代谢组学在银屑病关节炎中的研究进展

近年代谢组学已被广泛应用于临床医学研究,用于寻找生物标志物及疾病早诊早治等领域.银屑病关节炎的早期诊断可显著改善患者预后,降低其结构损伤和功能残疾的风险.为了解现阶段代谢组学在银屑病关节炎中的应用,分别对银屑病关节炎及代谢组学进行介绍,并对两者结合的相关研究进行综述,从疾病诊断、疾病进展和治疗方面梳理代谢组学在银屑病关节炎的研究进展,并指出当前研究中存在的局限性,为更好地开展相关研究提供理论依据.

中波紫外线对HaCaT细胞凋亡、细胞周期变化及p16、c-myc蛋白表达的影响及阿魏酸干预作用研究

目的观察传统中药川芎的有效成份阿魏酸(ferulic)对中波紫外线(UVB)辐射引起的人表皮角质形成细胞系HaCaT细胞凋亡、细胞周期及对p16、c-myc蛋白水平变化的影响,以探讨其光保护作用与机制。方法培养HaCaT细胞,以不同剂量UVB和200mg/mL浓度的阿魏酸处理细胞,以流式细胞仪检测0、30、60和90mJ/cm^2的UVB照射后24h细胞周期和凋亡率变化;以Western blot方法检测30mJ/cm^2UVB照射后p16、c-myc蛋白的表达水平。结果UVB照射诱导HaCaT细胞产生凋亡,凋亡率呈UVB剂量增加而升高;30mJ/cm^2剂量下细胞可出现明显S期阻滞,但高剂量时S期细胞数量相对下降;照光后p16、c-myc蛋白水平均增高。加入阿魏酸处理可抑制UVB引起的上述改变。结论阿魏酸可明显抑制UVB引起的凋亡与细胞周期阻滞以及p16、c-myc蛋白表达。

复方甘草酸苷联合阿维A治疗红皮病性银屑病疗效观察

目的探讨复方甘草酸苷联合阿维A治疗红皮病性银屑病的疗效。方法红皮病性银屑病48例按照治疗方法的不同分为观察组及对照组,各24例。观察组采用复方甘草酸苷联合阿维A治疗,对照组单纯口服阿维A胶囊,比较两组疗效。结果观察组红皮病症状开始消退及明显消退时间均要小于对照组(均P<0.05)。治疗8周后,观察组有效率83.3%,对照组37.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。随访1年,两组复发率差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方甘草酸苷联合阿维A治疗红皮病性银屑病的疗效、症状开始消退及明显消退时间均明显优于单用阿维A胶囊组。

黄芩苷对皮肤鳞癌细胞生长和迁移能力的影响

目的探讨黄芩苷对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及迁移能力的影响及其机制。方法 50 mg·L-1黄芩苷孵育A431细胞,Western blot检测细胞中cofilin-1蛋白的表达水平;设计合成cofilin-1特异性siRNA并转染A431细胞,使用CCK8法检测细胞增殖活性,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力。结果 Western blot结果显示,与对照组相比,细胞cofilin-1蛋白表达下降了49.3%;单独黄芩苷处理和cofilin-1-siRNA沉默均可抑制A431细胞生长与迁移,合并cofilin-1-siRNA则明显增强黄芩苷的作用效能。结论黄芩苷可有效降低肿瘤细胞的增殖活性和迁移能力,cofilin-1基因可能成为增强药物作用的调控靶点之一。

黄芩苷对中波紫外线所致HaCaT细胞凋亡、细胞周期变化及p16、原癌基因c-myc蛋白表达的影响

目的:观察中波紫外线(UVB)辐射引起的人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞凋亡、细胞周期及p16、c-myc蛋白水平的影响及传统中药黄芩苷(baicalin)对它的干预作用。方法:以200 mg/L黄芩苷预处理HaCaT细胞,以流式细胞仪检测经0、30、60和90 mJ/cm^2的UVB照射后24 h细胞周期和凋亡率变化;以Western blot方法检测90 mJ/cm^2 UVB照射后p16、c-myc蛋白的表达水平。结果:UVB照射可诱导HaCaT细胞产生凋亡,凋亡率呈剂量依赖性增加;30 mJ/cm^2剂量下细胞可出现明显S期阻滞,随UVB剂量增大,S期细胞数量相对下降;照光后p16、c-myc蛋白水平均有所增高。加入黄芩苷处理可抑制UVB引起的上述变化。结论:黄芩苷可明显抑制UVB引起的凋亡与细胞周期阻滞以及p16、c-myc蛋白表达,证实该药具有有效的光保护作用。

螺旋CT三维及四维重建在复杂性髋臼骨折的应用

目的 :探讨螺旋CT三维及四维重建在复杂性髋臼骨折的应用。方法 :使用Picker 60 0 0螺旋CT机对 1 4例行患侧髋臼SCT扫描 ,在Voxel工作站上进行三维表面遮盖法重建 ,并以容积重建技术实现四维重建。结果 :三维及四维重建图像清晰地显示了复杂性髋臼骨折细节 ,对骨折块大小、移位程度得到了最直观、最全面的了解。结论 :螺旋CT三维及四维重建对复杂性髋臼骨折诊断和治疗具有一定临床指导意义 ,是目前理想的诊断髋臼骨折的方法。

黄芩苷和核磷蛋白基因沉默对人皮肤鳞癌细胞增殖的影响

目的观察黄芩苷及小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默核磷蛋白(nucleophosmin,NPM)基因对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法针对NPM信使RNA(messenger RNA,mRNA)序列设计合成特异性siRNA,转染A431细胞,并加入50 mg/L黄芩苷孵育;采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell countingkit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果黄芩苷孵育可使细胞增殖活性降低(P<0.05),发生S期阻滞;NPM基因沉默可明显增强黄芩苷的作用。结论黄芩苷可抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖生长,其机制可能与调控NPM基因表达有关。

宁波地区甲真菌病及其相关因素的调查分析

于2002年12月1日-2004年12月1日,对819例甲真菌病病例进行真菌分离培养及流行病学调查。结果：从819例患者1032个靶甲真菌培养分离出真菌615株,皮肤癣菌、酵母菌和霉菌三者分别占51.9%、41.6%和6.5%,且有部分患者存在混合感染情况。皮肤癣菌中红色毛癣菌居首位,占40.2%,酵母中白念珠菌居首,占14.1%,非皮肤癣菌霉菌中以曲霉为主。甲真菌病致病菌中酵母及霉菌日益增多,故治疗应个体化,宜选用广谱抗真菌药物治疗。

siRNA沉默NPM对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖能力的影响

目的观察siRNA沉默NPM基因的表达对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法培养A431细胞,针对NPM mRNA序列设计合成特异性siRNA,转染A431细胞;采用实时定量PCR(Real-timePCR)法检测NPM基因的表达情况,CCK8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期变化。结果实时定量PCR法的结果显示:细胞NPM基因的表达受到明显抑制,并筛选出沉默效率最高的特异性siRNA片段进行后继实验;CCK8法检测结果显示NPM基因沉默后,细胞增殖活性显著降低(P<0.05);流式细胞术检测结果显示细胞发生S期阻滞,G2/M期细胞减少。结论沉默NPM基因的表达可明显抑制A431细胞的增殖活性,并导致细胞周期阻滞。提示NPM基因可能成为皮肤肿瘤防治的调控靶点。

绿茶多酚对人皮肤成纤维细胞UVA氧化损伤的保护作用及机制研究

目的观察茶多酚(EGCG)对长波紫外线(UVA)引起的人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其相关机制。方法以强度为10 J/cm2的UVA照射原代培养的人皮肤成纤维细胞,并在照光前后加入浓度为50 mg/L的EGCG干预处理,照光后24 h收集细胞,以比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量变化;实时定量PCR(Real-time PCR)法检测p66ShcmRNA表达水平变化。结果 UVA照射后可引起细胞中SOD和GSH-Px水平下降,MDA活性增加,并增强细胞p66ShcmRNA表达;加入EGCG干预可明显恢复SOD和GSH-Px活性,降低MDA水平,并抑制p66Shc表达(P<0.05)。结论 EGCG可有效保护人皮肤细胞免于UVA氧化损伤,其机制可能与调控p66Shc基因表达有关。

缝匠肌骨瓣与RBX联合移植治疗青壮年股骨颈骨折

我院于1997～2000年应用缝匠肌骨瓣与重组合异种骨(RBX)联合移植加空心螺钉内固定治疗青壮年股骨颈骨折32例,效果满意,分析总结如下.

瘤型麻风六例临床分析

对2014-2017年发现的6例瘤型麻风患者进行回顾性分析。6例瘤型麻风均有典型的症状体征及病理特征,其中男3例,女3例,年龄30~60岁,病史1个月~40年。皮损类型主要为结节、丘疹。面部均累及,累及四肢的有4例,累及躯干的有2例。4例患者有神经受累现象,1例出现肢体疼痛,1例出现右下肢反复溃疡。组织病理学符合瘤型麻风特征。我市虽为低风险地区,早发现、早治疗仍是麻风防控工作的重点。

黄芩苷对HaCaT细胞影响的蛋白组学研究

目的本研究旨在观察黄芩苷对永生化人表皮角质形成细胞HaCaT株差异表达蛋白的影响。方法培养HaCaT细胞,并加入黄芩苷进行干预。培养24 h后收集细胞总蛋白,利用双向电泳方法分离细胞蛋白质,并用ImageMaster图像分析软件比较各组细胞的蛋白质图谱,筛选出的差异蛋白质点应用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质量指纹图谱,然后利用Mascot查询软件搜寻Swiss Prot数据库鉴定蛋白质。结果黄芩苷使HaCaT细胞蛋白质组发生改变,对其中18个差异蛋白质点进行质谱分析,获得15个点的肽质量指纹图,初步鉴定为热休克蛋白beta-1、肌动蛋白、二氢嘧啶酶调节蛋白2等。结论黄芩苷可通过影响细胞中多种蛋白的表达,增强细胞的稳态和抵抗环境刺激损伤的能力,发挥抗肿瘤活性。

黄芪甲苷对长波紫外线影响人成纤维细胞的干预研究

目的探讨黄芪甲苷对于长波紫外线(UVA)辐射导致人皮肤成纤维细胞老化的保护作用的机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,以10 J/cm2UVA进行照射,并加入20 mg/L黄芪甲苷干预处理。在照射后24、72 h,流式细胞仪测定细胞周期分布变化;在照射后24 h,实时定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测细胞衰老相关基因p53 mRNA、p16 mRNA和c-myc mRNA表达水平。结果与对照组相比,UVA照射作用下成纤维细胞出现了显著G1期阻滞(P<0.01),照射后24 h,G1期细胞比率由对照组的59.31%升高至81.36%,至照射后72 h,G1期细胞比率进一步升高至89.09%。黄芪甲苷可明显减轻UVA引起的细胞周期阻滞(P<0.01),G1期细胞比率下降为69.14%。RT-PCR检测显示UVA诱导p53 mRNA和p16 mRNA表达水平升高,而c-myc mRNA表达下降(P<0.01);黄芪甲苷干预处理可抑制UVA引起的p53 mRNA和p16 mRNA表达(P<0.01);黄芪甲苷干预可下调c-myc mRNA表达,UVA照射合并黄芪甲苷干预可进一步降低c-myc mRNA表达水平(P<0.01)。结论 UVA可诱导皮肤成纤维细胞出现G1期阻滞而启动老化进程,加入黄芪甲苷可有效减轻细胞周期阻滞延缓光老化进程,其具体机制可能与调控p53、p16、c-myc等老化相关基因表达有关。

8-甲氧补骨脂素和长波紫外线在细胞光老化中对端粒缩短机制的影响

目的 探讨8-甲氧补骨脂素（8-MOP）和长波紫外线（UVA）对人真皮成纤维细胞光老化模型中端粒缩短机制的影响.方法 研究对象分为对照组、8-MOP组、UVA组及8-MOP＋UVA组,对上述各组采用流式细胞仪检测细胞周期G1期阻滞率、酶组织化学染色法检测老化相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）、免疫荧光检测光产物8-羟基脱氧鸟嘌呤（8-oxo-dG）、实时定量PCR检测端粒相对长度,以及用Western印迹检测老化相关蛋白P53,P21^WAF-1及P16^INK-4a表达水平.结果 8-MOP＋UVA组在照光后24、48、72 h及7 d时的G1期阻滞率均高于对照组（61.4%±1.5%比32.8%±1.5%、69.5%±2.2%比44.9%4±2.3%、88.2%±1.6%比59.8%±1.4%、90.7%±2.5%比68.5%±2.6%,均P＜0.01）;8-MOP＋UVA组在照光后24、48、72 h及7d时的SA-β-Gal阳性细胞比率均明显高于对照组（34.87%±0.59%比7.11%±0.78%、59.38%±0.46%比10.57%±0.47%、72.46%±0.98%比11.67%±0.87%、94.33%±0.13%比12.04%±0.12%,均P＜0.01）;8-MOP＋UVA组照光后即刻产生的8-oxo-dG的水平（阳性细胞核百分数：95.78%±0.14%）也高于对照组（7.69%±0.09%,P＜0.01）、8-MOP组（9.76%±0.11%,P＜0.01）和UVA组（35.29%±0.14%,P＜0.05）;8-MOP＋UVA组在照光后7 d时端粒相对长度数值明显低于对照组（2.57±0.05比6.63 ±0.12,P＜0.01）,而该组老化相关蛋白P53,P21^WAF-1及P16^INK-4a水平明显高于对照组（3.00±0.88比0.54±0.10、2.50±0.51比0.42±0.06、2.21±0.34比0.38 ±0.05,均P＜0.01）.结论 8-MOP和UVA可通过对端粒基因的氧化应激损伤而加快端粒缩短,影响下游老化相关蛋白表达水平,最终加速细胞老化进程.

黄芩苷对培养人原代成纤维细胞长波紫外线光损伤端粒的影响

目的探讨黄芩苷对于长波紫外线（UVA）照射导致人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及对端粒途径的影响。方法分离培养人原代成纤维细胞，将亚融合状态的培养细胞分为空白组、黄芩苷组、UVA组和UVA＋黄芩苷组，照光组中以10JAmzUVA进行照射，药物干预组中加入50μg/ml黄芩苷干预处理。以流式细胞仪测定细胞周期变化；以端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法（TRAP—EHSA）检测细胞端粒酶水平；以实时定量PCR法检测细胞端粒长度及衰老相关基因p53、p16和c—mycmRNA水平；以蛋白印迹法检测p16和c—myc蛋白水平。结果UVA引起显著G1期阻滞，G1期细胞比值由正常对照组59．94％升高至81．04％，而黄芩苷处理后G。期细胞比值下降为65．55％。UVA照射后细胞端粒长度缩短为正常组的31．2％，黄芩苷干预组的端粒长度可恢复至正常细胞的63．9％。此外与正常组相比，UVA诱导p53和p16mRNA表达水平升高为2．93±0．21和2．14±0．09，而c—mycmRNA水平下降为0．53±0．03；黄芩苷干预可抑制上述改变。照射后与正常组相比，p16蛋白水平增高为5．84±0．16，c—myc蛋白表达降低为0．35±0．04；黄芩苷处理后p16蛋白表达量下降为4．09±0．13（P〈0．05）；c—myc蛋白表达水平无明显变化（P〉0．05）。正常对照和UVA组的端粒酶活性为阴性，加入黄芩苷对端粒酶活性无影响。结论黄芩苷可延缓人成纤维细胞光老化进程，其机制可能与调控p53等老化相关基因表达有关，与端粒酶活性无关。