固定化c-ω-转氨酶催化合成(4S)-四氢萘酮

以T4噬菌体衣壳为载体,探索了海绵假弧菌-ω-转氨酶(P-ω-TA)的自组装固定化,以将P-ω-TA与T4噬菌体非必需小外壳蛋白(Soc)融合的方式实现了P-ω-TA在T4噬菌体衣壳上的亲和固定及较高的位点结合数。对固定化P-ω-TA的适应性、回收性能、(S)-型异构体选择性拆分及(1S,4S)-去甲基舍曲林的催化能力进行了测试。结果表明,固定化的P-ω-TA保持了完整的活性及适应性,可通过离心操作轻松地回收,并进行重复使用。在5次回收和重复使用过程中,每次酶活回收率均>91%,经5次催化,最终酶活保持率约为84%。固定化P-ω-TA保持了在底物手性中心处的(S)-型异构体选择性拆分以及对(1S,4S)-去甲基舍曲林的催化能力。

固定化海洋脱氮假弧菌转氨酶实现可循环生物催化

海洋脱氮假弧菌ω-转氨酶区别于以往报道的ω-转氨酶,可实现对催化中心的远端手性位点的立体选择性识别,这种独特的(S)-型转氨基催化活性使其可在1-四氢萘胺和1-氨基茚满的脱氨基反应中发挥高效效用。但酶材料的生产及使用成本限制了其应用。以可高效保留酶的精细化功能的T4噬菌体衣壳为固定化材料,通过将海洋脱氮假弧菌ω-转氨酶与T4噬菌体衣壳附加蛋白Soc构建融合,成功实现了海洋脱氮假弧菌ω-转氨酶位于T4噬菌体衣壳Soc结合位点的结合固定。固定化酶保留了较好的催化活性,且每轮回收的酶活平均保留率>92%。该方法基于Soc蛋白及T4噬菌体衣壳间的高生物亲和性以生物材料建立了海洋脱氮假弧菌ω-转氨酶的酶活精细化固定化方式,实现了对酶催化活性的高效回收,有望推动海洋脱氮假弧菌ω-转氨酶的应用发展。