3例T-细胞大颗粒淋巴细胞白血病及文献复习

目的:探讨T-细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-LGLL)的临床特点及实验室特征,以提高对T-LGLL的认识。方法:回顾性分析2022年6月-2023年5月山东中医药大学附属医院收治的3例T-LGLL患者的临床资料及实验室检查。结果:1例伴有类风湿性关节炎10余年,1例重度贫血,1例全血细胞性减少。根据其相关实验室检查及其临床表现,最终都确诊为T-LGLL。结论:T-LGLL发病隐匿,临床表现各异,需结合临床及MICM(即细胞形态学、免疫学、遗传学及分子生物学)对其进行诊断,避免误诊及漏诊。

3项指标联合检测在慢性阻塞性肺疾病中的临床意义

目的探讨D-二聚体、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和血清N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期及治疗缓解期的浓度变化及临床意义。方法检测40例COPD患者急性加重期及治疗缓解期D-二聚体、cTnI和NT-proBNP水平,同期选择体检健康者40例纳入对照组,检测3项指标水平并进行比较。结果 COPD急性加重期D-二聚体、cTnI、NT-proBNP水平分别为(1.83±1.14)μg/mL、(1.16±0.60)ng/mL和(819.62±172.37)pg/mL,均明显高于缓解期患者的(0.53±0.24)μg/mL、(0.55±0.12)ng/mL和(250.80±79.90)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05)。COPD缓解期D-二聚体、cTnI和NT-proBNP水平均高于对照组的(0.22±0.10)μg/mL、(0.13±0.05)ng/mL和(85.81±31.13)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 D-二聚体、cTnI和NT-proBNP水平在COPD患者中明显升高,其联合检测对于COPD的诊断、进展及治疗具有重要的临床指导意义。

RRMS疾病潜在生物标记物关系探讨

目的通过对复发-缓解型多发性硬化(RRMS)患者脑脊液进行比较蛋白质组学及生物信号网络分析,探索其潜在生物标记物之间以及生物标记物与该疾病间的关系。方法分别收集RRMS组和对照组脑脊液进行双向凝胶电泳,ImageMaster 2D图像分析软件筛选出表达有显著差异的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱对其进行鉴定,ELISA进行定量验证,MetaCore集成软件对所鉴定蛋白质进行相关分析。结果8个蛋白质点在两组凝胶图谱上存在明显差异,4个点在RRMS组显著上调,4个点下调,其中Cystatin C的ELISA结果为,RRMS组(4.36±1.22)mg/L,对照组(6.00±1.68)mg/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结果表明,对所鉴定蛋白质成功构建了信号网络图谱。结论蛋白质点的差异表达及其生物信号网络图谱在分子水平上对RRMS疾病的发病机理、鉴别诊断及药物靶点的探索提供了依据。

戈谢氏病伴血小板减少一例并文献复习

目的：探讨骨髓细胞形态学检查在戈谢氏病诊断中的价值。方法：采用瑞氏一吉姆萨染色法、糖原染色法对一例戈谢氏病伴血小板减少患者的骨髓片、血片进行化学染色，辅助骨髓基因及染色体检查，结合文献复习，提高对该病的认识。结果：瑞氏一吉姆萨染色发现骨髓片中的戈谢氏细胞，糖原染色该细胞呈阳性反应，确诊为戈谢氏病。结论：骨髓细胞形态学检查有助于戈谢氏病的早期诊断。

基于EP-17A2的胶体金法检测粪便隐血的空白限、检出限及定量限的建立及评价

目的：参考美国临床实验室标准化委员会（CLSI）发布的《临床实验室检验程序检测能力评价指南（第二版）》（EP-17A2）文件，探讨粪便隐血（FOB）胶体金法检测能力，建立该实验室的空白限（LOB）、检出限（LOD）及定量限（LOQ），减少弱阳性标本漏检率，并为胶体金法的检测限提供定量评价方法。方法使用人游离血红蛋白（f-Hb）ELISA试剂盒检测新鲜全血制备的系列低浓度的血红蛋白溶液，制定校准曲线，将粪便隐血的空白样本及一系列的血红蛋白低浓度样本使用胶体金试纸条进行检测，利用 Nato Checker710对显色带进行定量检测，并对定量结果进行统计分析，建立胶体金法检测粪便隐血的空白限、检出限及定量限。结果空白限为99.01 ng／ml，检出限为340.48 ng／ml，定量限为354.9 ng／ml。结论参考CLSI EP17-A2文件建立的检测限比常规方法建立的检测限科学合理，优于肉眼判断结果，更能满足临床实验室的质量要求和临床早期诊疗的需求；为提高实验室质量管理水平，每批次粪便隐血应根据此方法建立检测限，以及应用于其它项目胶体金法检出限的建立。

中枢神经系统脱髓鞘疾病脑脊液蛋白质组学研究

目的建立中枢神经系统脱髓鞘疾病蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与中枢神经系统脱髓鞘疾病发生有关的生物标识物。方法以中枢神经系统脱髓鞘疾病患者的脑脊液为研究对象,分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,用图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,离线应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱得到相应的肽指纹图谱;同时用超高压液相色谱分离酶解肽段,在线采用电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定肽段氨基酸序列;搜索数据库鉴定部分蛋白质。结果分别获得中枢神经系统脱髓鞘疾病患者组和对照组的脑脊液双向电泳蛋白质组表达图谱,筛选并鉴定出表达有明显差异的蛋白质10个,其中在疾病组中血红蛋白有明显上调而前列腺素H2表达下调明显。结论这些差异蛋白可能成为具有临床诊断意义的中枢神经系统脱髓鞘疾病潜在标识物,从而为中枢神经系统脱髓鞘疾病的早期诊断和治疗提供理论和实验依据。

脑脊液CystatinC改变与格林-巴利综合征关系的探讨

目的对格林-巴利综合征(GBS)患者和对照组脑脊液进行蛋白质组学分析,寻找改变最明显的蛋白质,初步探讨其与GBS的关系。方法分别取GBS疾病组和对照组的新鲜脑脊液,冰丙酮沉淀法提取总蛋白,进行第一向等电聚焦电泳(IEF)和第二向十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质组,Image Master 2D图像分析软件对分析胶进行比较分析,识别差异表达明显的蛋白质点。抠取制备胶上相应的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI/TOF/MS)得到肽质量指纹图谱(PMF),搜索SWISSPROT数据库鉴定蛋白质点。结果双向电泳图谱上有6个点在两组间存在明显差异,4个蛋白质点在GBS疾病组中表达明显上调,2个降低。其中Cystatin C表达下调,是改变最明显的蛋白质点,为本实验首次发现。随后的酶联免疫吸附实验(ELISA)也证实GBS患者的脑脊液中Cystatin C的浓度明显低于对照组[(2.79±0.65)mg/L,(3.65±0.82)mg/L,P<0.01]。结论Cystatin C浓度在GBS患者脑脊液中的浓度明显降低,可为研究格林-巴利综合征疾病机制提供线索。

能力验证/室间质量评价标本在电化学发光检验程序正确度验证中的应用

目的探讨能力验证(PT)/室间质量评价(EQA)标本在电化学发光项目正确度验证中的应用价值。方法根据美国临床实验室标准化协会(CLIS)EP15-A3文件正确度验证5×5方案,利用2018年国家卫生健康委PT/EQA计划提供的标本,分别对游离三碘原氨酸(FT3)和雌二醇(E2)等电化学发光项目进行正确度验证,每个样本每天检测1批,每批重复5次,共5 d。采用Grubbs'法判断离群值,采用单因素方差分析方法计算重复性精密度(SR)、实验室内不精密度(SWL)、总体标准误(SEx)、定值物质标准误(SERM)和总体合成标准误(SEC),再根据自由度(dfC)查T分布界值表得到m值,计算正确度验证区间。总体均值如果在验证区间内,正确度验证通过;如果超出验证区间,则计算偏移,并与实验室规定的目标偏移进行比较。结果FT3和E2的总体均值均在正确度验证区间内,正确度验证通过。结论可以采用PT/EQA标本对定值物质进行实验室检测程序的正确度验证。

Ⅱ型糖尿病早期肾损伤与超敏C-反应蛋白、尿微量蛋白的检测

目的探讨超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)以及尿微量蛋白在Ⅱ型糖尿病早期肾损伤诊断中的应用价值。方法选择153例门诊病人作为观察对象,另选择45例健康查体者做正常对照,采用高效免疫比浊法测定超敏Hs-CRP,同时用免疫比浊法检测尿中微量白蛋白(MALB)和尿转铁蛋白(TF)。结果Ⅱ型糖尿病组Hs-CRP、MALB、β2-MG水平较正常对照组明显升高(P均<0.01),TF较MALB更敏感(χ2=3.554,P<0.05)。结论超敏C-反应蛋白、微量白蛋白对于诊断Ⅱ型糖尿病早期肾损伤有重要的参考价值。

基于CLISEP28-A3c建立济南地区AFP、CEA参考区间的探讨

目的：通过统计分析初步建立济南地区健康人群肿瘤标志物AFP和CEA的参考区间，为临床诊疗肿瘤标志物提供依据。方法：使用Roche cobas8000检测系统检测来自山东中医药大学附属医院和齐鲁医院查体中心共3928例健康体检者的AFP和CEA，依据CLSI EP28-A3c，统计分析并建立参考区间。结果：AFP无需根据性别和年龄分组，参考区间是0-6.84ng/ml；CEA无需根据性别分组但需根据年龄进行分组，中青年组和老年组参考范围分别是0-4.40ng/ml和0-5.30ng/ml。结论：初步建立了济南地区AFP和CEA的参考区间，非常有必要统一各检测系统的参考区间。

探讨类风湿因子在捕获法检测巨细胞病毒抗体中的干扰浓度

目的 探讨类风湿因子浓度对捕获法ELISA检测巨细胞病毒IgM抗体（HCMV-IgM）的最小影响浓度.方法 300份高浓度类风湿因子血清标本分别用试剂盒自带稀释液和变形IgG血清稀释,用捕获法ELISA检测HCMV-IgM.结果 两种方法稀释的标本有统计学差别,证实变性IgG可以有效消除高浓度RF的干扰;且RF浓度越高捕获法检测HCMV-IgM的假阳性率越高.结论 根据统计学结果,RF浓度在5000IU/ml以下对HCMV-IgM的捕获法检测影响较小.

双向电泳中人血清蛋白样品不同处理方法的比较

目的针对人血清双向电泳流程中样品制备的不同方法,本研究进行了系统的比较和分析。方法采用丙酮沉淀法,三氯醋酸沉淀法,三氯醋酸/丙酮沉淀法,蛋白纯化试剂盒,去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理血清样品;双向电泳分离;硝酸银染色;软件分析所得蛋白质斑点。结果对丙酮沉淀法,三氯醋酸沉淀法,三氯醋酸/丙酮沉淀法,蛋白纯化试剂盒处理血清所得到的2-DE图谱统计分析,得到平均蛋白质点数分别为1 802±12,1 648±10,1 727±13,1 670±14;对去除白蛋白及免疫球蛋白血清所得到的双向电泳(2-DE)图谱与丙酮沉淀血清所得到的图谱进行统计,得到平均蛋白质点数分别为1 212±16,1 258±12,并对其中差异蛋白进行了质谱鉴定。结论结果表明不同血清沉淀方法对血清的双向电泳各有优劣;血清去除白蛋白及免疫球蛋白之后,可以提高一些低丰度蛋白的检出,但会导致部分蛋白的丢失。