雷公藤甲素诱导肺癌细胞铜死亡的机制研究

目的 探讨雷公藤甲素诱导肺癌细胞铜死亡的分子机制。方法 培养人肺癌细胞系A549和H460,采用MTT法检测细胞活力和EdU实验检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;铜离子荧光探针检测细胞内铜浓度;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化;Western blot检测铁硫簇蛋白FDX1、POLD1、SDHB、LIAS和脂酰化蛋白DLAT单体及寡聚体蛋白表达水平,以及铜稳态调节蛋白CTR1、ATP7A、ATP7B表达水平。结果 MTT实验显示,雷公藤甲素呈浓度依赖性抑制肺癌细胞活力,对A549和H460细胞半抑制浓度(IC50)分别为74.67nmol/L和34.12nmol/L;Ed U实验和Transwell迁移实验证实,雷公藤甲素可显著抑制肺癌细胞增殖与迁移能力(P <0.05);在雷公藤甲素处理后,在荧光显微镜下观察到A549和H460细胞内铜浓度上升,线粒体膜电位下降。进一步通过Western blot实验发现,A549和H460细胞铁硫簇蛋白FDX1、POLD1、SDHB、LIAS和脂酰化蛋白DLAT单体表达下调,DLAT寡聚体表达增加(P<0.05)。铜稳态调节蛋白CTR1表达无明显变化,ATP7A和ATP7B表达下调(P <0.05)。结论 雷公藤甲素通过下调ATP7A和ATP7B表达,使细胞内铜浓度增加,进而下调铁硫簇蛋白表达水平、增加DLAT寡聚体表达水平,诱导肺癌细胞铜死亡,抑制肺癌细胞增殖与迁移。

赖氨大黄酸通过抑制HER-2信号通路诱导乳腺癌SK-Br-3细胞凋亡

为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用。应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting检测HER-2信号通路蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平;应用RT-PCR和免疫化学方法分别检测HER-2 mRNA和蛋白表达水平。结果显示,赖氨大黄酸能有效抑制乳腺癌SK-Br-3细胞增殖,作用48 h的IC50值为85μmol.L-1,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;Western blotting结果显示,赖氨大黄酸抑制HER-2蛋白表达和蛋白磷酸化,抑制NF-κB蛋白表达,升高p53和p21蛋白表达;RT-PCR和免疫化学结果表明,赖氨大黄酸能抑制HER-2 mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白表达。因此,赖氨大黄酸能有效抑制SK-Br-3细胞增殖,并诱导其凋亡,HER-2/NF-κB/p53/p21参与了赖氨大黄酸诱导SK-Br-3细胞凋亡的过程。赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的难题,并且能够通过HER-2信号通路诱导细胞凋亡,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物。

休眠品牌的品牌关系再续意愿影响因素的量表开发及测度检验

文章根据大量的市场观察,提出休眠品牌的概念,在回顾、梳理以往学者关于品牌关系的再续意愿影响因素方面已有的研究成果,通过深度访谈、专家意见、探索性因子分析和验证性因子分析,构建了非品牌危机导致休眠的休眠品牌的品牌关系再续意愿的影响因素的量表,检验结果表明该量表具有较高的信度和效度。

Klotho蛋白与血管内皮关系研究进展

血管内皮功能失调是诸多心血管疾病发生、发展的始动因子。冠心病患者及糖尿病患者血管内皮功能明显受损〔1,2〕。研究〔3〕发现Klotho(KL)基因缺陷小鼠的动脉发生类似人类动脉粥样硬化样病理变化及人类早衰样症状。本文探讨KL基因与血管内皮功能的关系及二者对老年相关疾病的影响。1 KL基因和蛋白的特征KL是以希腊纺织生命线的女神命名的,

休眠品牌与企业品牌融合机制研究

依据品牌生命周期理论、恢复营销理论和品牌资产、品牌权益、顾客价值之间的关系理论,提出企业为提升品牌竞争力可以考虑激活休眠品牌,利用品牌权益的遗留线索,建立休眠品牌与企业品牌的融合机制,即:休眠品牌的激活域甄别机制、休眠品牌激活成本与收益衡量机制和企业品牌规划机制,为企业真正激活休眠品牌、提升企业品牌资产提供指导性建议。

大黄酸对肿瘤细胞EGFR和HER-2靶点的作用及其作用机制

目的研究传统中药大黄中蒽醌类化合物之一大黄酸对乳腺癌细胞表皮生长因子受体家族EGFR和HER-2靶点的作用及其作用机制。方法通过Western Blot检测乳腺癌MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231、和MCF-7/ADR细胞中EGFR和HER-2的蛋白表达水平。用MTT方法检测大黄酸对乳腺癌细胞的增殖抑制作用。用RT-PCR方法检测大黄酸对EGFR和HER-2转录水平的影响。通过Western Blot方法研究大黄酸对乳腺癌细胞HER-2、p-HER-2、EGFR、p-EGFR蛋白表达的影响并研究相关的作用机制。结果MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231、和MCF-7/ADR 4株乳腺癌细胞系均显示EGFR高表达。关于HER-2,仅见SKBR-3细胞高表达;而MDA-MB-231和MCF-7/ADR细胞显示中等程度表达,MCF-7细胞低表达。大黄酸对乳腺癌MCF- 7、SKBR-3、MDA-MB-231、和MCF-7/ADR细胞增殖抑制的IC_(50)分别为28μg/ml、24μg/ml、24μg/ml和>100μg/ml。Western Blot研究结果表明大黄酸对HER-2、p- HER-2和p-EGFR蛋白表达有抑制作用,并且随着剂量的增加抑制作用增强,但对EGFR蛋白表达没有明显抑制作用。RT-PCR研究发现大黄酸抑制HER-2的mRNA的水平,从转录水平上发挥对HER-2蛋白表达的抑制作用。进一步研究表明大黄酸通过抑制表皮生长因子家族EGFR和HER-2的酪氨酸激酶磷酸化,进而抑制RAS-RAF- MEK-ERK信号通路,抑制肿瘤细胞增殖,而对NF-kB和AKT诱导的细胞凋亡通路没有明显作用。结论传统中药大黄中的蒽醌类化合物大黄酸能够抑制表皮生长因子家族EGFR和HER-2酪氨酸激酶的磷酸化,从而抑制了MAPK信号通路的磷酸化,达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。同时大黄酸可以从转录水平抑制HER-2的蛋白表达。

农村中小学教师培训主客体价值观实现度匹配对培训绩效作用的实证研究

文章从以往研究尚未解决的问题出发,基于重庆市农村中小学教师培训的实际情况,得出影响培训价值实现的影响因素,重点研究培训客体与主体的动态匹配,将培训客体与培训主体之间的价值观实现度匹配类型分为双高型、双低型、培训客体主导型和培训主体主导型四种类型,证明培训主客体培训价值观实现度匹配双高型的培训绩效较之其他类型最为显著;进而基于培训主客体动态匹配的视角,实现培训主客体价值观实现度的高度匹配,从而达到国培计划绩效的提高与价值的实现。

影响品牌关系再续因素的理论性探索

企业在创建品牌过程中,遇到许多顾客不断更换品牌,或者中止与品牌的关系,品牌关系再续成为企业营销管理中的重中之重。对影响品牌关系再续的因素分析,并进行以下分类:一类从影响因素的破坏程度来分类,分为导致品牌危机的因素和非导致品牌危机的因素。另一类从驱动因素类型的不同来分类,分为消费者驱动型因素、品牌驱动型因素、企业驱动型因素、品牌—顾客关系驱动型因素、竞争对手驱动型因素。由此提出再续企业品牌关系的策略。

休眠品牌的品牌关系再续意愿的影响因素分析

以往的研究已经证实休眠品牌的品牌关系再续意愿的影响因素为:初始品牌关系质量、品牌初始感知价值、品牌当前感知价值、品牌情感联结、品牌关系记忆、品牌关系断裂归因。但尚不清楚不同年龄的顾客对影响因素的程度是否相同。文章运用SEM分析中的平均数结构分析,结果发现:不同消费世代的消费者在品牌初始感知价值、初始品牌关系质量、品牌关系断裂归因于他因、品牌关系断裂感知时长、品牌地域情感联结、品牌当前感知价值和怀旧情感联结方面,年龄越大,强度越大。

大数据视阈下企业品牌管理创新的理论探析

大数据背景下,网络信息呈现多源、海量、动态化的特征,企业面临着信息传播和价值创造方式改变的巨大冲击。本文提出:企业可以利用先进的网络信息挖掘工具,对顾客的网络信息进行搜集、分类和分解,遵循品牌符号三角元素(符号媒介(名称/标志)→对象(企业/产品/对象)→解释项(企业表达/顾客感受))的内在一体化关系,构建以网络信息为依据、以顾客为主导的企业与顾客共同创造价值的企业三元(符号媒介(网络符号)、对象(虚拟产品)、解释项(顾客价值))驱动品牌管理模式,及时、无缝地对接顾客价值和企业价值,实现网络信息品牌化、产业化。这对企业品牌管理模式的创新具有一定的理论和实践意义。

休眠品牌的品牌关系再续及品牌激活策略研究

企业衰落,品牌资产随之流失,为节省培育新品牌的巨大开支以及减少社会资源的浪费,休眠品牌的激活至关重要。休眠品牌的品牌关系再续的影响因素为:品牌初始感知价值、品牌当前感知价值、初始品牌关系质量、品牌关系记忆、品牌关系断裂归因、品牌情感联结。目前激活品牌的策略是针对于老化品牌在品牌资产衰减和怀旧品牌提出的,应该探究休眠品牌的激活点,激活时要衡量品牌激活的财务成本,关注休眠品牌激活后的持续发展和品牌维护。

休眠品牌符号价值激活机制研究

由于各种原因，大量曾经辉煌的品牌产品的销售和服务长期停止，造成品牌进入休眠状态，品牌媒介符号被弃置。以符号学为工具，基于皮尔斯“三位一体”的符号模型，本文阐述了品牌三角激活的动态管理模式，据此提出再造和挖掘休眠品牌的符号价值，并利用品牌符号差异性，构建休眠品牌的符号价值激活机制，这不仅能为企业提供差异化的品牌竞争战略新思维，为品牌创造更大的利润空间，而且能创新操作性的、实践性的品牌认知结构和品牌管理工具。

“国培计划”对提升重庆市农村教师专业发展水平的价值实现路径研究

通过调研,提出"国培计划"乃至其他农村中小学教师专业发展的价值实现需要从国家立法以及相关制度保障、培训计划的宣传贯彻,培训需求的双向反馈机制,优质培训师资资源整合模式,多层面、差异性动态培训模式,导师引导制学习模式,搭建交流平台等多个层面实现。

顾客感知价值研究现状

本文通过回顾、梳理以往学者关于顾客感知价值的概念、特性、维度和结果因素的二十年研究成果,系统地对顾客感知价值的概念界定进行了五个方面的分类:理性权衡观、感性情感观;单维、多维观;过程、结果观;静态观、动态观;中间顾客价值观、最终顾客价值观。提出感知价值的主观性、动态性、多维性、过程性和情景依赖性五个特性,将顾客感知价值的维度分为两维度、三维度、四维度、多维度和综合维度,并对以往学者的驱动因素和结果因素进行系统整理,根据研究现状进行综合述评。

顾客主脑思维方式对品牌要素感知的差异性研究

以往的研究检验了人们对部分品牌要素的感知差异,主要是从企业销售和品牌命名的方面。文章从顾客的思维方式的不同分析对品牌要素的感知差异,通过实证分析发现:主左脑思维型顾客更容易感知品牌名称、品牌感知质量、品牌口号、广告语;主右脑思维型顾客更容易感知品牌标识、品牌图标、形象代言人、广告曲、包装设计、广告画面。这一结论为企业在进行品牌要素设计时可针对不同的顾客采用个别要素突出法提供启示,尤其是在设计广告中针对不同的受众来设计广告重点。

营销专业应用型人才分层培养模式的探索研究

目前,营销专业学生实践能力和创新研究能力的培养仍然面临着执行瓶颈,一方面培养方案不符合本校学生的实际情况;另一方面,知识培养与能力培养教学脱节,课程培养进程无法针对学生基础循序渐进。尤为严重的是所谓的校企合作机制形同虚设。基于这一研究背景,本文提出应用科技大学背景下的营销专业应用型人才的分层培养模式,这一模式的内容分为三个部分:①学生分层培养,实现人才培养效益最大化;②构建分层次人才培养模式的运行机制;③制定分层次人才培养模式的课程体系;④孵化分层次人才培养模式的保障机制。通过这一模式主要解决目前营销专业人才以应用和市场需求为导向培养的执行瓶颈问题。

顾客差异对休眠品牌激活的路径选择研究

文章旨在市场观察和透析已有文献关于休眠品牌激活对策的研究基础上,还原探索休眠品牌在消失后的品牌权益的线索遗留状态,并采用生物学的"激活域"的作用机理,以此构建休眠品牌的衍化机理到激活路径之间链接式的一体化应用模式,从根本上解决休眠品牌激活后的可持续研究,开拓企业品牌管理战略研究的新视角。通过实证研究提出针对不同消失时间的休眠品牌,在企业抉择激活后,对不同的消费者由于个体差异,采用的激活策略存在着一定的差异:对消失5年以内和消失10年以上的休眠品牌,忠实顾客采用老样式/老功能策略效果优于非忠实顾客,老样式/新功能策略、新样式/老功能策略在忠实顾客和非忠实顾客之间采用效果无显著差异;对消失5年至10年间的休眠品牌采用三种策略的效果,忠实顾客都优于非忠实顾客。但是,在性别方面,休眠品牌的三种激活策略无明显差异,效果相当。

基于能力递进式提升的促销策略课程的教学改革模式探索

文章结合市场营销专业的学科特色以及学生认知规律，基于市场营销专业的必修课——促销策略课程在实际教学中存在的弊端，即理论能力的片面性、实践能力提高难以及理论知识和实践能力割裂的问题，提出通过设置单项和综合能力（理论和实践能力）梯级递G进式提高的促销策略课程教学改进模式，采用模块化教学、全真市场化训练、全方位考核方式等相结合的方法，并且通过精细化管理手段，不断优化培养环节，以此培养满足企业就业需求的应用型营销高级人才。