棕榈酸酯诱导人脐带间充质干细胞内质网应激和细胞凋亡

饱和游离脂肪酸棕榈酸酯(palmitate,PA)可诱导包括胰岛β细胞在内的多种细胞凋亡,本文旨在观察PA诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)凋亡的作用,并探讨其作用机制。研究采用的hUC-MSCs经细胞表面标志分子抗体标记,通过流式细胞检测鉴定。hUC-MSCs在PA干预后通过Annexin V-FITC和7-AAD双染,流式细胞术检测细胞凋亡率。PA处理后的细胞用于细胞内质网应激标志蛋白检测。半定量PCR观察XBP1 mRNA剪切体,荧光定量PCR检测BiP、GRP94、ATF4和CHOP mRNA表达,Western blot检测BiP和CHOP基因表达。结果显示,培养的hUC-MSCs表达符合MSCs的表面标志分子,PA暴露诱导hUC-MSCs凋亡率显著升高,内质网应激标志基因XBP1 mRNA剪切体增多,BiP、GRP94、ATF4和CHOP基因表达升高。研究结果提示,PA具有诱导hUC-MSCs细胞凋亡的作用,内质网应激可能是细胞凋亡的主要原因。

人尿源干细胞的提取和鉴定

目的从正常人尿液中分离得到具有增殖和分化能力的人尿源干细胞(h USC)。方法收集16例健康成人新鲜尿液,分离培养得到贴壁细胞,显微镜观察拍照。WST-1检测并绘制细胞生长曲线。流式细胞术分析细胞表面分子表达率。成骨和成脂诱导培养基诱导h USC分化。结果采用优化的细胞培养基得到12株具有较快增殖能力的h USC。分离的细胞中表达CD13、CD29、CD73、CD105的细胞数目均大于97﹪,表达CD90的细胞数目不足50﹪,表达造血系表面抗原CD14、CD19、CD34、CD45,内皮细胞表面抗原CD31以及HLA-DR的细胞数目均小于1﹪。h USC经诱导可分化成为骨和脂肪细胞。结论采用本研究自建培养体系可培养得到形态单一、具有较强增殖分化能力的人尿源干细胞。

ULK1复合物在细胞自噬中的作用

ULK1复合物在细胞自噬的启动中发挥重要作用,其作用包括接收细胞营养状态信号,将下游Atg蛋白招募到自噬体形成部位,以及管理自噬体形成。目前研究工作表明在不依赖营养和能量状态下,ULK1复合物也有可能被激活。在这篇文章综述了ULK1复合物是如何被不同的信号调控,以及ULK1复合物是如何调控细胞自噬机制的其他因素。