组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用

目的探讨组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用。方法分别运用组织薄片法和组织块法从人肝癌组织标本中分离培养原代肝癌细胞,分析两种方法培养成功率、细胞爬出时间、形态及GPC3的表达。结果薄片法培养成功率为66.67%,爬出细胞时间为(7.89±0.78)d,在培养第一代就能观察到形态规则的细胞且周围培养环境洁净;组织块法培养成功率为61.11%,爬出细胞时间为(7.56±0.73)d,在培养第二代能观察到形态规则的细胞。同时原代肝癌细胞和HepG2均能稳定表达GPC3。结论两种方法均能成功培养出原代肝癌细胞,但薄片法培养的细胞在形态及洁净程度上较组织块好,同时能稳定表达GPC3。

经皮射频消融治疗巴塞罗那B期肝癌44例的疗效观察

目的观察经皮射频消融（RFA）治疗巴塞罗那分期（BCLC）B期肝癌患者的疗效。方法 44例BCLC-B期肝癌患者经皮射频消融治疗,采用增强CT、MRI或超声造影联合甲胎蛋白（AFP）评价疗效。结果 44例术后随访1~45个月,1、2、3 a生存率分别为80.8%、67.7%、47.4%,中位生存时间32.7个月。结论 RFA是BCLC-B期患者安全、有效的局部治疗方法。

香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究

目的研究香叶木素对人肝癌HepG2细胞的增殖、凋亡及周期阻滞的影响并揭示其分子机制。方法 MTT方法检测不同浓度香叶木素对肝癌HepG2的细胞活力的影响;流式细胞术检测不同浓度香叶木素处理对HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡的作用;Western blot检测香叶木素处理对细胞p53、Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP、Bak、cdc2、cyclin B1、p21等细胞周期调节或细胞凋亡相关蛋白表达的调节。结果香叶木素能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并且诱导细胞凋亡(P<0.05);流式细胞术对细胞周期检测示:香叶木素处理HepG2细胞,使G0/G1期细胞比例显著降低,而G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05)。香叶木素可下调HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、cdc2、cyclin B1的蛋白表达,上调p53、p21、Bax、Bak,Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP等促凋亡蛋白。结论香叶木素在体外实验能通过激活p53/Bcl-2细胞凋亡通路抑制人肝癌HepG2细胞的增殖及促进细胞凋亡,同时通过上调p53、p21下调cdc2、cyclin B1诱导细胞G2/M周期阻滞。

壶腹癌并病理性胆肠瘘的术前诊断和治疗:附12例报告

目的探讨壶腹癌并病理性胆肠瘘的临床表现，以提高其术前诊断率。方法回顾性分析近9年间以壶腹部癌收治人院，术中诊断合并病理性胆肠瘘12例患者的临床资料。结果所有患者术前临床无阻塞性黄疸的症状及体征。B型超声检查提示壶腹部占位并肝内外胆管扩张，胆囊萎缩，与周围组织粘连，轮廓不清。胆肠瘘均在术中确诊，胆囊十二指肠瘘7例，胆囊结肠瘘5例，瘘口直径为0．4～2．8cm。4例行根治；8例姑息性手术。术后病理证实均为壶腹癌。结论对于超声检查有上述发现的老年患者，若临床无阻塞性黄疸的表现，往往反映病理性胆肠瘘存在。

实时灰阶谐波超声造影在肝肿瘤诊断中的应用

目的研究实时灰阶谐波超声造影在肝肿瘤诊断中的价值。方法对89例共101个肝内病灶进行实时灰阶谐波超声造影检查,其中原发性肝癌36例38个病灶,转移性肝癌24例32个病灶,肝血管瘤16例18个病灶,肝脓肿2例,硬化结节5例,局灶性结节性增生2例,肝腺瘤1例,局灶性脂肪肝3例。选用低机械指数成像技术GE Logiq9超声诊断仪和Bracco公司的SonoVue超声造影剂。结果注入造影剂后,实时谐波超声造影能显示不同肝肿瘤的造影特点,并能显示肿瘤的血流灌注信号。超声造影正确诊断肝癌和肝良性肿瘤病灶分别为67个(95.7%)和29个(93.5%)。其诊断肝癌的敏感性、特异性及准确性分别为95.7%、93.5%、95.0%。结论实时灰阶谐波超声造影能反映不同肝肿瘤增强模式及血流动力学变化,可帮助提高肝肿瘤超声诊断的准确性。

维生素K2促进大鼠肝再生模型肝切除术后肝功能恢复的研究

目的:通过建立大鼠肝卵圆细胞增殖肝再生模型,探讨维生素K2对大鼠肝再生模型部分肝切除术后肝再生过程中肝功能恢复的影响。方法:180只SD雄性大鼠随机分为6组,实验组5组:(1)2AAF+VLVK2/PH,(2)2AAF+LVK2/PH,(3)2AAF+MVK2/PH,(4)2AAF+HVK2/PH,(5)2AAF+VHVK2/PH;对照组:2AAF/PH。分别于术后第4、8、12、16、20天采血检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)的动态变化情况。结果:2AAF/PH组第4、8天ALT、AST与5组维生素K2不同剂量实验组相比较明显升高(P<0.01),而血清ALB含量在第4、8天与5组维生素K2不同剂量实验组相比较明显降低(P<0.05)。5组维生素K2不同剂量实验组中2AAF+MVK2/PH组第4、8天与2AAF+VLVK2/PH、2AAF+LVK2/PH相比较血清ALT、AST明显降低(P<0.01),而血清ALB含量在第4、8天相比较明显升高(P<0.01)。2AAF+MVK2/PH组与2AAF+HVK2/PH、2AAF+VHVK2/PH组比较,ALT、AST、ALB差异无统计学意义(P>0.05)。结论:维生素K2对大鼠肝再生模型术后肝功能恢复有明显的改善作用;当剂量低于20mg/kg时,肝功能恢复呈剂量依赖性。

超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗中的应用(附35病例)

目的评价超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗效果。方法对收治本科35例行超声引导下置管治疗的细菌性肝脓肿患者进行回顾性析。结果 35例患者均在超声引导下穿刺置管成功,经对症置管、抗炎冲洗治疗,患者全部治愈,无临床并发症,术后住院时间5～30d(平均13.6天)。结论经皮肝穿刺置管治疗细菌性肝脓肿,具有患者创伤小、成功率高,操作简便、经济、并发症少等特点,临床有推广应用价值。

两种肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度的实验研究

目的探讨大鼠肝细胞增殖介导肝再生和卵圆细胞增殖介导肝再生两种不同大鼠肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度变化的情况。方法 SD大鼠随机分为2组:肝细胞增殖介导肝再生模型组(PH),卵圆细胞增殖介导肝再生模型组(2AAF/PH)。计算两组模型肝切除术后4d、8d、12d、16d、20d残肝肝再生度及肝再生指数。结果两组肝再生度、肝再生指数均在第4天明显升高,12天左右达到高峰,超过再生总量的2/3以上,至20天基本达到原肝重。在4d、8d、12d天同一时间点内,PH组肝再生度比2AAF/PH组高(P<0.05),而到16d时,2AAF/PH组肝再生度则比PH组高(P<0.05)。在4d、8d天同一时间点内,PH组肝再生指数比2AAF/PH组高(P<0.05)。在12d、16d、20d同一时间点内,两组肝再生指数无显著性差异(P>0.05)。结论肝再生度与肝再生指数是评价肝再生质量变化较直观和准确的指标,肝再生度在反映肝再生规律方面要比肝再生指数更准确。

豚鼠至大鼠原位肝移植肝下下腔静脉套管方法的改进

目的探讨豚鼠至大鼠异种原位肝移植中肝下下腔静脉套管的改进方法。方法豚鼠和SD大鼠各40只分别作为供、受体,随机分为实验组和对照组并随机配对。实验组采用改进的肝下下静脉套管方法进行肝下下腔静脉袖套管的安装及吻合,对照组采用常规方法进行肝下下腔静脉袖套管的安装及吻合。比较两组肝下下腔静脉袖套管安装时间、安装成功率、吻合时间、吻合成功率和手术成功率。结果实验组较对照组肝下下腔静脉袖套管安装时间、吻合时间和无肝期明显缩短,袖套安装成功率、吻合成功率和手术成功率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用改进的肝下下腔静脉套管方法进行豚鼠至大鼠原位肝移植,手术成功率高,可用于豚鼠至大鼠原位肝移植实验研究模型。

胆管导管内乳头状黏液瘤腹壁种植转移合并切口疝一例

胆管导管内乳头状黏液瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm of the biliary tract,IPMN-B)是一种起源于胆管上皮的胆管肿瘤,以分泌大量黏液蛋白,改变胆汁的正常排泄,导致胆管弥漫性扩张为特征,属于恶变率较高的良性病变。目前外科手术是治疗IPMN-B的首选方法,术后复发率高、总体预后好。本文回顾分析1例IPMN-B术后种植转移于切口疝并结合文献复习对IPMN-B种植的临床诊治进行探讨总结,现报道如下。

腹腔镜经腹腹膜前疝修补术治疗糖尿病合并腹股沟疝50例临床观察

目的了解腹腔镜经腹腹膜前疝修补术(TAPP)治疗糖尿病合并腹股沟疝的临床疗效。方法100例糖尿病合并腹股沟疝患者分别采用TAPP修补术(研究组)、Lichtenstein修补术(对照组),比较两组手术时间、术中出血量、术后首次下床活动时间、术后第1天及第3天疼痛视觉模拟评分(VAS)、术后并发症、住院时间、住院费用情况。结果研究组手术时间、住院时间、术后首次下床活动时间均短于对照组(P<0.01),术中出血量少于对照组(P<0.01),术后第1、3天VAS低于对照组(P<0.01),但两组术后并发症差异无统计学意义(P>0.05)。结论TAPP是治疗糖尿病合并腹股沟疝的安全、可行的手术方式。

门静脉注射超声微泡促进肝脏EGFP质粒表达

目的探讨门静脉注射超声微泡对肝脏增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒表达的影响。方法 48只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为3组,每组16只。A组经尾静脉注射EGFP裸质粒,B、C组分别经尾静脉和门静脉导管注射微泡与EGFP质粒混悬液,同时按设定参数和时间超声辐照肝区。转染后第1、3、7、11天每组随机处死4只大鼠,肝组织冰冻切片,荧光显微镜观察EGFP表达。结果 3组大鼠转染后第1天发现少量荧光,第3天达高峰;A组于第7天荧光基本消失,B、C组第7天仍持续表达。第3、7天,B、C两组转染率较A组明显增加(P<0.05),第3天C组的转染率较B组也有增加(P<0.05)。结论门静脉注射超声微泡可显著提高肝脏EGFP质粒转染率,可作为一种安全、有效的靶向基因体内转运载体。

慢性肾功能衰竭腹膜透析患者合并腹股沟疝的治疗体会

目的总结慢性肾功能衰竭腹膜透析患者合并腹股沟疝的临床治疗经验。方法对30例行Lichtenstein无张力修补术的腹膜透析合并腹股沟疝患者进行回顾性分析,收集患者一般资料、手术时间、术中出血量、平均住院时间、术后并发症及预后情况。结果30例患者均顺利完成Lichtenstein无张力修补术,平均手术时间为(56.3±26.2)min,术中出血量(5.2±3.6)mL,平均住院时间(4.5±2.4)d。术后随访出现血清肿、慢性疼痛各1例,经保守治疗后症状好转。围术期中30例患者均采用临时中心静脉插管无肝素化血液透析作为过渡性透析治疗,术后2周逐渐恢复半量或全量腹透。术后随访6~72个月,未发现腹股沟疝复发。结论Lichtenstein无张力修补术疗效显著,术后并发症轻微,可作为腹膜透析患者合并腹股沟疝时的理想术式,而无肝素化血液透析可作为过渡性透析治疗的选择。

术前磁共振胰胆管造影在Ⅰ型先天性胆管扩张症中的应用

目的探讨术前磁共振胰胆管造影(MRCP)在Ⅰ型先天性胆管扩张症(CBD)中的应用。方法回顾性分析行开腹或者完全腹腔镜下胆囊切除+胆管囊肿切除+肝总管空肠Roux-en-Y吻合术治疗的15例Ⅰ型CBD患者的临床资料。患者术前均行MRCP检查并分型。观察患者围术期指标及术后并发症发生情况。结果所有患者术前MRCP检查均诊断Ⅰ型CBD,其中合并胰胆管合流异常4例。15例患者均顺利完成一期手术,手术时间为(195.6±26.2)min,术中出血量为(160.6±56.8)ml,术后住院时间为(7.9±2.8)d,术后引流量(50.1±18.5)ml/d。所有患者术中均确诊为Ⅰ型CBD,其中4例术前MRCP影像学提示胰胆管合流异常与术中探查所见一致,一致率为100%。1例术后出现胆肠吻合口瘘,无腹腔出血、胰瘘等并发症发生。术后随访5~36个月,除1例失访外,其余14例患者术后症状均好转,未见继发胆管结石、复发及癌变发生。结论术前MRCP可明确诊断CBD及了解胆胰管合流情况,对术前制定手术方案、减少胆胰管连接部的损伤具有重要指导价值。

自制硅胶负压引流系统预防肥胖患者腹部手术切口脂肪液化的效果观察

目的观察自制一次性硅胶负压引流系统在预防肥胖患者腹部手术切口脂肪液化中的应用价值。方法 200例于我科行腹部手术治疗的患者随机分成观察组和对照组,每组100例。对照组行常规皮下间断缝合腹部手术切口;观察组在腹部手术切口皮下脂肪层放置自制一次性硅胶负压引流系统。观察两组患者术后切口愈合情况、脂肪液化与二期缝合发生率,记录并对比两组患者关闭切口和切口愈合时间。结果 (1)观察组患者切口愈合情况优于对照组(Hc=12.275,P<0.01);(2)观察组切口脂肪液化的发生率以及术后切口二期缝合率均低于对照组(3.0%vs 14.0%,2.0%vs 12.0%,P<0.01);(3)两组患者关闭切口时间差异无统计学意义(P>0.05),但观察组切口愈合时间较对照组短(P<0.01)。结论自制一次性硅胶负压引流系统可预防肥胖患者腹部术后切口脂肪液化、感染的发生,缩短切口愈合时间,操作方便,值得临床推广。

腹腔镜腹股沟疝修补术中疝囊处理的研究进展

近年来随着腹腔镜技术的发展,腹腔镜腹股沟疝修补在临床上应用越来越广泛。然而,腹股沟疝疝囊腹腔镜下如何处理,目前尚无统一标准。本文总结相关文献报道,对腹腔镜下疝囊各种处理方法进行总结和分析,为临床上疝囊处理的提供理论证据。

植入不同材质疝补片对患者体内自由基的影响

目的:探讨不同材质疝补片对无张力疝修补术患者体内自由基的影响。方法:选择2014年6月至2016年12月160例腹股沟斜疝患者,其中40例行传统手术修补,60例用聚丙烯补片(polypropylene patch,PP)行无张力疝修补术,60例用膨化聚四氟乙烯补片(expanded PTFE patch,e-PTFE)行无张力疝修补术,分别作为传统手术组(traditional operation,TO)、PP组与e-PTFE组,手术前后分别抽血测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平。结果:三组术前的血浆MDA、SOD水平差异无统计学意义(P>0.05),术后1 d、3 d、7 d PP组与e-PTFE组MDA水平均高于TO组(P<0.05),且PP组高于e-PTFE组(P<0.05);PP组与e-PTFE组SOD水平均低于TO组(P<0.05),且PP组低于e-PTFE组(P<0.05)。结论:用PP与e-PTFE行无张力疝修补术对患者体内自由基均存在一定的影响,但后者要小于前者。

BCLC-B期肝癌患者经皮射频消融生存期相关单因素分析

目的：分析巴塞罗那分期B期（BCLC-B）肝癌患者采用经皮射频消融（RFA）治疗后其生存期有关因素。方法：收集2009年12月—2013年11月RFA治疗肝癌患者158例临床资料,其中BCLC-B肝癌患者46例,2例患者术后失访,对44例患者进行定期随访,采用增强CT、MRI或超声造影联合甲胎蛋白（AFP）评价疗效,对其临床资料及随访资料进行单因素相关统计学分析。结果：术后随访1~37个月,44例B期肝癌患者1、2、3年生存率分别为80.8%、67.7%、47.4%,中位生存时间32.7个月。单因素分析显示：首次完全消融、Child-Pugh A级、术前AFP阴性、术前HBV-DNA阴性患者3年生存率更高（P〈0.05）;而患者性别、年龄、是否联合治疗与3年生存率无关（P〉0.05）。结论：对于巴塞罗那分期B期患者经射频消融术是安全可行的,术后生存率与首次完全消融、术前Child-Pugh分级、AFP、HBV-DNA高度相关。

抑制survivin表达对肝癌细胞阿霉素化疗敏感性的影响

目的:探讨survivin基因沉默对人肝癌耐药株阿霉素化疗敏感性的影响。方法:针对人survivin基因设计并合成3条siRNA序列,分别用脂质体法转染人肝癌BEL-7402细胞(3组)。以未转染的BEL-7402细胞为对照,分别用RT-PCR法,免疫细胞化学技术及MTT法检测各组细胞survivin mRNA与蛋白的表达,及对阿霉素敏感性。结果:与对照组比较,各转染组细胞survivin mRNA与蛋白的表达均明显降低(均P<0.05);对照组细胞对阿霉素的IC50值为(20.60±2.86)μg/mL,各转染组细胞对阿霉素的IC50值分别为(11.53±1.46)μg/mL,(14.13±1.82)μg/mL,(15.53±0.46)μg/mL,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:抑制survivin基因的表达能增加BEL-7402细胞阿霉素化疗敏感性。