LIT对小鼠抗弓形虫感染的保护作用

目的： 探讨激光照射弓形虫速殖子（ＬＩＴ） 的免疫保护力及其诱导的免疫应答水平。方法： 应用４．５ ＷＬＩＴ免疫ＩＣＲ小鼠，并用活体弓形虫速殖子攻击感染，观察ＬＩＴ抗虫效果。分别用间接免疫荧光法和ＥＬＩＳＡ法测定Ｔ淋巴细胞ＣＤ４＋ ／ＣＤ８＋ 亚群及特异性ＩｇＧ抗体。结果： ＬＩＴ免疫的小鼠具有抗急性弓形虫感染的能力， 能延长小鼠生存时间， 并能导致机体ＣＤ４＋ 、ＣＤ４＋ ／ＣＤ８＋ 显著升高及特异性ＩｇＧ抗体产生。结论： ４．５ Ｗ ＬＩＴ经腹腔免疫接种小鼠， 能诱导部分的保护性免疫力，

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４～１０８ｋＤ处，在３８～６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反应后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主体内增殖的代谢及裂解产物。同时提示，酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）可代替弓形虫的病原学检查，以作为弓形虫病急性、活动性感染的确诊指标。

激光对弓形虫速殖子的作用研究

本实验采用激光致弱弓形虫速殖子接种ICR小鼠腹腔，以期提高小鼠抗弓形虫感染的免疫保护力。结果表明：激光照射能够抑制虫体的繁殖和分裂能力。照射虫体免疫小且能诱导产生持续升高的IgG抗体。免疫民经弓形虫RH株攻击后，其发病和死亡时间延长，表现出部分的保护性免疫力。提示：激光对弓形虫速殖子的作用明显，可望在弓形虫病的治疗和预防中得到应用。

弓形虫抗原的部分理化性质研究

本文选用RH株弓形虫速落子细胞质、细胞膜和腹水代谢抗原，观察温度、pH值对抗原活性的影响，并分别测定糖及蛋白质含量。结果表明，三种抗原对热处理都较为稳定，但代谢抗原在加热前后的检测效果均不及其它两者。经糖含量测定显示，代谢抗原的糖含量最低。结果提示，弓形虫抗原的重要决定因子可能是糖蛋白或多糖成分。pH值试验表明，细胞质抗原的包被波以pH9．6碳酸盐缓冲液为佳，而细胞膜抗原应选用pH6.5磷酸盐缓冲液。

弓形虫韩国KI-1分离株的生物学特性鉴定

目的研究弓形虫韩国KI-1分离株的生物学特性。方法分别将弓形虫韩国KI-1株与国际标准RH株进行下列实验:透射电镜观察虫体的形态,不同浓度的速殖子接种BALB/c小鼠观察其毒力,蛋白质印迹(Westernblotting)分析弓形虫抗原与抗弓形虫单抗Tg563和抗新孢子虫单抗12B4反应,PCR-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术分析其基因型,检测SAG1和ROP1基因编码区的序列。结果弓形虫韩国KI-1株的形态、毒力与RH株相似。KI-1和RH抗原仅与抗弓形虫单抗Tg563反应,而不与抗新孢子虫单抗12B4反应。PCR-RFLP技术分析表明,KI-1株属基因型I型弓形虫虫株。KI-1株与RH株相比,SAG1和ROP1基因均各有7个核苷酸及6个氨基酸差异。结论KI-1株为基因型I型弓形虫强毒株,与RH株间存在一定的基因差异。

细菌脂多糖促进克氏锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎

目的观察细菌脂多糖(LPS)对克氏锥虫抗原诱导自身免疫性心肌炎的影响。方法克氏锥虫抗原辅以完全弗氏佐剂免疫A/J小鼠,LPS经腹腔接种方式给药,其后加强免疫2次,28 d后,测定心肌肌球蛋白特异的迟发型超敏反应(DTH)及自身抗体,并取鼠心脏观察心肌炎症情况。结果LPS提高锥虫抗原诱导的心肌肌球蛋白特异性DTH及自身抗体,并且25μg LPS与锥虫抗原免疫的小鼠可见明显的心肌炎。结论LPS能够促进心肌肌球蛋白特异的自身免疫反应及锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎。

COVID-19相关样本处理加工的实验室生物安全--来自CDC的临时指导文件

本指导文件更新于2020年2月10日,修订内容摘要如下:1.增加"认证"一词,以说明任何有可能产生气溶胶或飞沫的实验均应在经认证的二级生物安全柜(BSC)中进行。2.增加了在BSC外完成任何实验程序的相关细节。3.提供了更多有关使用美国环保局(EPA)注册的医用消毒剂的细节。4.增加了COVID-19实验废弃物处置的相关内容。5.补充现场和项目特定的风险评估,以确定是否需要增加实验室生物安全控制措施。

新型冠状病毒(nCoV)急性呼吸道感染临床特征数据工具

病例记录表设计(CRF)分为“核心”表格和“日常”表格,为实验室和临床的日常数据。入院第一天和ICU入院时开始填写每日CRF,直至出院或死亡。填表须知本CRF旨在收集通过检查、访谈和审阅医院病例记录获得的数据。如果患者在入院后被纳入研究,则可以回顾性地收集数据。参与者编码由3位数的研究中心编号和4位数的参与者编号组成。您可以通过联系ncov@isaric.org获得研究中心编号并在数据管理系统上注册。每个研究中心应按顺序分配参与者编号,从0001开始。

浙江省儿童隐孢子虫感染的诊断及分析

目的 对浙江省腹泻儿童进行隐孢子虫的病原学诊断及感染情况分析。方法 从浙江大学附属儿童医院收集腹泻儿童粪便５４８ 份，每份样本先用改良抗酸染色法检查卵囊，发现阳性或可疑标本，再用免疫荧光染色法进一步确诊。结果 两种染色方法结合诊断共发现５７ 例阳性病人，隐孢子虫感染率为１０－４％ ，男女之间感染率无显著性差异（χ２ ＝ ０－００７，Ｐ＞ ０－０５），其中１ 岁以下婴儿感染率为５－７ ％ ，１ ～１０ 岁儿童感染率为１７－５％ ，两者之间存在显著性差异（χ２ ＝ １９－６９ ，Ｐ＜ ０－０５）。结论 改良抗酸染色法与免疫荧光染色法结合诊断能达到隐孢子虫确诊目的，由感染情况分析可得浙江省腹泻儿童中有较高的隐孢子虫感染率，其中１ 岁以下儿童感染率较１ 岁以上儿童明显降低，可能与１ 岁以下婴儿多母乳喂养有关。

eIF4E基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的以往研究表明,真核细胞翻译起始因子(eukaryotic initiation factor-4E,eIF4E)在多种实体肿瘤中高表达,与恶性肿瘤发生、浸润和转移密切相关。本研究旨在采用免疫组化方法研究eIF4E在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法 70例NSCLC石蜡标本制成组织芯片,以19例癌旁组织、20例正常肺组织为对照,均采用Envision两步法进行免疫组化检测。结果 eIF4E在NSCLC中的阳性表达率高于在癌旁组织和正常肺组织的表达率;eIF4E在淋巴结转移组阳性表达率高于在无淋巴结转移组中表达率;eIF4E在低分化组中阳性表达率高于在中高分化组中表达率。eIF4E阳性表达与患者性别、年龄、肿块大小、吸烟情况无统计学差异(P>0.05)。结论 eIF4E在NSCLC中有较高的表达率,且与淋巴结转移密切相关,提示NSCLC的发生、侵袭和转移可能与eIF4E相关,eIF4E有可能作为肺癌新的标志物以及评估肺癌进展客观指标。

组织生物样本库中冷冻组织质量鉴定体系的建立

目的:建立组织生物样本库中储存的冷冻组织样本的质量鉴定体系。方法:随机选取浙江省台州医院组织库中肝癌、胃癌冷冻组织及正常对照组织各20例,HE染色评估标本取材的准确性,Agilent2100生物分析仪检测RNA纯度和完整性,Western blot和琼脂糖电泳分别测定组织样本的蛋白质和DNA质量。结果:HE染色观察到受检样本肿瘤部分均达到80%以上,RNA完整系数(RIN)为7.1～8.4,28s/18s比值为1.5～1.8,受检样本蛋白质及DNA均保存完好,无明显降解。结论:本研究介绍的冷冻组织质量鉴定体系,采用的方法可靠,可以作为组织生物样本库冷冻组织样本质量鉴定的有效且常规方法。

弓形虫交叉抗原成份分析

应用ＳＤＳ─ＰＡＧＥ及ＥＬＩＢ技术，对弓形虫抗原及其它来源的蛋白质进行分析比较，结果表明，白细胞４１和４３ＫＤ抗原，日本血吸虫尾蚴的４１、４７ＫＤ抗原存在着与弓形虫共同抗原成份；弓形虫代谢抗原的２０ＫＤ可被日本血吸虫成虫抗血清所识别。

应用组织芯片研究PTEN在肾细胞癌中的表达及意义

目的研究人肾细胞癌组织中PTEN的表达及其生物学意义。方法应用组织芯片和免疫组织化学Envision法检测PTEN在109例肾癌及40例癌旁正常肾组织中的表达。结果PTEN在肾细胞癌组织中的表达率为34.9%,明显低于癌旁的正常肾组织,两者差异有统计学意义(P<0.01)。肾癌中PTEN阳性表达率与组织学分级呈正相关(P<0.05);PTEN表达水平在肾癌临床Robson分期及TNM分期中的各期之间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论PTEN在肾癌组织中表达降低,可能与肾细胞癌的发生、发展密切相关。

中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法的探讨

本文取ELISA检测弓形虫循环抗原（CAg）、特异性IgM及IgG抗体阳性者的脑脊液样本13例，作弓形虫的病原学对比检查，个别样本同时进行ELIB分析。结果，CAg与IgM双阳性2例、IgM阳性1例，采用涂片法查见弓形虫；CAg阳性2例、CAg与IgM双阳性1例，经接种分离而获得3株弓形虫；其余7例CAg阴性而IgM阳性或IgM与IgG双阳性的脑脊液样本，均卡检获病原体。1例CAg与病原学均为阳性的脑脊液样本，与弓形虫速落子代谢抗原同步进行ELIB，前者在50kD处出现明显的反应区带，后者分别在50、97和108kD处出现3条反应区带。从而表明，脑脊液中弓形虫CAg检出率与病原阳性率相符合，ELISA—CAg可作为中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法；而ELIB技术，对确定及区别弓形上现症患者，均具进一步探讨的价值。

ELISA检测TORCH感染的交叉反应性探讨

目的 探讨TORCH四联抗原的交叉反应性。方法 采用间接ELISA检测人群血清中TORCH的IgM及IgG抗体 ;制备四项抗血清进行交叉血清学试验。结果 144份人血清的TORCHIgM阳性率分别为 :TOX 6 .9%、RV 6 .9%、CMV 6 .9%、HSV 2 .8% ,其中 4项阳性 4例 ,3项阳性 4例 ,2项阳性 3例 ;34 3份人血清的TORCHIgG阳性率分别为 :6 1%、8 2 %、10 2 %和 8 7% ,其中 4项阳性 3例 ,3项阳性 14例 ,2项阳性 17例 ,单独阳性 2 6例 ;7份抗血清与相应抗原反应的强度高低不等 ,但同一份抗血清在四种抗原板上的终点滴度基本相似。结论 TORCH四联ELISA检测存在较严重的交叉反应性 。

HLA-G表达调控机制的最新研究进展

人类白细胞抗原-G（human leukocyte antigen G,HLA-G）属于非经典的HLAⅠ类分子,低多态性及限制性分布于免疫豁免组织是其最大特征。HLA-G能够直接抑制多种免疫活性细胞的生物学功能,包括抑制NK细胞的杀伤活性,抑制CTL介导的细胞溶解及抑制树突状细胞成熟等;诱导产生抑制性T细胞（suppressor T cells）和致耐受树突状细胞（tolero-

人源弓形虫分离株的生物学鉴定及群体 DNA含量分析

通过对不同分离株弓形虫抗原的分析 ,探讨弓形虫虫株间的差异性。取弓形虫 CAg阳性血液标本进行小鼠接种 ,对分离株进行生物学特性鉴定 ;采用流式细胞仪 ( FCM)对分离株弓形虫速殖子进行群体 DNA含量分析。结果在 5份 CAg阳性血液样本中分离到 4株弓形虫 ,两者符合率达 80 % ;经生物学鉴定结果显示 ,4个分离株的形态大小、毒力及抗原性均与 RH株弓形虫相似。上述 5株弓形虫速殖子 DNA含量分析均呈明显规律性 ,即均有 2个分布峰 ,但各虫株间的 2个分布峰中所占速殖子数存在显著性差异 ( P<0 .0 1)。表明检测弓形虫 CAg可作为弓形虫早期、急性期感染的确诊指标 ;采用流式细胞术进行 DNA群体分析 。

原发性与继发性血小板增多症的实验室检查特征比较

目的通过比较原发性血小板增多症(ET)与继发性血小板增多症(ST)患者的血液学检查结果及JAK2酪氨酸激酶基因(JAK2V617F)检测结果,分析两者的实验室检查特征。方法回顾性选取ET患者162例、ST患者88例。分析并比较ET患者与ST患者治疗开始前的血WBC、RBC、Hb、PLT及血小板分布宽度(PDW)检测结果;观察患者血栓栓塞性疾病患病情况。结果 ET患者WBC、RBC、Hb、PLT、PDW水平均高于ST患者(均P<0.05)。JAK2V617F阳性ET患者WBC、RBC、Hb、PDW水平均高于JAK2V617F阴性ET患者(均P<0.05)。JAK2V617F阳性ET患者WBC、RBC、Hb、PLT、PDW水平均高于ST患者(均P<0.05)。JAK2V617F阴性ET患者的Hb、PLT、PDW水平均高于ST患者(均P<0.05)。ET患者血栓栓塞性疾病患病率高于ST患者(P<0.05)。结论 Hb、PLT、PDW等实验室检查结果可作为初步鉴别JAK2V617F阴性ET与ST的参考指标,早期诊断和治疗ET有助于预防血栓栓塞性疾病的发生、发展。

肿瘤细胞不同程度表达HLA-G对NK细胞杀伤活性影响研究

目的探讨肿瘤细胞不同程度表达HLA-G对NK细胞杀伤活性的影响。方法基因克隆建立稳定表达HLA-G抗原的肿瘤细胞株,以及通过基于CD107a标记的流式细胞术检测肿瘤细胞表达HLA-G前后对NK细胞杀伤功能的影响。结果HLA-G抗原在细胞表面获得不同程度的表达且能显著抑制NK对肿瘤细胞的杀伤活性(P<0.05)。HLA-G特异性抗体87G阻断或其受体KIR2DL4特异性抗体#33阻断后,均能明显恢复NK细胞对转染HLA-G肿瘤细胞的杀伤功能。结论肿瘤细胞HLA-G表达量不同,均能抑制NK细胞的杀伤活性,提示HLA-G分子表达在恶性肿瘤细胞的免疫逃逸中起重要作用。

激光照射对弓形虫速殖子作用的流式细胞分析

用流式细胞术 (FCM)检测分析了激光照射对弓形虫 RH株速殖子的作用。结果显示 ,激光照射后弓形虫速殖子群体 DNA含量分布发生改变 ,DNA含量的第 1道数峰值 (平均值 )左移 ,第 1峰值分布范围内速殖子数占总速殖子数百分率增加 ,3.5 W和 4.5 W剂量照射组与对照组相比差异存在显著性 (P<0 .0 5 )。提示激光照射能抑制弓形虫 DNA的合成 ,减少弓形虫群体