生姜两种提取物的药效物质基础研究

目的 通过对比生姜水提和绞汁两种提取物药理作用和化学成分的差异,从而研究生姜的药效物质基础以及为指导生姜临床上的合理应用提供科学依据。方法 采用酵母致热的大鼠模型,比较生姜水提和绞汁两种提取物的解热作用差异;采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,比较生姜水提和绞汁两种提取物的抗炎作用差异;通过对比生姜水提和绞汁两种提取物对DPPH自由基清除能力的大小,从而比较其抗氧化作用的差异。采用高效液相色谱法,测定生姜水提和绞汁两种提取物中6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚的含量;采用紫外分光光度法,测定生姜水提和绞汁两种提取物中总多糖的含量;采用BCA蛋白浓度检测法(bicinchoninic acid)测定生姜水提和绞汁两种提取物中总蛋白的含量。结果 生姜水提物对酵母致热的大鼠模型体温改善作用不明显(P>0.05),而生姜绞汁提取物能显著改善酵母致热的大鼠模型(P<0.05);生姜水提物对二甲苯导致小鼠耳肿胀的模型具有显著的改善作用(P<0.05),而生姜绞汁提取物的改善作用不明显(P>0.05);阳性对照药物维生素C、生姜水提物和生姜绞汁提取物对DPPH自由基清除率分别为79.68%、78.36%和76.52%;生姜水提物中的6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚含量分别为0.259 6 mg/g, 0.027 18 mg/g和0.026 79 mg/g,生姜绞汁中的6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚的含量分别为0.161 3 mg/g、0.020 82 mg/g和0.034 99 mg/g;生姜水提物和生姜绞汁提取物中总多糖含量分别为1.790 mg/g和1.390 mg/g;生姜水提物和生姜绞汁提取物中总蛋白含量分别为9.90 mg/g和7.840 mg/g。结论 生姜水提物的解热作用不及生姜绞汁提取物,但生姜水提物的抗炎作用要明显优于生姜绞汁提取物,生姜水提物和生姜绞汁提取物均具有明显的抗氧化作用。因此,生姜临床应用时,发挥其解热作用时应选用其绞汁提取物,发挥其抗炎作用时可选用其水提物,发挥其抗氧化作用时两种提取物均可。生姜水提物中6-姜酚、8-姜酚、总多糖和总蛋白的含量比生姜绞汁提取物相对较多,而10-姜酚的含量比生姜绞汁提取物相对较少,两种提取物化学成分含量的差异是其不同临床应用的物质基础。

基于抗炎作用的蒲公英清热解毒物质基础研究

目的探究蒲公英清热解毒的药效物质基础。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,比较蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物的抗炎作用差异;通过高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),对比蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物中次生物质木犀草苷、绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、秦皮乙素5种成分含量的差异;采用苯酚-硫酸比色法和考马斯亮蓝法分别对比蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物中初生物质多糖和蛋白含量的差异;通过离子交换色谱法分离纯化蒲公英鲜品中的多糖和蛋白类成分,进一步研究其清热解毒的物质基础。结果蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物组小鼠的耳肿胀率分别为0.59、0.85、0.94,其中蒲公英鲜品匀浆提取物中次生物质的含量最低,而初生物质多糖和蛋白类成分含量最高,多糖组和蛋白组小鼠的耳肿胀率分别为0.45、0.74。结论蒲公英鲜品的抗炎作用优于干品,而且鲜品和干品中次生物质含量差异较小,初生物质中多糖和蛋白的含量差异大,通过进一步研究分离纯化后多糖和蛋白的抗炎作用差异,结果表明蒲公英鲜品中的多糖类成分是发挥清热解毒作用的主要物质基础。

基于超高效液相色谱—串联质谱同时测定大鼠血浆中杜仲制剂的药代动力学研究

目的 建立用于血浆中杜仲各成分含量测定的超高效液相色谱—串联质谱的方法,并进行杜仲及其制剂各成分的药代动力学研究。方法 SD大鼠口服不同的杜仲制剂后,于不同的时间点收集血浆样品,以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,采用安捷伦SB C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.8μm)进行分离;在多反应监测模式下,负离子模式测定;通过Phoenix Winnonlin 8.1软件计算药代动力学参数。结果 原儿茶酸、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷、无梗五加苷、松脂醇葡萄糖苷、京尼平苷、绿原酸、咖啡酸分别在3.2-2000,3.3-2044,0.6-2028, 0.6-1770,0.3-2036,0.6-2004,0.5-1596,0.7-1090 ng/mL范围内,线性良好;专属性、准确度、精密度、稳定性、回收率和基质效应均符合生物样本检定要求。采用非房室模型分析,8个成分在AUC_(0-∞)、t_(1/2z)、T_(max)、C_(max)、V_(z)/F、Cl_(z)/F、MRT_(0-∞)方面均不相同。结论 该方法灵敏度高、专属性强、准确性好,可用于杜仲成分在大鼠体内的药代动力学研究。不同杜仲制剂在大鼠体内的释药速度、起效快慢及作用强度均不相同,在临床应用上具有指导意义。

基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变和类风湿性关节炎“异病同治”的作用机制

目的 运用网络药理学方法和分子对接技术,从益气活血的角度探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)和类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)“异病同治”的作用机制。方法 本研究运用网络药理学,从中医“同治异病”的角度探讨黄芪桂枝五物汤治疗DPN、RA的作用机制。结果 黄芪桂枝五物汤治疗DPN、RA都采用了益气温经、和血通痹的治疗方法,证实了DPN、RA在其证候特点的相同点,也推出了两者“异病同治”的客观存在性。黄芪桂枝五物汤对DPN和RA的治疗作用主要是通过整体调控晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products, AGEs)—糖基化终末产物受体(receptor of AGEs, RAGE)信号通路实现的,但对不同病变有不同的侧重点。DPN的治疗主要通过抑制神经元凋亡和刺激突触再生来保护神经。RA的治疗往往依赖于对肿瘤坏死因子(transforming necrosis factor, TNF)信号通路、Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)信号通路、白介素17(interleukin 17,IL-17)信号通路等炎症相关通路的调节,以减少炎性因子,调节免疫。结论 黄芪桂枝五物汤可通过相同途径和不同途径治疗DPN、RA,两者虽有相通之处和内在联系,但也有不同之处,故应着眼于不同的方向,为研究提供新的启示。

基于“甘能缓”理论探讨甘草在经方中的作用

本研究从阴阳五行学说为切入点,根据五行之间的相生、相克、相乘、相侮传变规律说明甘味药如何从五脏、六气以及药之偏性展示生克制化关系,阐释阴阳五行之间相互资生、相互制约的联系。“甘者缓也”,甘味药具有缓和、缓急的作用,通过药物本身具有的特性或者药对配伍起到缓和药物的偏性,达到减毒增效以及缓解以急迫、紧张为主要表现的病证等目的。而甘草,是甘味药物最具有代表性的药物,不管在组方中是君药还是佐使药,其发挥甘缓之性的作用是一致的。甘草“甘缓”的特性可以总结为缓病之急、缓药、解毒三种作用,并且不同的炮制方法对甘草发挥甘缓的作用也有所不同,体现出炮制后功效的差异性、独特性,这也展示了古代医家用药的缜密。最后,甘草虽然应用广泛,但亦有病情急迫、邪实等使用禁忌,要熟知甘草甘缓的实质及在其组方中的配伍规律、禁忌,通过辨证施治,真正发挥“国老”的作用。

生物质与煤共热解动力学特性研究

运用热重法对煤单独热解以及煤与生物质共热解特性及反应动力学进行了研究。研究了生物质的加入对煤热解特性的影响,重点考查了升温速率和掺混比对生物质与煤共热解特性的影响。生物质的加入能有效促进煤中挥发分的析出。采用Coats-Redfern法求出了煤热解及生物质与煤共热解时的动力学参数,煤与生物质共热解表观活化能变化范围在20~30 k J/mol。

桂枝汤在肠道不同部位的吸收研究

目的研究桂枝汤在肠道不同部位的吸收特征。方法采用大鼠肠外翻模型,HPLC检测不同浓度桂枝汤中甘草苷、芍药苷、肉桂酸和甘草酸在肠道不同部位的吸收浓度,计算各成分的吸收参数,并分析它们在肠道不同部位的吸收特征。结果不同浓度桂枝汤中甘草苷、芍药苷、肉桂酸和甘草酸在各肠道均为线性吸收,R2均大于0.9,符合零级吸收速率;甘草苷在十二指肠、空肠、回肠,芍药苷、肉桂酸和甘草酸在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的吸收速率常数(Ka)均随桂枝汤浓度的增加而增加(P<0.05),符合被动吸收;甘草苷在结肠中的吸收速率常数(Ka)随桂枝汤给药浓度的增加没有差异,符合主动转运;桂枝汤中甘草苷的最佳吸收部位为结肠,芍药苷和甘草酸的最佳吸收部位为十二指肠,肉桂酸在十二指肠和回肠中吸收均较好。结论肠道不同部位对桂枝汤中不同成分的吸收具有一定差异,除甘草苷在结肠部位为主动吸收外,所有被测成分在不同肠道均为被动吸收形式。

冠心病痰瘀互结证与炎症生物学指标相关性探讨

痰瘀互结证是冠心病的主要证候类型。在冠心病发生、发展的全过程中都伴随着炎症反应。既往研究表明,以下13个炎症相关指标与冠心病痰瘀互结证存在一定相关性。分别是:C反应蛋白、同型半胱氨酸、细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-18、MMPS、MCP-1、M-CSF)、免疫细胞膜分子(CD4\CD4L、PS\PSL、ICAM-1)和脂蛋白(Apo A-Ⅰ、α1-AT)。其中已被公认为冠心病独立危险因素的C反应蛋白、同型半胱氨酸研究证据最多。另外,冠心病患者血中大部分炎症因子水平随着非痰瘀证→痰证/瘀证→痰瘀互结证依次升高,提示痰瘀互结证患者较其他证候炎症程度增高。这些指标有助于痰瘀互结证的客观评估。

离子色谱法测定大蒜多糖的单糖组成和含量

目的建立测定大蒜多糖的单糖组成和含量的离子色谱法。方法以氨基酸分离柱,氢氧化钠/醋酸钠溶液梯度洗脱,脉冲积分安培检测器（Au为工作电极,Ag/AgCl为参比电极）检测,测定大蒜多糖水解产生的单糖组成及含量。结果大蒜多糖主要由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、果糖等单糖组成,各单糖基本达到分离,线性关系良好,相关系数均〉0.998,平均回收率均在95%～105%之间。结论所建立的方法准确、简单,可用于大蒜多糖中单糖的含量测定和质量控制。

锌盐催化尿素和1,2-丙二醇合成碳酸丙烯酯

考察了各种锌盐催化尿素和1,2-丙二醇(PG)合成碳酸丙烯酯(PC)的催化性能。几种催化剂中,氯化锌具有最佳的催化性能。以氯化锌为模板催化剂,考察了反应条件如:反应温度、反应时间和催化剂用量对催化效果的影响。结果表明,在尿素3.0 g、PG 7.62 g、反应温度170℃、反应时间3 h、催化剂用量0.4 g时,PC收率可达到82.9%。傅里叶红外表征进一步说明,催化剂的催化活性与它们活化尿素分解为异氰酸的能力有关;然后,异氰酸与催化剂作用生成中间物种,在PG的作用下最终生成PC。最后,基于以上催化测试和表征结果,提出了尿素和PG反应合成PC可能的催化反应机理。

参附注射液临床应用的文献梳理

目前参附注射液在临床中广泛应用,本文拟对文献报道中参附注射液的临床适应症及其联合用药情况进行梳理。本文以"参附注射液"为检索词,检索中国期刊全文数据库涉及参附注射液的临床使用报道,共检索文献719篇,共涉及疾病104种,例如心力衰竭、肺源性心脏病、心肌梗死、休克、心律失常、冠心病等疾病。其中单独使用参附注射液治疗文献519篇,涉及疾病76种,联合其他药物治疗文献200篇,涉及疾病54种。希望通过本文为参附注射液的临床使用提供指导。

中药组效学研究的常用方法与技术研究概述

如何辨识有效成分是中药新药研究中的关键科学问题之一。中药作用的整体性、组成成分的多样性、作用靶点的复杂性以及成分间相互作用的难以预测性,使传统药效物质研究方法的效率普遍不高。基于"定量组效关系"研究思想,多组分药物的化学组成与其生物活性间同样存在定量相关关系,组效学研究可帮助辨识中药的有效成分。本文对目前组效研究中常用的方法和技术进行综述,为中药药效物质基础研究提供借鉴。

大蒜皂苷对照品制备及比色法测定大蒜皂苷提取物中总皂苷含量

目的提取分离大蒜中皂苷成分Proto-iso-eruboside-B(PIEB),以其为对照品建立大蒜皂苷提取物的含量测定方法。方法采用大孔吸附树脂、硅胶、反相硅胶柱色谱组合分离技术,制备大蒜皂苷对照品,光谱法鉴定其结构,薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法定性、定量检测其纯度,并以其为对照品,硫酸-甲醇比色法测定大蒜皂苷提取物中总皂苷含量。结果经结构鉴定,制备的对照品为PIEB,纯度>98%。PIEB在19.44～58.32μg范围内含量与吸光度呈良好线性关系,回归方程为:Y=0.012X+0.002,r=0.999 5(n=6),平均回收率为98.26%,相对标准偏差为2.5%。结论该制备工艺所得化合物纯度达到中药化学对照品的质量要求。含量测定方法准确性、重复性良好,可作为大蒜皂苷提取物中总皂苷的质量控制方法。

近十年中药药代动力学新技术新方法概述

中药具有多成分、药效物质不确切的特征,长期以来中药药代动力学的研究存在许多困难。新的仪器、分析技术的出现,提高了中药体内成分分析的灵敏度,使得中药多成分药代研究成为可能。目前认为,在中药药代动力学研究中同时监测多个成分的药代动力学特征是十分有必要的,"中药多组分整合药代动力学研究""中药药代标记物""代谢组学"的研究思路较好地解决了这个问题。但目前的研究仍然存在许多争议,本文对近十年中药药代动力学的新技术与新方法进行综述,希望对中药药代动力学研究提供借鉴。

基于气相色谱-质谱联用和图模型分析的脂代谢异常患者血浆代谢组学研究

利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和图模型分析方法,寻找脂代谢异常患者可能的血浆代谢标志物群。采用GC-MS技术对37例脂代谢异常患者和10例健康人的血浆样品进行分析,得到血浆代谢物的表达谱。偏最小二乘-判别分析(Partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)得分图可区分脂代谢异常患者与健康人,运用PLS-DA载荷图及t检验发现有9个代谢物在两组间存在显著性差异。经NIST谱库检索,它们分别为缬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、焦谷氨酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、甘露糖、亚油酸和甘油。在脂代谢异常患者血浆中,除甘油浓度显著高于健康人外,其余8种代谢物浓度均明显低于健康人。图模型分析结果发现这些代谢物与脂代谢异常临床常用诊断指标之间具有很好的相关性。它们可能是脂代谢异常疾病早期诊断和预后新的特异性代谢标志物群。

基于CT血管造影的肺栓塞胸部HRCT研究

目的探讨基于CT血管造影(computer tomography pulmonary angiography,CTPA)的胸部高分辨率计算机体层X线摄影术(high-resolution computed tomography,HRCT)表现对肺栓塞的诊断价值。方法回顾性分析73例临床怀疑肺栓塞患者的CTPA及基于CTPA重建出的胸部HRCT图像,根据CTPA结果将所有病例分为肺栓塞组及非肺栓塞组,对比分析2组CTPA及胸部HRCT图像,归纳肺栓塞差异具有统计学意义的影像学征象。结果 CTPA确诊肺栓塞(阳性组)25例和排除肺栓塞(阴性组)48例,2组年龄和性别差异无统计学意义;左、右侧肺动脉栓塞支数差异无统计学意义;大部分栓子分布于肺段以下;中心性充盈缺损超过其他栓塞类型总和的2倍;肺栓塞组和非肺栓塞组最常见的胸部异常均为胸膜肥厚和实变影;HRCT肺动脉高压提示肺栓塞的可能性约为无肺动脉高压患者的3.29倍,肺动脉高压对于肺栓塞的发生具有预测价值。结论多排螺旋CT对于肺栓塞患者的检查,具有快捷无创、敏感性高的特点;在进行CTPA检查时,同时重建出肺部HRCT,可以实时评估肺部有无其他基础疾病,便于提高CTPA诊断价值,避免二次行胸部CT检查带来的额外辐射。

HPLC法测定人参、三七颗粒中四种皂苷类成分的含量

目的:建立测定人参、三七颗粒中四种皂苷类成分含量的高效液相色谱方法。方法:Waters Nova-PakC18(150×3.9mm4μm)色谱柱,流动相为乙腈-水溶液梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为203nm。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1分别在0.210～1.890μg,0.822～7.398μg,0.203～1.827μg及11.22～10.98μg范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.9995。三七皂苷R1的回收率为101.7,RSD=2.3%(n=5);人参皂苷Rg1的回收率为97.4,RSD=1.3%(n=5);人参皂苷Re的回收率为98.9,RSD=1.6%(n=5);人参皂苷Rb1的回收率为100.4RSD=0.9%(n=5)。结论:本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于控制人参、三七颗粒的质量。

金属修饰的Mg-Al复合氧化物催化氨基甲酸甲酯和甲醇合成碳酸二甲酯

以共沉淀法制备了一系列金属改性的Mg-Al类水滑石(HTlc),经500℃煅烧,获得各种金属修饰的Mg-Al复合氧化物(CHT-0.3M-500,M=Mn、Ni、Zn、Y或La)催化剂,借助XRD、SEM、N_2吸/脱附和CO_2-TPD等手段对其物理化学性质进行表征,在釜式反应器中考察其催化氨基甲酸甲酯(MC)和甲醇合成碳酸二甲酯(DMC)的反应性能。以Y修饰的Mg-Al复合氧化物为模板催化剂,考察了Y掺杂量和前驱体煅烧温度对催化性能的影响,并优化了反应条件。结果表明:CHT-0.3M-500样品表面碱性质与所掺杂金属的种类有关,催化剂活性与其表面碱性位的总数目成正比;在各种催化剂中,CHT-0.3Y-500具有最大的碱密度,因而其催化能力最高,在反应温度为200℃、反应时间为6 h、催化剂用量为0.5 g的条件下DMC收率最高可达58.3%;此外, CHT-0.3Y-500催化剂具有良好的重复使用性和催化稳定性。

固体中强碱催化尿素与苯酚合成水杨酰胺

以尿素和苯酚为原料、金属氧化物为催化剂,在反应釜中合成了水杨酰胺。CO2-TPD表征结果显示,该反应为碱催化反应。当具有中强碱性位的MgO为催化剂时,水杨酰胺的收率最高。进一步考察了一系列碱金属改性的MgO催化剂的催化性能,探讨了水杨酰胺的收率和催化剂表面碱性的关系。借助FTIR表征,研究了反应物在固体碱表面吸附和活化的中间过程,提出了固体碱催化尿素与苯酚反应的可能的机理。重复使用实验结果表明,K/MgO催化剂重复使用4次后,水杨酰胺的收率仍保持在38.1%,说明该催化剂具有较好的稳定性和重复使用性能。