CLEC5A调控AKT1/mTOR信号通路促进白血病细胞的增殖

目的探讨C型凝集素结构域家族5成员A(CLEC5A)基因对白血病细胞系THP-1和K562细胞增殖、凋亡和周期进程的影响及其可能的作用机制。方法通过基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析白血病患者中CLEC5A的表达水平。采用包装了CLEC5A过表达质粒的慢病毒感染THP-1和K562细胞以过表达CLEC5A,采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染THP-1和K562细胞以敲低CLEC5A。采用CCK-8实验与EdU实验检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及过氧化氢(H_(2)O_(2))刺激条件下的细胞凋亡。通过转录组测序和通路富集分析过表达CLEC5A基因后,上调或下调表达的基因显著富集的信号通路。采用Western blot实验检测AKT/mTOR和p53信号通路中相关蛋白的表达水平。结果CLEC5A在人白血病骨髓组织中的表达水平显著高于健康人群。敲低CLEC5A可显著抑制THP-1和K562细胞的增殖(P<0.01)和S期进程(P<0.05),并促进H_(2)O_(2)刺激条件下的细胞凋亡(P<0.001);过表达CLEC5A则显著促进THP-1和K562细胞的增殖(P<0.001)和S期进程(P<0.01),并抑制H_(2)O_(2)刺激条件下的细胞凋亡(P<0.01)。过表达CLEC5A后上调表达的基因显著富集于AKT1/mTOR等信号通路;而下调表达的基因显著富集于细胞周期等信号通路。且CLEC5A可显著抑制BAX和p53基因的表达,显著促进BCL-2基因的表达和AKT1、mTOR蛋白的磷酸化水平。结论CLEC5A可促进白血病细胞系THP-1和K562的细胞增殖和周期进程,抑制细胞凋亡,其作用机制可能与AKT/mTOR和p53信号通路相关。