基于HPLC指纹图谱研究^(60)Co-γ辐射灭菌对烧伤灵酊有效成分的影响

目的考察^(60)Co-γ辐照灭菌对烧伤灵酊中虎杖苷、大黄素、白藜芦醇、大黄素甲醚、盐酸小檗碱5个有效成分含量的影响及辐照前后指纹图谱变化,为烧伤灵酊的灭菌方法提供参考。方法采用Agilent ZORBAX SBC_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)液相色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 ml/min;波长265,287 nm;柱温28℃,进样量10μl,建立烧伤灵酊HPLC指纹图谱。分别选择辐照剂量0,3,6,9 kGy对烧伤灵酊进行灭菌,比较辐照前后烧伤灵酊指纹图谱及5种有效成分含量的变化。结果当辐照剂量不超过6 kGy时,烧伤灵酊的HPLC指纹图谱无显著变化,虎杖苷、大黄素、白藜芦醇、大黄素甲醚、盐酸小檗碱含量变化无统计学意义(P>0.05)。结论^(60)Co-γ辐照灭菌法可用于烧伤灵酊的灭菌。

补肾活血方对慢性肾衰竭大鼠氧化应激、PI3K/Akt、Bcl-2/Bax的影响

【目的】探讨补肾活血方对慢性肾衰竭大鼠的治疗作用及机制。【方法】将40只SD大鼠分为正常组(10只)、模型组(9只)、补肾活血方低剂量组(10只)和补肾活血方高剂量组(10只)。除正常组外,其他组别大鼠采用腺嘌呤灌胃法复制慢性肾衰竭模型。造模成功后,补肾活血方低、高剂量组大鼠分别给予0.52、2.08 g/kg补肾活血方药液灌胃,每日1次,连续给药28 d。给药结束后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肾功能指标尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)和尿酸(UA)水平及肾组织氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察肾组织病理学变化,Western Blot法检测肾组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。【结果】(1)与正常组比较,模型组BUN、SCr、UA水平均上升(P<0.05);与模型组比较,补肾活血方低、高剂量组BUN、SCr、UA水平均显著下降(P<0.05)。(2)与正常组比较,模型组MAD水平上升,SOD水平下降(P<0.05);与模型组比较,补肾活血方低、高剂量组MAD水平下降,SOD水平上升(P<0.05);(3)与正常组比较,模型组肾组织中出现轻度坏死和炎性细胞浸润,肾小管扩张,肾小球变形等病理学变化;与模型组比较,补肾活血方低、高剂量组肾组织病理情况均有改善。(4)与正常组比较,模型组大鼠肾组织PI3K、Akt蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,补肾活血方低、高剂量组大鼠肾组织PI3K、Akt蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。(5)与正常组比较,模型组大鼠肾组织Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax蛋白表达水平上升(P<0.05);与模型组比较,补肾活血方低、高剂量组大鼠肾组织Bcl-2蛋白表达水平上升,Bax蛋白表达水平下降(P<0.05)。【结论】补肾活血方能够改善慢性肾衰竭大鼠肾脏损伤,其机制与减轻氧化应激、抑制PI3K/Akt信号通路、调控凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达有关。