脂肪干细胞的分离培养、生物学特性及其应用研究

对人体脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)进行原代分离、培养和鉴定,期望建立一套以自体移植治疗为目标的脂肪干细胞原代分离与培养扩增的标准方法,为研究类风湿性关节炎的移植治疗提供基础。使用K-SFM、M-199和DMEM-低糖3种培养基,分别培养分离的脂肪干细胞,比较细胞形态与传代、复苏活力;通过流式细胞仪检测细胞表面标志物CD34、CD45、CD73、CD105和HL-ABC,判断分离培养细胞的特异性与纯度,比较不同培养状态下细胞特征是否有差异;对几种培养条件下的细胞分别进行成软骨和成脂肪诱导,判断和比较不同处理之间干细胞特性是否有改变。经此方法得到的细胞通过流式细胞仪检测细胞表面标志物,符合脂肪干细胞的表面抗原特征,且干细胞纯度较高;而不同的培养体系下,细胞都有较好的适应性,传代或者冻存复苏后仍有较高的细胞活力;在成软骨和成脂肪的诱导实验中,细胞显示出较好的干细胞分化潜能。根据此优化方法,得到的干细胞通过质量检测,无异源物污染、无交叉污染、无遗传变异危险,并保持高活力与明显干细胞特性,可用于进行自体干细胞移植治疗类风湿性关节炎的基础研究。

采用SIFT特征的空基动态视频稳定技术

当采用空基平台对道路进行交通检测时,平台沿道路飞行,空基平台姿态不易控制且控制精度较低,此外,由于风速影响和平台自身振动等因素,检测获取的视频图像存在不必要的随机摇摆和抖动,为了去除抖动,改善观测效果,需进行动态观测模式下的视频稳定处理以实现稳定观测。采用改进的SIFT算法进行特征提取,提高了SIFT特征提取的效率,并根据动态视频相邻帧匹配的实际应用,采用邻域搜索方法进行特征匹配,提高了匹配的精度。得到精确匹配的特征点对进行运动参数估计,并采用Kalman滤波对运动参数平滑后进行视频图像的校正补偿,得到稳定的视频输出。该算法精度较高,稳定效果较好,能有效地实现空基平台动态视频稳定处理,便于交通监控,为后续的目标检测与跟踪提供了便利。

公司年度报告信息的披露管理--基于对业绩预告、年报、财务重述的比较分析

本文比较业绩预告、年报、财务重述的披露内容、时间选择及市场效应,在年度报告信息披露制度整体框架下分析公司的信息披露管理行为。研究发现,财务重述的弱市场反应规律已被上市公司利用以在较长时期内对年度报告信息的披露进行安排;恶意披露管理公司先在预告或年报披露不实好消息而后重述,或者蓄意逐步释放坏消息,知情者据此获取超常收益,进行市场剥夺。将业绩预告、年报、财务重述有机联系,从更长时期系统地分析、甄别与监管公司的恶意披露管理行为成为必要。

转化生长因子β3对人乳牙牙髓干细胞增殖和矿化能力的影响（英文）

背景:目前已有研究报道转化生长因子β超家族对各类干细胞成骨矿化的作用,但转化生长因子β3与肝素联合作用后对人乳牙牙髓干细胞的增殖和矿化能力的作用仍有待研究。目的:观察转化生长因子β3对人乳牙牙髓干细胞增殖和矿化能力的影响。方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,测定细胞集落克隆形成率,流式细胞术鉴定细胞表面标记物CD146,细胞爬片行Vimentin和STRO1免疫化学染色进行人乳牙牙髓干细胞鉴定;对体外培养的第3代人乳牙牙髓干细胞给予肝素和质量浓度1,5,25μg/L的转化生长因子β3进行干预。MTS法测细胞生长曲线;茜素红染色;碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性的改变。结果与结论:实验所得细胞集落克隆形成率高,细胞表面标记物CD146呈阳性,Vimentin和STRO1免疫化学呈强阳性,鉴定获得人乳牙牙髓干细胞。MTS结果显示,给予转化生长因子β3刺激人乳牙牙髓干细胞后并无明显的促增殖的作用。碱性磷酸酶活性检测结果显示,转化生长因子β3-肝素联合作用可随着浓度的增加而增强人乳牙牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性,其中质量浓度分别为5,25μg/L转化生长因子β3和肝素联合作用组与转化生长因子β3单独作用组、肝素单独作用组以及对照组相比显著性升高(P<0.01)。转化生长因子β3-肝素联合作用组的茜素红染色均呈阳性,其中以5μg/L转化生长因子β3-肝素联合作用组染色最强。结果证实,转化生长因子β3与肝素联合作用可促进人乳牙牙髓干细胞矿化能力。

丙泊酚对肝癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨丙泊酚对肝癌细胞株SMMC-7721侵袭特性和MMP-2、MMP-9的影响。方法不同浓度的丙泊酚处理SMMC-7721细胞,用Transwell小室模型测定SMMC-7721对细胞外基质Matrigel的侵袭力,明胶酶谱法检测培养上清液中MMP-2、MMP-9的变化。结果经过5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL的丙泊酚处理后,SMMC-7721侵袭力均明显下调,培养上清液中MMP-2、MMP-9的含量也明显下降。结论丙泊酚可抑制肝癌细胞株SMMC-7721的体外侵袭力,同时明显降低SMMC-7721细胞分泌基质金属蛋白酶。

体外活化Th17细胞最适条件的研究

目的:探索体外活化Th17细胞的适宜条件。方法:检测细胞表面CD69及细胞内IL-17的表达判断Th17细胞的活化效果,比较不同浓度(25、7、150、250 ng/ml)的佛波酯(PMA),联合离子霉素和莫能霉素刺激培养外周血单个核细胞(PBMC)4～6 h Th17细胞的活化效果;另比较最佳浓度的PMA与离子霉素、莫能霉素组合和Leukocyte Activation Cocktail试剂刺激培养人PBMC 4 h Th17细胞的活化效果。结果:在25 ng/ml PMA加入离子霉素处理3 h后再加莫能霉素刺激淋巴细胞3 h后,CD4+T细胞中CD69阳性细胞含量>90%,Th17细胞比例最高且结果稳定,而Leukocyte Activation Cocktail试剂刺激后CD69阳性细胞含量为30%～80%,含IL-17的CD4+T细胞未明显增多。结论:PMA 25 ng/ml加离子霉素(1μg/ml)刺激1 h后,加莫能霉素(1.7μg/ml)刺激培养3 h,为体外活化Th17细胞的适宜条件。

及时披露能抑制信息泄露吗?

以深交所2007-2009年披露年报的A股上市公司为样本,本文实证研究了我国上市公司信息披露的及时性对抑制信息泄露与内幕交易的现实效果。研究表明,年报披露及时性逐年提高,披露及时性与信息泄露程度显著负相关,及时披露对抑制信息泄露具显著效用;信息质量与及时性在抑制信息泄露方面具协同作用;与信息质量较好的公司比较,信息质量较差的公司因及时披露对信息泄露的抑制效果更显著,表明及时披露在抑制信息泄露方面对信息质量具替补作用。

人热激因子-1突变体hHSF190/2在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达及其活性研究

目的:在大肠杆菌和毕赤酵母中表达人热激因子(hHSF)-1突变体hHSF190/2,并对其活性进行研究。方法:利用分子克隆技术分别构建了hHSF190/2的原核表达质粒pET45b-hHSF190/2和真核表达质粒pPICZaA-hHSF190/2,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS和毕赤酵母GS115进行诱导表达;经纯化除去杂蛋白后,采用蛋白免疫印迹、电泳迁移率变动分析和蛋白转导等方法研究表达产物的功能和活性。结果:hHSF190/2在2个系统中均得到有效表达,都具有与热激元件(HSE)结合的活性,但真核表达产物与HSE的结合能力明显高于原核表达产物;原核及真核系统表达的hHSF190/2都能激发热激蛋白(HSP)70的表达,但真核表达的hHSF190/2活性更高。结论:hHSF190/2有望成为有治疗作用的蛋白药物。

转化生长因子β3诱导人乳牙牙髓干细胞向成牙本质样细胞的分化（英文）

背景:转化生长因子β3与肝素联合作用后对人乳牙牙髓干细胞的增殖和矿化能力的作用目前仍有待研究。目的:探讨转化生长因子β3对人乳牙牙髓干细胞向成牙本质样细胞分化的作用。方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,获得人乳牙牙髓干细胞;对体外培养的第3代人乳牙牙髓干细胞单独加入25μg/L重组转化生长因子β3、10 U/mL肝素,或者二者联合进行培养;通过Q-PCR和Western-blotting方法,分别检测乳牙牙髓干细胞中牙本质涎磷蛋白基因及牙本质涎蛋白表达的情况;通过碱性磷酸酶试剂盒检测乳牙牙髓干细胞碱性磷酸酶活性的改变。结果与结论:乳牙牙髓干细胞在诱导体系中生长状态良好。25μg/L转化生长因子β3+10 U/mL肝素联合作用组的碱性磷酸酶活性明显增强,与转化生长因子β3单独作用组、肝素单独作用组以及对照组相比差异有显著性意义(P<0.01);转化生长因子β3+肝素联合作用组的茜素红染色呈强阳性,Q-PCR和Western-blotting结果均显示,转化生长因子β3+肝素联合作用组的牙本质涎磷蛋白mRNA和蛋白表达均明显升高。结果可见在转化生长因子β3与肝素联合作用的诱导下,可促进乳牙牙髓干细胞分化为成牙本质样细胞。

CENTUM CS 3000系统概述

CENTUM CS3000对于大量生产到灵活丰富的自动化装置所需要的高度化、多样化过程控制都能适用,用PC机进行人-机通信和信息处理的控制系统。系统结构简单、可靠性高、扩展空间大,又可与既有系统兼容。

幼儿园课程游戏化的思考与探索

课程游戏化是当前幼儿园教育领域较为火热的一个话题,引起了广大幼儿教育工作者的关注与重视。如何科学地将课程游戏化教育理念落到实处,通过游戏点亮幼儿的童年是亟待幼儿教师解决的难题。文章立足幼儿园教育实践,以幼儿园游戏化课程为切入点,从具备明确的教育目标、尊重幼儿的主体地位、发挥教师的主导作用、体现在多样化的活动中、彰显幼儿园实际特色以及定期对教师进行培训六个方面入手,对幼儿园教师践行与实施游戏化课程教育理念应当注意的内容及策略进行了细致的阐述与探讨。

用音乐为作文教学插上飞翔的翅膀

音乐不仅能够激发人的灵感,更能提升人的审美水平。在当前浮躁和审美缺失的小学语文作文教育中,学生的想象力和审美都因为急功近利的教育方式而受到了很大程度的影响。将音乐穿插于小学语文作文教学课堂,不仅能够让学生在音乐中陶冶情操,还能激发学生的想象和学习兴趣,从而能确保小学语文作文教学质量不断提高。

灵芝液体培养工艺条件的研究

研究探讨灵芝液体培养的工艺条件。经试验结果表明 ,最适pH值为 6 ,温度为2 8℃ ,培养时间为 1 4 4h ,按此条件进行培养 ,灵芝菌丝体的产量为 1 4 g·L- 1,灵芝多糖得率为 1 .2g·L- 1。

中山市人民医院2017—2020年食源性疾病监测结果分析

目的分析中山市人民医院(哨点医院)食源性疾病监测结果。方法选用粪便多点采集法,收集样本并开展食源性病原菌检验。结果中山市人民医院2017—2020年共收治食源性疾病患者595例,检出致病菌均为沙门菌,其中以鼠伤寒沙门菌占比最高(53.9%);发病主要在6月(11.3%),可延长至10月;发病多在<5岁(53.8%),以散居儿童居多(43.7%);进食地点以家庭为主(72.9%);可疑食品为肉与肉制品(11.8%)。结论应加强夏秋季肉与肉制品市场监管,关注儿童饮食安全,注重家庭、社区食源性疾病防治知识的宣传教育。

CENTUM-CS3000在流量计自动计量的应用

1引言本公司生产过程的自控系统采用了YOKOGAWA(横河)公司的CENTUM-CS3000,该系统应用了最新的计算机控制技术,控制算法丰富。跟早期的CENTUM-V相比,组态更简单,操作更方便,更大程度上满足了生产装置对自动化控制水平的要求。