利福平对小胶质细胞Nrf2核转位以及血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。用si RNA抑制HO-1基因表达后用CCK-8法检测利福平对鱼藤酮诱导的氧化损伤的影响。【结果】与空白对照组相比,鱼藤酮刺激下BV2小胶质细胞的细胞活力明显降低。鱼藤酮可引起BV2细胞内ROS和MDA的水平显著升高以及MMP明显下降。利福平预处理可以降低鱼藤酮所引起的ROS和MDA的产生,以及逆转鱼藤酮对MMP的降低作用;利福平能够诱导Nrf2的核转位及上调HO-1蛋白的表达。使用si RNA抑制HO-1基因表达后,可逆转利福平预处理对鱼藤酮诱导的氧化损伤的抑制作用。【结论】利福平可能通过激活Nrf2信号通路,减轻鱼藤酮诱导的帕金森病小胶质细胞模型的氧化损伤。

利福平通过抑制内质网应激减轻鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤

目的:探讨利福平对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的保护作用,并从内质网应激的角度阐明其作用机制。方法:用鱼藤酮诱导PC12细胞构建帕金森病模型,经利福平预处理,MTT法检测细胞存活率,DAPI荧光染色法观察细胞凋亡,Western blot检测GRP78及cleaved-Caspase12的表达变化。结果:与鱼藤酮组相比,利福平加鱼藤酮处理组细胞活力明显提高(P<0.01,P<0.05),细胞的凋亡形态明显改善,GRP78的表达增加(P<0.05),cleaved-Caspase12的表达降低(P<0.05)。结论 :利福平保护PC12细胞免受鱼藤酮诱导的细胞损伤,其保护机制可能与通过上调GRP78及下调cleaved-Caspase12从而抑制过度的内质网应激有关。

利福平通过改善溶酶体功能保护鱼藤酮诱导的SHSY5Y细胞

目的:探讨利福平对鱼藤酮诱导SHSY5Y细胞损伤的保护作用,并从溶酶体功能的角度阐明其作用。方法:用鱼藤酮诱导SHSY5Y细胞构建帕金森病模型,经利福平预处理,CCK8检测细胞存活率,免疫细胞荧光检测溶酶体的渗透性变化及检测溶酶体pH值的变化。结果:与鱼藤酮组相比,利福平预处理组可明显提高多巴胺神经元的细胞活力;与正常细胞组相比,鱼藤酮可破坏细胞溶酶膜稳定及提高溶酶体内的pH值,利福平预处理可明显改善鱼藤酮介导的溶酶体功能障碍。结论:利福平可能通过改善鱼藤酮诱导的溶酶体功能障碍来保护多巴胺神经元。

利福平通过抑制蛋白激酶R活化调节鱼藤酮诱导的小胶质细胞炎症而发挥神经保护作用

目的:探讨利福平通过抑制蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)活化对小胶质细胞炎症及其介导神经元凋亡的影响。方法:用鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞构建PD炎症细胞模型,经利福平或者PKR抑制剂(C16)预先孵育2小时,Western blot检测p-PKR、PKR、NLRP3、Caspase-1、IL-1β等蛋白的表达量,流式细胞术(Flow cytometry)检测细胞凋亡率。结果:与鱼藤酮组相比,利福平预处理组和PKR抑制剂(C16)预处理组:p-PKR、NLRP3、IL-1β、Caspase-1蛋白表达水平出现下降(均P<0.05);共培养体系中SH-SY5Y细胞凋亡水平下降(均P<0.05)。结论:利福平可以抑制PD炎症细胞模型中PKR活化,减轻细胞炎症及介导神经元细胞凋亡。

鲁卡帕尼对于鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响

目的:研究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂鲁卡帕尼对于鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:将呈对数生长的SH-SY5Y细胞分为3组:对照组(正常培养)、模型组(鱼藤酮10μmol/L诱导)、药物组(鲁卡帕尼5μmol/L预处理1小时后加入鱼藤酮10μmol/L),用CCK8检测各组细胞的存活率,用蛋白质印迹(western blot)技术检测各组凋亡相关蛋白bcl-2和bax的蛋白表达量,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:与对照组相比,模型组的细胞存活率明显下降,bcl-2蛋白表达量降低,细胞凋亡率上升,促凋亡蛋白bax表达量增多。与模型组相比,鲁卡帕尼预处理组细胞存活率上升,bcl-2蛋白表达量增多,细胞凋亡率下降,促凋亡蛋白bax表达量减少。差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PARP抑制剂鲁卡帕尼可以抑制鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

改良Ferriman-Gallwey评分系统用于广东省育龄期汉族妇女体毛评价的分析

【摘要】目的了解广东省育龄期汉族妇女体毛生长状况，探讨年龄、月经紊乱以及多囊卵巢对终毛生长状况的影响，并提出改良Ferriman—Gallwey（mFG）评分系统对多毛症的评分诊断界值。方法2008年6月至2009年7月采用四级系统随机抽样的方法，抽取广东省两个城市和两个农村共16个社区的育龄期（20～45岁）妇女2988例，采用mFG评分系统对体毛分布进行评价，并用K一聚类分析法计算多毛症的诊断界值。按照不同的年龄分组（20一岁组982例、26一岁组765例、31～岁组597例、36～岁组384例、41—45岁组260例）；因部分数据记录错误或缺失，导致部分病例从组别中删除，最终根据有、无月经紊乱，有、无多囊卵巢分为月经紊乱组488例、月经正常组2413例，多囊卵巢组568例、非多囊卵巢组2207例，比较各组多毛症mFG评分系统诊断界值，以及各组多毛症妇女痤疮、月经紊乱、黑棘皮症和多囊卵巢的发生率。结果（1）在2988例妇女中，mFG评分系统〉／7分149例（5．0％），／〉5分314例（10．5％），／〉2分747例（25．0％）。（2）在总人群中，多毛症mFG评分系统诊断界值为≥5分；月经紊乱组和多囊卵巢组mFG评分系统评分第90、95百分位数均分别低于月经正常组、非多囊卵巢组（P均〈0．05）。（3）年龄分组结果显示：mFG评分系统相应百分位数和多毛症诊断界值均随着年龄增加而下降（P〈0．05）；多毛症mFG评分系统诊断界值在20一岁组为≥6分，26～岁组为≥5分，而31～岁组、36～岁组、41—45岁组则均为I〉4分。（4）总人群中多毛症妇女痤疮、月经紊乱、多囊卵巢发生率分别为45．5％（143／314）、73．6％（231／314）、25．8％（81／314），正常毛发妇女分别为25．1％（671／2674）、16．1％（431／2674）、19．8％（529／2674），两者分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；各年龄组多毛症妇女痤疮、月经紊乱、黑棘皮症发生率分别为44．4％（130／293）、23．2％（68／293）、4．1％（12／293），正常毛发妇女分别为25．3％（681／2695）、16．2％（437／2695）、1．9％（51／2695），两者分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）mFG评分系统评价广东省育龄期汉族妇女的体毛生长程度随着年龄增加而降低。（2）mFGI〉5分为多毛症诊断界值。（3）多毛症妇女痤疮、月经紊乱及多囊卵巢发生率明显升高。

利福平对鱼藤酮诱导小胶质细胞caspase-1活性的影响

目的探讨利福平对鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞产生炎症反应的影响及相关机制。方法将经过利福平预处理的BV2小胶质细胞加入鱼藤酮刺激,用Real-time PCR以及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测接受药物处理后小胶质细胞产生IL-1β的变化;采用caspase-1活性检测试剂盒检测小胶质细胞内caspase-1的活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。用SPSS 16.0统计软件进行统计分析,计量资料使用均数±标准差(x珋±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,P<0.05说明差异有统计学意义。结果与鱼藤酮组相比,50μmol/L利福平预处理组可明显降低小胶质细胞内鱼藤酮介导的炎症因子IL-1β的基因表达(t=4.11,P<0.05)和上清液中IL-1β的分泌(t=35.81,P<0.05),并显著抑制caspase-1的活性(t=11.62,P<0.05)。将BV2小胶质细胞与PC12细胞用Transwell体系共培养,利福平预处理组(25、50μmol/L)和caspase-1抑制剂组的PC12细胞的细胞凋亡率均低于鱼藤酮组,差异有统计学意义(t值分别为3.82、7.98、10.12,均P<0.05)。结论利福平可能通过抑制caspase-1活化对抗鱼藤酮刺激下小胶质细胞产生的炎症毒性。