L-肉碱对母猪泌乳量及乳汁成分的影响

近年来的研究证实,对母猪补充L-肉碱能促进哺乳期仔猪的生长,但其作用机理尚不明确。本文结合近年来国内外的研究报道,从L-肉碱能促进母猪泌乳及其对乳汁成分影响方面分析,以阐明给母猪补充L-肉碱促进哺乳期仔猪生长的作用机理。

HPLC法测定牛奶中游离唾液酸和与低聚糖结合的唾液酸含量

利用酸水解法把牛奶中的唾液酸释放出来,以邻苯二氨盐酸盐(10mg/ml)为衍生化试剂,在80℃水浴锅中衍生40min。采用Symmetry C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1.0%的四氢呋喃水溶液(含0.2%磷酸)-乙腈(92:8);流速为1.0ml/min,柱温35℃,紫外检测波长为230nm。结果表明,唾液酸在10～320μg/ml范围内线性良好,平均回收率为95.7%。本方法具有灵敏度高,重复性好等特点,可准确测定牛奶中游离的唾液酸和与低聚糖结合的唾液酸含量。

猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达

从人肌肉素基因出发，在dbEST数据库中进行同源性搜索，找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag（DY426490，CF787546，AJ660979，AJ664670，AJ663820，AJ680159，DN106254）。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证，获得猪肌肉素基因全长cDNA序列，其全长651bp，开放阅读框为54～452bp，编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明，与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区（CDS）同源性分别为87．2％、77．6％和77．9％。利用克隆出的猪肌肉素cDNA，构建表达载体pGEX-4T-1-musclin，并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38．59kD的融合蛋白GST-Musclin，并运用蛋白印迹技术进行鉴定。

国标法对乳碱性磷酸酶的检测及其在巴氏消毒上的研究

采用国标法对乳中碱性磷酸酶(ALP)检测,结果显示:全乳和脱脂乳的酶活力分别为403.345、148.8147μg/ml,变异系数分别为1.30%、2.99%。与国标法的不同之处:乳样最佳稀释比为1∶25,苯酚的最佳浓度为50μg/ml;然后对其模拟巴氏消毒得出:63℃30 min基本使ALP灭活。

地塞米松对小鼠脂肪组织中孤啡肽及其受体基因表达的影响研究

目的:探讨地塞米松对孤啡肽及其受体mRNA在小鼠附睾脂肪组织中表达的变化。方法:将12只雄性昆明小鼠,随机分为正常组和地塞米松组,分别采集其脂肪组织,用RT-PCR方法检测孤啡肽及其受体mRNA水平的变化。结果:与正常组相比,地塞米松组孤啡肽及其受体的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。结论:地塞米松可能抑制孤啡肽及其受体基因的活性和合成,对孤啡肽及其受体基因的表达可能具有强烈的下调作用。

不同时期小鼠血浆中催乳素的变化

为了解不同妊娠期、泌乳期小鼠血浆中催乳素(PRL)水平的变化,采用放射免疫法测定血浆中PRL的水平。结果表明,妊娠期内PRL的水平先降后升,而在泌乳期内呈下降趋势,不同时期体内PRL的水平受多种因素的影响。

猪Musclin基因片段克隆与序列分析

【研究目的】克隆并分析猪musclin基因;【方法】肌肉组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;【结果】克隆的猪musclin基因片段与人、大鼠、小鼠同源性分别为86%、78%、75%,预测的氨基酸序列含有“KKKR”结构和与小鼠ANP、BNP、CNP蛋白的同源性区域;【结论】克隆了猪musclin基因片段并注册GenBank(Ac-cession.EF369511)。

不同时期小鼠血浆中孕激素的变化

[目的]了解不同妊娠期、泌乳期小鼠血浆中孕激素水平的变化。[方法]通过放射免疫法测定血浆中孕激素的水平。[结果]妊娠期内孕激素的水平先升后降,而在泌乳期内孕激素水平较稳定。[结论]不同时期体内孕激素的水平受多种因素的影响。

乳过氧化物酶体系对发酵奶产品的影响

介绍了乳过氧化物酶体系对不同发酵奶产品的产量、风味、外观和质地的影响,并阐明它对发酵奶产品生产的一些新用途。

绵羊尿鸟苷素基因的克隆与序列分析

克隆并分析了绵羊尿鸟苷素(uroguanylin)基因。根据同源序列克隆原理设计一对克隆引物,对绵羊十二指肠黏膜组织提取的总RNA进行RT-PCR,将PCR产物克隆、测序。绵羊尿鸟苷素基因与人、小鼠和猪的同源性分别为83%,77%和88%,推测的氨基酸构成一个模域。克隆了绵羊尿鸟苷素基因片断,为进一步研究绵羊尿鸟苷素基因的生物学功能提供了理论基础。

猪乳脂肪球表面因子8的克隆与表达分布

基于电子延伸序列,本试验成功克隆了猪乳脂肪球表面因子8(MFGE8)基因(GenBank登录号:EU559724)并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了MFGE8基因的组织分布规律。序列分析结果表明MFGE8开放读码框全长为1296 bp,编码431个氨基酸残基的多肽链,克隆的MFGE8基因与人、大鼠、小鼠、牛的同源性分别为71.9%、78.7%、79.1%、87.7%,推测的氨基酸序列的同源性分别为65.7%、74.0%、74.0%、84.5%。氨基酸序列N端含有Notch样"EGF"结构,C端含有FA58C结构域。构建的系统发育树显示猪与牛的亲缘关系最近。组织表达分析结果表明MFGE8在乳腺中表达最高,在大脑中表达量最低。

CCL25和CCL28及其相应受体CCR9和CCR10

CCL25和CCL28是CC趋化因子家族成员,主要表达于胸腺树突状细胞和黏膜上皮细胞,CCL25和CCL28相应的受体分别是CCR9和CCR10,表达于T淋巴细胞和B淋巴细胞。CCL25和CCL28及其相应受体对循环IgA浆母细胞和T淋巴细胞的归巢起重要作用,而且CCL28还具有广谱的抗微生物活性。