齐墩果酸对HepG2细胞枯草溶菌素转化酶9表达的影响

目的观察齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对HepG2细胞PCSK9表达的影响,为了解OA降低血脂的分子机制提供实验依据。方法体外培养HepG2细胞,用不同浓度的OA作用HepG2细胞24 h后,用RT-PCR检测PCSK9 mRNA的表达。筛选出合适的OA浓度并以此浓度处理HepG2细胞,在0、3、6、12、24 h时分别用RT-PCR检测PCSK9 mRNA和Western Blot检测PCSK9蛋白的表达。用MTT法检测细胞活力的情况。荧光素酶报告基因实验检测OA对HepG2细胞PCSK9启动子活性的影响。结果与空白对照组比较,75μmol/L和100μmol/L OA处理HepG2细胞24 h后PCSK9 mRNA和蛋白的表达明显减少(P<0.05),其中,100μmol/L OA组下调更显著。与0 h组比较,100μmol/L OA处理HepG2细胞3、6、12、24 h,PCSK9 mRNA和蛋白的表达均下降(P<0.05)。MTT法检测结果表明,与对照组比较,75μmol/L和100μmol/L OA组在12和24 h对HepG2细胞的活力没有影响(P>0.05),在36和48 h能够抑制HepG2细胞的活力(P<0.05)。双荧光素酶报告基因活性检测结果显示OA能下调HepG2细胞PSCK9启动子的活性(P<0.05)。结论 OA可呈时间、剂量依赖性下调HepG2细胞PCSK9mRNA和蛋白水平。OA的降脂作用可能与其抑制PCSK9表达有关。