重组人成纤维细胞生长因子21降糖作用研究

目的利用肝细胞、肌肉细胞,前脂肪细胞及ob/ob小鼠进行rhFGF21体内外降糖作用研究。方法培养人正常肝细胞(HL-7702),大鼠肌肉细胞(L-6),小鼠前脂肪细胞(3T3-L1),用GOD-POD试剂盒测定细胞葡萄糖吸收量;FGF-21按照每天0.6μg·g-1的剂量颈部皮下连续注射7d,分别在d 0、d 3、d 7给药后1 h检测空腹血糖,以生理盐水做对比;rhFGF-21按照每天0.6μg·g-1的剂量颈部皮下连续注射9 d,末次给药后1 h开始口服糖耐量实验,灌胃给予2 mg.g-1的葡萄糖溶液,分别于给予葡萄糖溶液后30、60、120 min检测血糖;rhFGF-21按照每天2.5μg·g-1的剂量颈部皮下注射连续7 d,在d 0、d 3、d 7给药后1 h检测餐后血糖。结果在3.9 mg·L-1～100 mg·L-1间rhFGF21促进HL-7702细胞葡萄糖的吸收且呈现浓度-效应关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.01);在0.3 mg·L-1～250 mg·L-1间rhFGF21促进L6肌细胞对葡萄糖的吸收,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);在12.6 mg·L-1～100 mg·L-1间rhFGF21促进分化的3T3-L1细胞葡萄糖的吸收且呈现浓度-效应关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);ob/ob小鼠血糖测试证明,rhFGF-21具有降血糖和改善葡萄糖耐受量的作用。结论 rhFGF21体外可促进肝细胞、肌肉细胞及脂肪细胞葡萄糖的吸收;rhFGF-21可降低ob/ob小鼠空腹血糖及餐后血糖,具有改善其葡萄糖耐受量的作用。

非促分裂型haFGF对H_2O_2损伤心肌细胞的保护作用研究

目的:了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况,并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm -haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立H2 O2 损伤心肌细胞的模型,检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化,以评价H2 O2 对心肌细胞的损伤状况,并加入一定浓度的nm -haFGF ,观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变,以及凋亡的变化。结果:H2 O2对心肌细胞的损伤呈浓度依赖地加剧;在H2 O2 压力作用下,10 - 80 μg/Lnm -haFGF逐步提高H2 O2 损伤心肌细胞的存活率,其中80 μg/L组的细胞存活力明显大于对照组(P <0 . 0 5 ) ,同时逐步提高SOD活性和降低MDA含量,其中4 0和80 μg/L组的SOD活性明显大于阳性对照组(P <0 .0 5 ) ,4 0和80 μg/L组的MDA含量明显小于阳性对照组(P <0. 0 5 ) ;此外,在0. 0 1mmol/LH2 O2 作用2 4h后,10 μg/L和4 0 μg/Lnm -haFGF组的心肌细胞凋亡百分率分别为32 . 4 %和10 . 7%。结论:心肌细胞的损伤与H2 O2 的浓度呈剂量依赖关系;nm -haFGF对由H2 O2 引起的心肌细胞损伤具有拮抗作用。