基于数据非依赖型采集蛋白质组学分析劳力性热射病大鼠血浆蛋白的变化

目的采用数据非依赖型采集(DIA)蛋白质组学技术分析劳力性热射病(EHS)大鼠血浆蛋白表达的变化。方法取SPF级雄性SD大鼠10只,随机分为正常对照组(CON组,n=5)和EHS组(n=5),EHS组造模前1周完成温度遥测胶囊植入术,术毕恢复7 d后大鼠在人工气候舱内(温度40℃,相对湿度70%)跑步,监测核心温度达到42.5℃时视为发生EHS。停止跑步后采血进行DIA定量蛋白质组学分析。结果以表达倍数>1.5倍且P<0.05为筛选标准,共筛选出625个上调差异表达蛋白(DEPs)和8个下调DEPs。亚细胞定位注释表明,DEPs主要位于细胞外和细胞质;基因本体论(GO)注释显示,DEPs分子主要功能为蛋白质结合;京都基因与基因组百科全书(KEGG)注释显示,DEPs主要参与免疫反应、能量代谢等信号通路;同源蛋白簇(COG)注释显示,DEPs主要发挥翻译后修饰、蛋白质周转和伴侣功能。蛋白结构域富集分析显示,DEPs结构域主要集中在免疫球蛋白结构域、血小板反应蛋白1型结构域和补体Clr样EGF样结构域;GO富集分析显示,DEPs主要参与血液凝固和纤维蛋白凝块形成、纤溶酶原激活、急性炎症反应的调节等过程;KEGG富集分析显示,DEPs主要参与补体和凝血级联、免疫和细胞黏附分子等信号通路;Reactome通路富集分析显示,DEPs主要参与先天免疫系统、中性粒细胞脱颗粒和血小板活化等信号通路;蛋白互作网络分析发现,参与补体和凝血级联通路的蛋白网络互作较多,且以上调蛋白Fgg、Plg和Serpinc1为主。结论EHS明显改变大鼠血浆中蛋白表达谱,主要涉及免疫系统异常激活、炎症反应失控和凝血功能紊乱的信号通路。

血浆t-PAIC对热射病性凝血病的诊断价值

目的探讨血浆组织型纤溶酶原激活物-抑制剂复合物(t-PAIC)对热射病性凝血病(heat stroke-induced coagulopathy,HIC)的诊断价值。方法回顾性分析2018年5月至2023年9月解放军联勤保障部队第九〇八医院重症医学科收治的65例热射病患者,根据热射病严重程度分为热衰竭(heat exhaustion,HE)组(n=32)、热射病无凝血病(nHIC)组(n=13)和HIC组(n=20),比较三组患者t-PAIC水平变化,并进行相关性分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估t-PAIC诊断HIC的价值。结果与HE组比较,nHIC组和HIC组t-PAIC显著升高[ng/mL:2.69(1.46~5.07)vs.8.70(3.99~20.41)和21.99(12.36~43.27),P<0.05];与nHIC组比较,HIC组t-PAIC显著升高(P<0.05)。Spearman相关分析显示,热射病患者乳酸水平、APACHEⅡ评分与t-PAIC水平均呈正相关(相关系数r分别为0.500、0.645,P<0.001)。t-PAIC诊断HIC的曲线下面积为0.843(P<0.05);当t-PAIC截断值为11.43 ng/mL时,其敏感度为80.0%,特异度为82.2%。结论血浆t-PAIC水平与热射病严重程度相关,可作为诊断HIC的分子标志物。

脓毒症性凝血病修正评分系统的临床价值分析

目的探讨脓毒症性凝血病(SIC)修正评分系统的临床意义。方法回顾性分析第九〇八医院重症医学科自2018年5月至2021年4月期间收治的脓毒症患者,根据SIC修正评分分为普通脓毒症组(n=222)和脓毒症性凝血病组(n=120),比较两组患者入科2 h内的急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分、血常规、肝肾功能、乳酸水平和凝血功能试验指标;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析SIC修正评分系统对弥散性血管内凝血(DIC)和患者预后的判断价值;并与国际血栓与止血学会(ISTH)SIC评分系统进行比较。结果与普通脓毒症组的APACHEⅡ评分[(21.76±6.84)分]和重症监护病房(ICU)病死率(20.3%)比较,脓毒症性凝血病组患者的APACHEⅡ评分[(26.07±6.56)分]和ICU病死率(48.3%)显著升高(P<0.05)。与普通脓毒症组比较,脓毒症性凝血病患者的APTT及TT延长,纤维蛋白原及抗凝血酶水平下降,FDP和D⁃二聚体水平显著升高(P<0.05);血栓弹力图(TEG)的R及K值显著延长,Angle显著缩小,MA值显著增加(P<0.05);血浆TM、TAT及t⁃PAIC水平均显著升高(P<0.05)。ROC分析显示ISTH⁃SIC评分预测DIC发生的曲线下面积为0.91,ISTH⁃SIC评分界值为4分时,其敏感度和特异度分别为1.00和0.63。SIC修正评分系统预测DIC发生的曲线下面积为0.94,取修正SIC评分界值为4分时,其敏感度和特异度分别为1.00和0.73。SIC修正评分系统预测DIC发生的AUC显著高于SIC评分,且差异具有统计学意义(P=0.013)。结论SIC修正评分系统可以提高识别SIC和预测DIC发生的特异度。

序贯抗凝联合免疫吸附治疗对称性周围肢端坏疽

对称性周围肢端坏疽(symmetric peripheralgangrene,SPG)是一种罕见的严重疾病,由WiglesworthJ于1887年首次报道,特征是无主要血管闭塞而出现肢体远端缺血性改变的致命性并发症[1]。其急性期死亡率高达40%,幸存者截肢率达70%[2]。常见病因为脓毒症、休克、弥散性血管性凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)、风湿免疫病和天然抗凝剂活性缺乏等[3]。本文拟介绍1例脓毒症休克合并DIC导致SPG患者的成功救治。该SPG患者因脓毒症导致多器官功能衰竭,特别是并发脓毒症休克、DIC、脓毒症性心肌病和心源性休克、呼吸衰竭、肝肾衰竭和脓毒症脑病,救治难度大。本例使用多种器官支持手段,同时针对SPG采用了抗凝、抗炎和抗休克治疗,最终患者存活。以下对本案例在DIC的诊断、抗凝药物选择与监测、免疫吸附抗炎等方面进行介绍。

应用甲磺酸萘莫司他治疗脓毒症性凝血病的探讨

目的报告应用甲磺酸萘莫司他成功救治1例泌尿系结石并感染导致脓毒症性凝血病(sepsis⁃induced coagulopathy,SIC)的治疗体会。方法针对1例泌尿系结石并感染导致血小板显著减少的脓毒症性凝血病患者,在积极处理原发病的前提下,应用萘莫司他抗凝联合血液净化治疗,严格控制出血风险,择期进行手术。结果应用萘莫司他进行抗凝治疗后,体内部分活化凝血酶原时间(APTT)及血栓弹力图普通杯的凝血反应时间均明显延长。在未输注血小板的情况下,入院第4 d患者血小板计数由2×10^(9)/L上升至16×10^(9)/L。经行输尿管双J管置入术,术后尿量逐渐恢复,血小板计数恢复正常,患者痊愈出院。结论萘莫司他具有显著体内抗凝作用,可作为脓毒症性凝血病抗凝治疗的备选药物。

血栓调节蛋白和组织纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物在热射病中的诊断价值

目的探讨热射病时血栓调节蛋白(TM)和组织纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)的临床价值。方法回顾性分析解放军联勤保障部队第九〇八医院重症医学科2016年6月至2022年9月收治的45例中暑患者,根据中暑严重程度分为热衰竭组(n=23)和热射病组(n=22)。收集患者入科2 h内的常规凝血项目和血栓弹力图(TEG)指标以及血栓标志物TM、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、t-PAIC,并进行统计学分析。结果与热衰竭组患者TM[7.3(5.4,9.3)TU/m L]、TAT[2.6(1.5,7.2)ng/m L]、PIC[0.7(0.4,1.0)μg/m L]、t-PAIC[3.8(2.1,7.0)ng/m L]相比,热射病组患者TM[17.1(9.2,24.7)TU/m L]、TAT[23.4(10.4,44.3)ng/m L]、PIC[2.0(0.9,5.2)μg/m L]和t-PAIC[17.0(8.3,44.1)ng/m L]均升高(P<0.05)。单因素联合多因素Logistic回归分析显示,TM及t-PAIC为发生热射病的独立危险因素(P<0.05)。TM联合t-PAIC诊断热射病的ROC曲线下面积为0.916(95%CI:0.839~0.993,P<0.001),当TM>8.2 TU/m L、t-PAIC>8.7 ng/m L时,敏感性为95.5%,特异性为69.6%,阳性预测值为75.0%,阴性预测值为94.1%。结论热射病患者的TM、TAT、PIC和t-PAIC可升高,TM联合t-PAIC对热射病诊断有临床价值。

比较肝素酶修饰的血栓弹力图与APTT用于血液净化时肝素监测的临床研究

目的 研究肝素酶修饰的血栓弹力图(hmTEG)用于连续性肾脏替代治疗(CRRT)时肝素监测的临床价值。方法 选取2014年1月至2019年6月解放军第九〇八医院重症医学科进行血液净化治疗时用肝素抗凝的97例患者,总血液净化台次为278,依据血液净化抗凝时采用部分活化凝血酶原时间(APTT)监测或hmTEG监测,将患者分为APTT组和TEG组,比较两组患者血液净化前及第28天SOFA、血液净化总时间、肝素总剂量、滤器寿命与出血并发症情况,并进行生存分析。结果 与APTT组相比,TEG组的肝素总剂量明显增加、血液净化时间和平均滤器寿命明显延长(P<0.05);与APTT组的第28天SOFA相比,TEG组的SOFA明显更低(P<0.05);生存分析显示,APTT组患者的28天死亡风险是TEG组的2.01倍(P<0.05),TEG组的72 h滤器寿命较APTT组明显长(P<0.05)。结论 用hmTEG监测血液净化时的肝素抗凝更安全且可以延长滤器使用寿命,改善病情及病死率。

生脉饮对劳力性热射病大鼠凝血功能障碍的预防作用

目的探讨生脉饮口服液对劳力性热射病(EHS)大鼠凝血功能障碍的预防作用。方法SPF级雄性SD大鼠15只,均完成遥测温度胶囊植入术,术毕恢复1周后随机分为假手术组、热射病组、生脉饮组,每组5只。生脉饮组大鼠提前给予生脉饮0.02 ml/(g.d)灌胃5 d,热射病组及生脉饮组大鼠均在人工气候舱内(温度40℃,相对湿度70%)跑步,记录核心温度达到42℃时的运动时间及距离。采集3组大鼠血液,检测并比较其凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血小板计数(PLT)及血乳酸(Lac)、血栓调节蛋白(TM)、凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、血管性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平;观察3组大鼠肝、肾、肺、肠、心脏组织的病理改变。结果生脉饮组大鼠核心温度达到42℃时的运动距离及运动时间均较热射病组明显延长[(456.3±92.3)m vs.(282.8±87.5)m,P<0.05;(36.3±6.3)minvs.(21.7±7.0)min,P<0.05]。与对照组比较,热射病组大鼠PT及APTT均明显延长[(13.8±0.7)s vs.(9.9±0.7)s,P<0.05;78.3(36.0,120.0)s vs.19.0(16.6,22.5)s,P<0.05],Lac明显升高[(10.5±2.0)mmol/Lvs.(4.0±0.7)mmol/L,P<0.05],PLT明显降低[(590.3±80.2)×10^(9)/Lvs.(1750.3±283.0)×10^(9)/L,P<0.05],血浆TM、vWF、TSP-1及PAI-1水平均明显升高[2.1(1.8,2.7)ng/mlvs.1.6(1.5±1.7)ng/ml,P<0.05;(953.1±60.0)p g/m lv s.(462.3±37.0)p g/m l,P<0.05;(78.1±19.8)n g/m lv s.(59.3±12.0)n g/m l,P<0.05;(1945.7±74.5)ng/mlvs.(1487.6±259.1)ng/ml,P<0.05]。与热射病组比较,生脉饮组大鼠APTT明显缩短[36.6(31.1,46.1)svs.78.3(36.0,120.0)s,P<0.05],PLT明显增高[(980.5±302.4)×10^(9)/Lvs.(590.3±80.2)×10^(9)/L,P<0.05],血浆TM、vWF、PAI-1水平均明显降低[1.7(1.6,1.8)ng/ml vs.2.1(1.8,2.7)ng/ml,P<0.05;(701.6±32.0)pg/ml vs.(953.1±60.0)pg/ml,P<0.05;(1582.8±71.6)ng/mlvs.(1945.7±74.5)ng/ml,P<0.05]。热射病组大鼠的肝、肾、肺、肠、心脏病理学检查均可见血栓形成,生脉饮组大鼠病理学检查未见明显血栓形成。结论生脉饮可减轻EHS大鼠的血管内皮损伤,减少凝血因子与血小板的消耗,对凝血功能障碍有预防作用。

血浆透析滤过改善重症患者凝血功能障碍的临床分析

目的探讨血浆透析滤过(PDF)对重症患者凝血功能障碍的治疗作用。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月期间596例接受血液净化治疗的重症患者的临床资料,筛选出接受39台次PDF治疗的重症合并凝血功能障碍患者22例,并收集治疗前后的生化指标、常规凝血试验、血栓弹力图和新型凝血分子标志物等临床数据,并进行统计学分析。结果PDF治疗后,凝血功能障碍重症患者的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)较治疗前缩短,血小板计数下降,且具有统计学意义(P<0.05),但对纤维蛋白原、凝血酶时间、D-二聚体、抗凝血酶无明显影响(P>0.05)。经PDF治疗后,血栓弹力图的R时间、K时间较治疗前缩短,MA值和CI均治疗前增高,且有统计学意义(P<0.05)。经PDF治疗后,血浆血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)和纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)水平较治疗前可显著下降(P<0.05),但组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-复合物(t-PAIC)改变无统计学意义(P>0.05)。结论PDF治疗能够改善合并凝血功能障碍的重症患者的血管内皮细胞和凝血因子功能。

热习服对热射病康复后军人的热耐力及凝血功能的影响

目的探讨热习服对热射病康复后军人的热耐力重建的效果及凝血功能的影响。方法选取2022年6月至2022年9月我科收治的10名热射病军人患者,康复后在人工热室内进行为期5 d的热习服训练,并与10名健康军人对照,比较两组热习服训练第1 d和第5 d的运动时间、运动距离、耳鼓膜温度上升速度、脉率上升速度、生理应激指数(PSI)、常规凝血项目、血栓弹力图(TEG)指标、血栓调节蛋白(TM)、凝血酶⁃抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶⁃α2纤溶酶抑制物复合物(PIC)和组织纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂⁃1复合物(t⁃PAIC)水平。结果两组军人热习服训练第5 d的运动时间、运动距离均较训练第1 d显著延长,耳鼓膜温度上升速度、脉率上升速度、PSI均较训练第1 d显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。热射病军人训练第5 d的PSI高于健康军人训练第5 d的PSI,差异有统计学意义(P<0.05),但与健康军人训练第1 d的PSI相比无统计学差异(P>0.05)。热射病军人热习服训练前后的血小板计数、PT、APTT、TT、FIG、FDP、D⁃D、抗凝血酶、TM、TAT、PIC、t⁃PAIC和TEG的R时间、K时间、α角、MA、CI指标,均无统计学差异(P>0.05)。结论热室内主动热习服训练对军人热射病后热耐力重建效果显著,且在该运动条件下不会导致凝血异常。

大黄素对脓毒症后期小鼠血小板功能的调节作用

目的血小板的分泌、聚集功能失调与脓毒症炎症失控和凝血异常密切相关。文中研究大黄素对脓毒症后期小鼠血小板聚集、分泌功能的调节作用。方法将111只健康SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组(开腹后寻找盲肠后还纳)、盲肠结扎组(结扎大部分盲肠)和大黄素组[盲肠结扎后灌喂250 mg/(kg·d)大黄素],观察盲肠结扎术后72 h的生存率,检测血小板(PLT)计数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和肌酐(Cr)。采用血小板聚集仪检测血小板聚集率,流式细胞仪检测P-选择素,酶联免疫法检测五羟色胺(5-HT)血清浓度,RT-PCR检测Rab27 mRNA,Western blot检测Rab27b蛋白表达。结果假手术组、盲肠结扎组和大黄素组的盲肠结扎术后72 h存活率依次为100.0%、60.0%和66.7%。术后72 h,盲肠结扎组的血小板计数[(461.00±64.77)×10~9/L]较假手术组[(775.00±65.89)×10~9/L]明显降低(P<0.05);大黄素组[(635.20±83.57)×10~9/L]较盲肠结扎组明显升高,但低于假手术组(P<0.05)。盲肠结扎组的ALT[(194.02±31.85)U/L]和Cr[(1.94±0.29)mg/dL]均高于假手术组[ALT(41.55±1.24)U/L、Cr(0.72±0.11)mg/dL],差异均有统计学意义(P<0.05);大黄素组的ALT和Cr[(162.56±31.51)U/L、(1.53±0.30)mg/dL]较盲肠结扎组明显下降,但高于假手术组(P<0.05)。术后72 h时,盲肠结扎组的PLT聚集率和5-HT血清浓度依次为(12.67±4.04)%、(13.18±2.31)ng/L,较假手术组[(43.33±2.89)%、(34.35±5.79)ng/L]明显降低(P<0.05);大黄素组PLT聚集率为(24.67±2.52)%,较盲肠结扎组明显升高,但低于假手术组(P<0.05)。大黄素组的5-HT血清浓度(17.41±2.16)ng/L]与盲肠结扎组差异无统计学意义(P>0.05),但低于假手术组(P<0.05)。术后72 h时,盲肠结扎组的P-选择素表达率(16.78±1.6)%,较假手术组[(2.33±0.14)%]明显升高(P<0.05);大黄素组P-选择素表达率[(12.58±2.28)%]较盲肠结扎组明显下降(P<0.05),但高于假手术组(P<0.05)。假手术组、盲肠结扎组和大黄素组的盲肠结扎术后72 h的Rab27b mRNA水平为依次为(1.85±0.04)、(1.84±0.02)和(1.87±0.29),3组间差异均无统计学意义(P>0.05)。盲肠结扎组和大黄素组的Rab27b蛋白水平分别为(0.093±0.015)和(0.14±0.026),均显著低于假手术组(0.38±0.036),差异有统计学意义(P<0.05),但大黄素组与盲肠结扎组差异无统计学意义(P>0.05)。结论大黄素可改善脓毒症后期的血小板数量和聚集能力,通过下调P-选择素发挥抗炎作用,保护肝肾功能,降低脓毒症后期病死率。

创伤合并弥散性血管内凝血患者血栓弹力图诊断标准的临床研究

目的研究创伤合并弥散性血管内凝血(DIC)血栓弹力图(TEG)诊断标准的临床价值。方法回顾性分析2015年9月至2017年12月解放军第九四医院重症医学科收治的128例创伤患者,根据预后分为生存组(n=116)与死亡组(n=12),比较2组患者入院2h的TEG和常规凝血指标如血浆凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(TT)、纤维蛋白降解产物(FDP)和D-二聚体(D-Dimer),比较国际血栓与止血学会诊断标准与TEG诊断DIC发病率和病死率的相关性。结果与生存组K值[3.0(2.1~4.5) min]相比,死亡组K值[5.0(2.1~8.7) min]明显延长差异有统计学意义(P<0. 05);生存组α角[51.6°(40. 8~59.6)°]、血块最大强度(MA)[(51.82±13.07) mm]与凝血指数(CI)值[-2.9(-6.3^-0. 7)]均分别显著高于死亡组α角[39.5°(28.2~55.6)°]、MA值[(37.35±17.49) mm]和CI值[-6.85(-11.45^-2.73)]均明显降低(P<0. 05)。符合TEG-DIC诊断标准的DIC患者发病率较ISTH-DIC诊断标准升高(P=0. 048); TEG评分与病死率呈正相关(r2=0. 9423,P=0. 006)。结论 TEG可用于诊断创伤合并DIC和判断预后。

大黄素对脓毒症大鼠凝血紊乱治疗的作用

目的研究大黄素对脓毒症大鼠凝血功能紊乱的治疗作用。方法将90只健康的雌性SD(Sprague Dawley)大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、盲肠结扎组和大黄素组。收集盲肠结扎术后6、12、24 h的凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、血栓弹力图(TEG)普通杯及功能性纤维蛋白原杯参数,包括凝血反应时间(R)、血块形成速率(K)、血块形成动力学(Angle)、血块最大强度(MA)、凝血综合指数(CI)以及纤维蛋白原功能(FLEV)。观察各组大鼠48 h的生存率。结果假手术组、盲肠结扎组和大黄素组的盲肠结扎术后48 h生存率依次为100%、20%和40%。术后6 h,盲肠结扎组的APTT较假手术组均显著延长,大黄素组APTT较盲肠结扎组明显缩短;术后6、12、24 h,盲肠结扎组和大黄素组的PT较假手术组均明显延长,差异均有统计学意义(P<0. 05)。TEG普通杯结果显示盲肠结扎组中,K值在术后12 h显著降低(P<0. 05),α角、MA值以及CI值在术后12和24 h显著升高(P<0. 05)。大黄素组中,MA值以及CI值在术后12和24 h均显著升高(P<0. 05)。与假手术组比较,盲肠结扎组的α角在术后12 h显著升高(P<0. 05),MA值与CI值在术后6 h显著降低(P<0. 05)。TEG功能性纤维蛋白原杯结果显示盲肠结扎组中,α角在术后12 h显著增大(P<0. 05); MA值与FLEV值均在术后24 h显著升高(P<0. 05)。与盲肠结扎组比较,大黄素组的α角在术后12和24 h显著升高(P<0. 05),FLEV值及MA值在术后24h均显著升高(P<0. 05)。结论脓毒症大鼠的整体凝血状态表现为低凝倾向,凝血因子功能减弱,血小板及纤维蛋白原先减弱后增强。大黄素能够改善脓毒症大鼠内源性凝血因子活性和纤维蛋白原功能,降低脓毒症大鼠48 h病死率。

肝素酶修饰的血栓弹力图用于血液净化时肝素监测的临床研究

目的研究肝素酶修饰的血栓弹力图(hm TEG)用于持续性血液净化(CBP)时肝素监测的临床价值。方法选取2017年9月至2018年5月解放军第九四医院重症医学科进行CBP治疗时应用肝素抗凝的50例患者,依据CBP抗凝时采用部分活化凝血酶原时间(APTT)监测或hm TEG监测,将患者分为APTT组(19例)和TEG组(31例),比较2组患者血液净化前后序贯性器官衰竭评分(SOFA)评分差值、血液净化时间、肝素总剂量与出血并发症(包括置管处、口腔、鼻腔、胃肠道等部位)情况。结果与APTT组肝素总剂量[45(20~62.5) mg]相比,TEG组的肝素总剂量[73.5(29~84.5) mg]明显增加(P<0. 05);与APTT组的血液净化时间[23(14~29.5) h]相比,TEG组的血液净化时间[26.8(20. 00~47.25) h]明显延长(P<0. 05);与APTT组的SOFA评分减少差值(1.16±1.15)相比,TEG组的SOFA评分差值(2.16±0. 95)明显增加(P<0. 05); 2组间出血并发症比较差异无统计学意义(P>0. 05)。结论应用hm TEG监测CBP时的肝素剂量可以延长滤器使用时间,疗效优于使用APTT监测。

应用血栓弹力图评价乌司他丁的体外抗凝作用

目的应用血栓弹力图仪评价不同剂量乌司他丁的体外抗凝作用。方法招募健康志愿者20名,男10名,女10名,从肘静脉采集静脉血4 mL,按乌司他丁剂量设置空白对照组、低剂量组(1000 IU/mL)、中剂量组(2000 IU/mL)和高剂量组(4000 mL/IU),同时检测血栓弹力图,并对R值、K值、α角、最大振幅(MA)和综合凝血指数(CI)参数进行统计学分析。结果与对照组比较,低、中、高剂量组的R值和K值均显著延长(P<0. 05),α角、MA和CI均显著降低(P<0. 05)。与低剂量组比较,中剂量组和高剂量组的R值均显著延长(P<0. 05),MA和CI均显著降低(P<0. 05)。针对健康男性,对照组与低剂量组在各项指标上均差异无统计学意义(P>0. 05);与对照组与低剂量组比较,中剂量组和高剂量组的R值和K值均显著延长(P<0. 05),MA和CI均显著降低(P<0. 05)。针对健康女性,与对照组比较,低、中、高剂量的R值和K值均显著延长(P<0. 05),α角、MA和CI均显著降低(P<0. 05),但低、中、高剂量组间的R值、K值、α角、MA和CI差异无统计学意义(P>0. 05)。结论乌司他丁在体外能够明显抑制凝血因子活性、降低纤维蛋白原及血小板功能,促使机体形成低凝状态。这种体外抗凝作用与剂量和性别显著相关。

严重创伤患者不同时相凝血功能紊乱的临床特征

目的探讨严重创伤患者不同时相凝血功能紊乱的临床特征。方法对2015年9月-2019年7月解放军联勤保障部队第908医院重症医学科收治的279例严重创伤患者进行回顾性分析,根据入科时的凝血状况分为普通创伤组(n=187)、创伤性凝血病组(n=44)和创伤性弥散性血管内凝血(DIC)组(n=48)。收集各组入科2 h内的血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)、部分活化凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(DD)、抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)、纤维蛋白原降解产物(FDP)以及血栓弹力图(TEG)参数[凝血反应时间(R)、血块形成速率(K)、血块形成动力学(α角)、血块最大强度(MA)和凝血综合指数(CI)],比较3组上述各指标,采用ROC曲线分析FIB诊断创伤性凝血病的诊断效能。结果与普通创伤组的APTT[30.8(27.3,35.7)s]、PT[14.0(12.7,15.1)s]、K时间[2.3(1.8,3.4)min]比较,创伤性凝血病组的APTT[44.2(34.1,58.4)s]、PT[18.1(17.2,19.1)s]、K时间[3.3(2.1,7.1)min]明显延长(P<0.05)。与普通创伤组的α角[57.8(47.1,65.2)°]、MA[57.8(47.1,65.2)mm]、CI[–1.9(–4.3,0.3)]比较,创伤性凝血病组的α角[48.3(35.3,59.6)°]、MA[51.0(34.7,58.8)mm]、CI[–4.2(–7.9,–1.3)]明显减小(P<0.05)。与创伤性凝血病组的DD[2.9(0.9,7.3)mg/L]、FDP[17.3(5.4,60.5)mg/L]比较,创伤性DIC组的DD[23.1(10.4,33.3)mg/L]和FDP[79.2(38.2,147.4)mg/L]显著升高(P<0.05)。与创伤性凝血病组的R[7.2(5.8,8.8)min]、K[3.3(2.1,7.1)min]比较,创伤性DIC组的R[10.4(8.1,16.7)min]、K[7.9(4.6,18.1)min]显著延长(P<0.05)。与创伤性凝血病组的PLT[117(85,152)×109/L]、FIB[1.66(1.20,2.96)g/L]、α角[48.3°(35.3°,59.6°)]、MA[51.0(34.7,58.8)mm]和CI[–4.2(–7.9,–1.3)]比较,创伤性DIC组的PLT[75(38,105)×109/L]、FIB[0.91(0.64,1.61)g/L]、α角[32.3°(18.6°,43.9°)]、MA[33.6(23.2,44.9)mm]和CI[–11.0(–18.7,–6.9)]均显著降低(P<0.05)。结论严重创伤时凝血紊乱的不同时相分别以纤溶亢进、低纤维蛋白原血症和血小板减少为主要特征,可为凝血复苏分级策略提供依据。

创伤性肺损伤相关凝血病的预警指标及其临床价值分析

目的探讨创伤性肺损伤(TLI)相关凝血病的预警指标及其临床价值。方法回顾性分析2015年9月-2019年11月解放军联勤保障部队第908医院重症医学科收治的159例TLI患者的基础资料及入科时的血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、纤维蛋白降解产物(FDP)和血栓弹力图(TEG)参数。依据TLI患者90 d预后分为生存组(n=141)与死亡组(n=18),采用多因素Cox回归分析和ROC曲线分析筛选出危险因素INR,并根据INR截断值分为INR≥1.36组(n=49)与INR<1.36组(n=110),进行组间比较及生存分析。结果生存组INR、乳酸(Lac)、创伤严重程度(ISS)评分明显低于死亡组(Z=–4.493、–3.481、–3.177,P<0.01),APTT、PT、R时间、K时间明显短于死亡组(Z=–3.275、–4.325、–3.300、–2.278,P<0.01),氧合指数、PLT、HGB、AT-Ⅲ、血块最大强度(MA)、血块形成动力学(Angle)、凝血综合指数(CI)明显高于死亡组(Z/t=–4.053、–2.764、0.269、–2.159、–3.058、–3.294、–3.016,P<0.01)。多因素Cox回归分析结果显示,INR与TLI患者死亡明显相关(RR=4.882,95%CI 1.263~18.870,P=0.022)。ROC曲线分析结果显示,INR判断TLI患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.826(P<0.0001),敏感度为0.788,特异度为0.752,截断值为1.36。INR<1.36组生存率明显高于INR≥1.36组(P<0.0001)。与INR<1.36组比较,INR≥1.36组Lac、ISS评分均明显升高(P<0.05),APTT、PT、K时间均明显延长(P<0.05),氧合指数、PLT、HGB、AT-Ⅲ、MA、Angle、CI均明显降低(P<0.05)。结论INR≥1.36可作为TLI相关凝血病发生的预警指标,TLI相关凝血病患者的死亡风险明显增加。

TERT过表达及RNA干扰慢病毒载体对缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖影响

目的探讨端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)过表达及RNA干扰慢病毒载体对缺氧肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的影响。方法分别构建Plvx-IRES-ZsGreen1-TERT过表达载体和Plvx-shRNA2-TERT干扰载体,培养PASMCs后分为正常对照组、缺氧对照组、空白载体组、TERT过表达组和TERT干扰组,采用CCK-8法进行细胞增殖能力检测,采用流式细胞仪法进行细胞凋亡和细胞周期检测。结果 Plvx-IRES-ZsGreen1-TERT过表达载体和Plvx-shRNA2-TERT干扰载体构建成功后均经测序验证序列正确。缺氧对照组在24 h和48 h时吸光度值较正常对照组明显增加,低氧48 h时G1期细胞比例明显下降,S期细胞比例明显升高,细胞凋亡比例减少(P<0.05);TERT过表达组在低氧24 h和48 h时的吸光度值较缺氧对照组明显升高,低氧48 h时G1期细胞比例较缺氧对照组明显减少,S期细胞比例明显升高(P<0.05);TERT干扰组在低氧24 h和48 h时的吸光度值较缺氧对照组明显减少,低氧48 h时G1期细胞比例较缺氧对照组明显升高,S期细胞比例明显下降,细胞凋亡比率明显升高(P<0.05)。结论低氧时TERT RNA干扰能促进细胞凋亡,减少PASMCs核酸合成,从而抑制PASMCs增殖。

血栓调节蛋白对脓毒症性凝血病的诊断价值

目的研究血栓调节蛋白(TM)对脓毒症性凝血病(SIC)的临床诊断价值。方法选取解放军联勤保障部队第908医院重症医学科2018年5月-2019年10月收治的172例脓毒症患者。按国际血栓与止血学会(ISTH)2017年发布的SIC诊断标准将患者分为SIC组(n=68)与普通脓毒症(SA)组(n=104),比较两组患者的临床资料[性别、年龄、急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、平均动脉压(MAP)、血乳酸(Lac)、合并疾病、ICU病死率及ICU住院时间]、常规凝血指标[血浆凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、血小板计数(PLT)]及凝血分子标志物[组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物(t-PAIC)、血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)]的变化,应用logistic回归分析SIC的危险因素,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析凝血分子标志物对SIC的诊断效能,Kaplan-Meier生存分析法比较不同TM分组患者的生存率。结果与SA组的TM[10.5(7.8~14.9)TU/ml]、TAT[8.6(4.8~18.0)ng/ml]及t-PAIC[11.6(7.1~22.2)ng/ml]比较,SIC组的TM[15.0(10.5~25.9)TU/ml]、TAT[15.1(5.7~34.6)ng/ml]及t-PAIC[22.1(11.0~39.1)ng/ml]水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,TM及血乳酸升高是SIC的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,TM诊断SIC的曲线下面积为0.685;当TM界值为11.5 TU/ml时,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为72.1%、61.5%、55.2%、77.1%。生存分析结果显示,TM>11.5 TU/ml的脓毒症患者死亡风险是TM≤11.5 TU/ml脓毒症患者的3.61倍。SOFA≥2分且TM>11.5 TU/ml患者的病死率为47.2%(42/89),不符合该标准患者的病死率为14.5%(12/83);符合ISTH-SIC诊断标准的患者病死率为47.1%(32/68),不符合该标准的患者病死率为21.2%(22/104)。结论TM>11.5 TU/ml时脓毒症患者死亡风险升高,联合SOFA≥2分可为诊断SIC提供参考。

大黄治疗脓毒症凝血功能紊乱患者的临床观察

目的研究大黄对脓毒症时凝血功能的影响并探讨其作用机制。方法选取脓毒症患者20例,于大黄给药前、给药后1、4、24 h采血,并检测白细胞计数、降钙素原、C反应蛋白(CRP)、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶原时间(APTT),纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白降解产物(FDP)、D-二聚体(DD)、抗凝血酶3(AT3)以及血栓弹力图。结果与4 h时比较,1 h和24 h时的DD明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);与4 h时比较,0h、1h、24h时的Angle角和MA值均显著升高,但1 h时的K值明显缩短(P<0.05);与0 h相比,24 h的CRP明显降低(P<0.05)。结论脓毒症时,患者表现为DD的显著升高。大黄能够改善脓毒症患者的纤维蛋白原功能、血小板功能、纤溶功能,并能调控炎症反应。