基于环介导等温技术检测人甲流H1N1病毒的响应面优化分析

目的为了建立人甲型流感H1N1病毒的环介导等温扩增(LAMP)体系,本研究以H1N1病毒核酸扩增效率为指标,通过响应面分析优化探讨LAMP检测H1N1流感病毒的最佳反应条件。方法根据Box-Benhnken响应设计原理,对影响LAMP反应关键因素(甜菜碱浓度、引物浓度、反应温度)进行三因素三水平响应面法优化。同时选取60例确诊甲流临床核酸样本和60例健康受试者核酸样本,分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和LAMP检测技术进行比对评估(评估指标包括灵敏度、特异性、准确度)。结果响应面回归模型能较好地预测LAMP检测效果与甜菜碱浓度、引物浓度和反应温度之间的关系,经过优化LAMP反应体系提高检测灵敏度和缩短反应时间。同时与PCR检测结果相比,LAMP检测实现100%的灵敏度、98.9%的特异性和99.2%的准确度,检测下限可达100 copies/ml。结论本研究建立的H1N1甲流LAMP检测是一种高效、灵敏、特异性高且不需要复杂设备的检测方法,适用于基层医疗卫生机构或居家自测,对季节性甲流病毒监测及暴发时应急检测具有重要意义。

深层发酵培养的虎奶菇多糖对3种小球藻的凝集作用

以深层发酵培养的虎奶菇(Pleurotus tuber-regium)菌丝体和发酵液为材料,提取胞内和胞外多糖,研究对藻类细胞的凝集作用.结果表明:胞内多糖使蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和捷克小球藻(Chlorella luteorividis)产生凝集的最小凝集质量浓度分别是23.3,186.4μg/mL,而胞外多糖使上述2种小球藻产生凝集的最小凝集质量浓度分别是3.3,211.3μg/mL,对海洋小球藻(Chlorella sp.)无凝集反应.

中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达

利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。

大承气汤联合奥曲肽在术后粘连性肠梗阻治疗中的效果

目的分析大承气汤联合奥曲肽在术后粘连性肠梗阻治疗中的效果。方法选取2021年11月—2022年12月于漳浦天福医院行腹部手术,但手术后发生不同程度的粘连性肠梗阻的患者56例,依据随机数字表法分为两组,每组各28例。观察组运用大承气汤联合常规西医疗法,对照组运用常规胃肠减压、纠正酸碱平衡及药物治疗的常规西医疗法。分别记录两组患者治疗后1、3、5 d的胃肠减压量;记录两组患者的首次排气时间、恢复肠鸣音时间、排水样便时间、胃液呈清时间;并对比分析两组患者的治疗总有效率情况。结果两组患者治疗后1、3、5 d的胃肠减压量间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组首次排气时间、恢复肠鸣音时间、排水样便时间、胃液呈清时间短于较对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。于治疗后7 d记录两组患者治疗有效情况,其中观察组有效21例、显效6例,无效1例;对照组有效17例、显效4例,无效7例;观察组治疗有效率(96.43%)明显高于对照组(71.43%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论大承气汤联合常规西医疗法相较于常规单纯西医疗法在术后粘连性肠梗阻的治疗效果更为显著,患者恢复更快、痛苦更少,因此值得临床作为粘连性肠梗阻治疗的新思路。

厨余垃圾厌氧发酵启动的接种物试验研究及工程建议

以湿式厌氧发酵的消化污泥和脱水污泥为接种物,对比两种接种物的接种效果和放置处理对厌氧发酵的影响。结果表明当接种相同质量的接种物时,脱水污泥和消化污泥累积产气量分别为643、407 mL/g,脱水污泥的最大产气速率为消化污泥的2.6倍;接种物经过放置处理会降低接种物的接种效果,产气高峰从第1天推迟至第3天出现,最大产气速率下降13%~75%。结合厦门市厨余垃圾处理厂实例,建议厨余垃圾干式厌氧发酵项目中可采用湿式厌氧脱水污泥作为接种物,并缩短接种物积累时间,也可在接种过程中添加适量底物,加快厌氧发酵的启动。

房屋建筑混凝土施工技术研究

房屋建筑物混凝土的施工质量不但对建筑物的结构安全有着重要的影响,而且也对人民的生命财产安全具有着至关重要的影响。为了进一步提高房屋的工程质量,应当充分了解和掌握相关的混凝土施工技术。本文基于笔者多年从事房屋建筑混凝土施工的经验,就混凝土施工过程中出现的问题及解决的措施进行简要的研究。

解毒化浊促愈汤治疗溃疡性结肠炎的疗效及对白细胞介素-6、肿瘤坏死因子水平的影响分析

目的:探讨中药解毒化浊促愈汤治疗溃疡性结肠炎的临床疗效及对炎性因子指标水平的影响。方法:选取本院2018年10月—2020年11月收治的86例溃疡性结肠炎患者作为观察对象,使用统计学软件SAS将患者进行随机编组,各43例。对照组以西药常规治疗,观察组在对照组基础上联用解毒化浊促愈汤治疗,持续治疗8周,比较两组患者的治疗疗效、血清炎性因子水平、肠道黏膜屏障功能变化。结果:观察组临床治疗总有效率为95.35%,高于对照组的74.42%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对比,无统计学差异(P>0.05);治疗后观察组IL-6、TNF-α低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者血清黏膜屏障功能指标二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)对比,无统计学差异(P>0.05);治疗后观察组DAO、D-LA指标水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加用解毒化浊促愈汤治疗溃疡性结肠炎,能取得理想的治疗效果,对患者血清炎性因子、肠道黏膜屏障功能均有明显的改善效果,应用价值高。

不同接种物对厨余垃圾厌氧发酵的影响

以分类收集到的厨余垃圾为发酵底物,以湿式厌氧污泥及养牛场牛粪为接种物,在中温(38±1)℃,接种比为接种物∶厨余垃圾=2∶1的试验条件下,对比研究了不同接种物对厨余垃圾厌氧发酵的影响。结果表明:餐厨垃圾湿式厌氧污泥相对于养牛场牛粪有更好的接种效果;湿式厌氧污泥中的消化污泥接种效果最好,发酵启动第3天即可达到日产气量峰值,累积产气量最高,为1619 mL,VS降解率为21.7%。

TST术的临床应用研究

目的:探讨TST术的临床应用。方法:选取2015年6月-2016年6月笔者所在医院收治的86例痔患者为研究对象,随机分两组,各43例,对照组给予行传统的外剥内扎术治疗,研究组给予TST术治疗,观察两组患者治疗效果。结果:研究组的治疗总有效率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。并发症发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的手术时间、住院时间、治疗满意度、疼痛评分均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:痔患者经TST术治疗,疗效确切,安全可靠,值得推广。

响应面法优化LAMP反应冻干保护剂配方的研究

目的筛选出适用于甲流病毒环介导等温扩增技术(LAMP)的最佳冻干保护剂组合,建立起可在室温下长时间储存的甲流病毒核酸检测体系,为甲流现场快速检测和分级诊疗提供技术支持。方法以LAMP核酸扩增活性为评价指标,在单因素试验的基础上利用三因素三水平的响应面法,探究冻干保护剂(海藻糖、牛血清白蛋白和甘露醇)对LAMP试剂的保护效果并优化冻干保护剂的组合。结果采用Box-Behnken试验结果进行回归模型拟合,LAMP试剂的保护剂最佳配方组合为7.64 wt%海藻糖、0.43 wt%牛血清白蛋白和0.85 wt%甘露醇。经真空冷冻干燥且加入保护剂后的LAMP试剂将以脱水形式贮存,可在常温下长期保持活性,使用时加水复溶即可。为了检验保护剂的稳定性,真空冷冻干燥后的LAMP试剂分别置于25℃和37℃下贮存,第0天、4天、8天、12天、16天、20天取出分别进行LAMP扩增活性检测。添加最优保护剂组合的LAMP冻干试剂其核酸扩增活性远大于添加单一保护剂或未添加冻干保护剂组。结论添加最优保护剂组合能够延长LAMP试剂的贮存时间和保持试剂的稳定性。