桦木醇对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桦木醇对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法:培养结肠癌SW480细胞,传代后用于实验。SW480细胞分为对照组和不同剂量桦木醇(1、5、10、20、50和100mg·L-1)组,MTT法测定各组细胞的增殖抑制率;以不加桦木醇的SW480细胞为对照组,DAPI染色观察15mg·L-1桦木醇作用SW480细胞6、12和24h后的形态学变化;流式细胞术分析Sub-G1细胞百分比即细胞凋亡率,体外caspase活力测定法检测凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和caspase-9的激活情况,Western blotting法检测各组细胞caspase-3底物多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)断裂和凋亡蛋Bcl-2、Bcl-xL和cytochrome C的表达情况。结果:MTT法检测,与对照组比较,随着桦木醇剂量(1、5、10、20、50和100mg·L-1)增加SW480细胞的增殖抑制率逐渐增加(P<0.05或P<0.01),其增殖抑制率呈剂量效应关系,半数抑制浓度(IC50)为12.875mg·L-1。DAPI染色,与对照组比较,15mg·L-1桦木醇组正常细胞数量减少,在12和24h时呈现出典型的细胞凋亡特征(膜气泡,核固缩、变形及染色质浓缩等)。流式细胞术检测,与对照组比较,随着作用时间的延长,15mg·L-1桦木醇组SW480细胞中处于Sub-G1期的细胞逐渐增多,即细胞凋亡率逐渐增加。caspase活力测定,与对照组比较,caspase-3和caspase-9活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。免疫印迹检测,与对照组比较,15mg·L-1桦木醇组SW480细胞中PARP出现断裂,凋亡蛋白Bcl-xL表达下调,cytochrome C表达上调,而Bcl-2蛋白表达无明显变化。结论:桦木醇可抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能是通过下调Bcl-xL表达启动线粒体介导的cytochrome C释放进而激活caspase-9凋亡途径实现。

桦木醇对卵巢癌细胞CAOV3增殖及凋亡的影响

目的:研究桦木醇对人卵巢癌细胞CAOV3的细胞增殖和凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度的桦木醇对CAOV3细胞生长的抑制效果,DAPI染色后观察细胞产生凋亡的形态学变化,流式细胞技术分析细胞凋亡,体外caspase活力测定凋亡相关蛋白caspase-3/-8/-9的激活情况,蛋白质免疫印迹技术检测caspase-3底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]断裂的情况。结果:桦木醇可有效地抑制CAOV3细胞的增殖并呈量-效关系,IC50值为8μg/mL;DAPI染色呈现典型的细胞凋亡特征,流式结果显示12 h后细胞凋亡率明显增加,caspase-3/-9活性显著上升,免疫印迹检测结果显示PARP断裂。结论:桦木醇抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖并诱导caspase参与的细胞凋亡,并且这种细胞凋亡涉及线粒体通路。

人参皂苷代谢产物CK诱导卵巢癌细胞CAOV3的凋亡机制

目的探讨人参皂苷代谢产物CK对卵巢癌细胞CAOV3的增殖抑制作用,及其诱导细胞凋亡的机制。方法采用MTT比色法测定不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0、50.0μg/ml)CK对卵巢癌细胞CAOV3增殖的抑制作用。流式细胞术检测不同浓度(0、2.5、5.0μg/ml)CK诱导CAOV3细胞凋亡的情况;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色观察细胞凋亡过程中形态变化;体外Caspase活力测定凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的激活情况;Western blot分析Caspase-3底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的断裂情况。结果 CK可明显抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖,CK浓度与其对细胞的增殖抑制作用呈剂量-效应关系,IC50值为3.6μg/ml。随着CK浓度的增加,发生凋亡的细胞数增加,出现典型的凋亡形态特征的细胞逐渐增多。Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9均被激活。随着CK浓度的增加,酶活性增加,Caspase-3底物PARP断裂的条带逐渐加深。结论 CK对卵巢癌细胞CAOV3有毒性作用,能够抑制细胞增殖,且CK浓度与这种抑制作用呈剂量-效应关系;CK抑制CAOV3细胞的增殖作用是通过促进细胞凋亡来实现的,且这种细胞凋亡涉及内源及外源型途径。