柚皮素对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨柚皮素对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、柚皮素组。侧脑室注射链脲佐菌素(ICV-STZ)(3 mg/kg,共2次)制备AD模型。柚皮素组行柚皮素灌胃,其余两组生理盐水灌胃,1次/d,连续3 w。以Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力;测试完成后取各组大鼠脑组织,用化学比色法测定其超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫组织化学染色法观察其Aβ42和Aβ40的表达情况;Western blotting法定量检测其Tau蛋白的表达及磷酸化程度。结果:水迷宫结果显示,与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长(P<0.05),在原平台活动时间显著缩短(P<0.05);与模型组比较,柚皮素组平均逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),在原平台活动时间显著延长(P<0.05);化学比色法结果显示,模型组较假手术组肠组织SOD活性显著降低(P<0.05);而柚皮素组较模型组肠组织SOD活性显著升高(P<0.05);与假手术组比较,模型组肠组织MDA含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,柚皮素组MDA含量显著降低(P<0.05);免疫组化结果显示,模型组Aβ40、Aβ42阳性表达较对照组显著增多(P<0.05),柚皮素组较模型组阳性表达显著降低(P<0.05);Tau蛋白表达在各组间无差异,但模型组Tau蛋白磷酸化程度较对照组显著增强(P<0.05),柚皮素组较模型组显著减弱(P<0.05)。结论:柚皮素可通过氧化应激途径较好地改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力。

miRNA-451表达质粒的构建及对人A549肺癌细胞侵袭转移及凋亡的影响

目的:探讨miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭转移及凋亡的影响。方法:Hsa-miRNA-451序列通过miRBase数据库查找,根据此序列设计出2条寡核苷酸片段,将目的基因经过退火处理后克隆至真核表达载体pGenesil-1.1质粒中,从而构建成为miRNA-451真核表达载体(pGenesil-1.1-miRNA-451质粒)。将pGenesil-1.1-miRNA-451及pGenesil-1.1-control质粒分别转染人A549肺癌细胞,经过G418的筛选,建立pGenesil-1.1-miRNA-451及pGenesil-1.1-control稳定表达的细胞株。流式细胞术分析检测细胞凋亡的情况;Transwell小室检测miRNA-451对细胞侵袭能力的影响;细胞划痕实验检测细胞的迁移情况。结果:经测序证实miRNA-451真核表达质粒构建成功,与未处理的人A549肺癌细胞和稳定表达pGenesil-1.1-control的细胞相比,稳定表达了pGenesil-1-miRNA-451的人A549肺癌细胞的侵袭和迁移能力均明显受到抑制影响,而细胞凋亡无明显变化(P>0.05)。结论:miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭转移具有显著的抑制作用,但对细胞凋亡作用不明显。

糖尿病肾病循环microRNA差异表达谱的分析

为了解循环microRNA在早期糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)发病机制中的作用,该文采用芯片筛查结合real-time PCR检测早期糖尿病肾病患者循环microRNA差异表达谱,同时应用生物信息学方法预测差异表达谱microRNA的靶基因.结果表明:芯片筛查出49个microRNA在DN中呈差异表达,其中信号值在两组中均大于1 000的microRNA有22个,17个上调,5个下调.选择其中差异倍数大于2的5个microRNA进行realtime PCR验证,结果与芯片结果一致,分别为let-7a,let-7d,let-7f和miR-363在DN中低表达,miR-4429在DN中高表达.同时,应用生物信息学技术预测了5个microRNA的靶基因,主要涉及细胞代谢过程调控、生长因子反应和细胞增殖等的相关基因.DN差异表达谱的建立为探寻microRNA发病中的作用以及DN的早期诊治提供了新的思路.

HIFU通过下调miR-181a进而促进ICAM-1表达增强小鼠抗肿瘤免疫

目的探讨miR-181a在高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)增强机体抗肿瘤免疫中的作用及其机制。方法 1皮下构建供HIFU治疗的黑色素瘤移植瘤小鼠模型,采用简单随机法随机分为HIFU组与荷瘤组,每组30只,采用MTT方法检测各组脾淋巴细胞对B16细胞的杀伤活性,ELISA检测小鼠血清及共培养上清中TNF-α及IFN-γ的表达水平;2qRT-PCR检测HIFU组与荷瘤组脾淋巴细胞中的差异miRNAs;3用生物信息学方法预测差异miRNAs的潜在靶基因,通过RT-PCR及Western blot验证靶基因的表达;4构建荧光素酶报告质粒进一步验证差异miRNAs的靶基因,再将差异miRNAs的mimics转染脾淋巴细胞,RT-PCR及Western blot检测其靶基因表达的变化,以进一步确认差异miRNAs对靶基因表达的影响。结果 1HIFU治疗能够抑制黑色素瘤生长,促进脾淋巴细胞分泌TNF-α和IFN-γ,增强脾淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性;2HIFU处理明显下调脾淋巴细胞中miR-181a的表达水平(P<0.01);3生物信息学方法预测发现共刺激分子细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)可能是miR-181a的潜在靶基因,且HIFU处理明显促进脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA和蛋白质的表达(P<0.01);4miR-181a mimics显著抑制pLUC-ICAM-1-3'UTR报告质粒荧光素酶的活性(P<0.01),并下调脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA(P<0.05)和蛋白质的表达(P<0.01)。结论 HIFU通过抑制miR-181a对共刺激分子ICAM-1的负调控作用从而增强荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫。

BCL6B对人结直肠癌LoVo细胞增殖和迁移的影响及机制

目的:研究B细胞白血病/淋巴瘤6B(BCL6B)在人正常肠上皮细胞FHC及结直肠癌细胞LoVo中的表达水平及BCL6B对LoVo细胞增殖和迁移的影响,并探讨其相关分子机制。方法:采用RT-PCR及Western blot检测FHC细胞和LoVo细胞中BCL6B的内源性表达;用脂质体法将重组质粒pc DNA3.1-BCL6B转入LoVo细胞,运用MTT、集落形成、细胞划痕及Transwell小室实验检测BCL6B对LoVo细胞增殖和迁移的影响,采用RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,Western blot检测蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。结果:与正常肠上皮细胞FHC相比,BCL6B在LoVo细胞中呈明显低表达;转染pc DNA3.1-BCL6B后的LoVo细胞内BCL6B水平显著增高。过表达BCL6B的实验组细胞72 h的增殖活性及划痕愈合力分别较对照组降低28.33%(P<0.01)和36.11%(P<0.05)。实验组细胞cyclin D1和MMP-9的m RNA水平分别降低39.90%(P<0.01)和77.36%(P<0.05),同时cyclin D1、MMP-9和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白水平分别降低44.00%(P<0.05)、47.06%(P<0.01)和32.88%(P<0.05)。结论:BCL6B可抑制结直肠癌LoVo细胞的增殖和迁移,其机制可能涉及PI3K/AKT信号通路的抑制。

高强度聚焦超声抑制小鼠黑色素瘤细胞B16-F10在体内的转移

目的在黑色素瘤的小鼠模型上,探讨高强度聚焦超声（HIFU）处理对黑色素瘤细胞体内转移的影响。方法皮下注射小鼠黑色素瘤细胞B16-F10以构建小鼠黑色素瘤皮下移植瘤模型;待肿瘤最长径长至7~10 mm时进行HIFU处理,并设置实验对照组（荷瘤鼠辐照HIFU但保持治疗头功率源开关关闭,即假照组）;治疗后每3 d测量肿瘤长径和短径,共观察3周,绘制肿瘤曲线,统计生存率和转移率,并通过实时荧光定量PCR测定血液中黑色素瘤细胞3个标志物的相对表达量以监测血液中循环黑色素瘤细胞的数量,它们分别是黑色素瘤相关抗原A3（MAGE-A3）、T细胞1识别的黑色素瘤抗原（MART1）以及同源转化成对框基因转录因子PAX3）;在HIFU治疗后14 d,通过尾静脉注射再次移植B16-F10细胞,观测其肺转移率。结果（1）各自的中位生存时间及95%可信区间（CI）：假照组分别为19.00 d和17.14~20.86 d,HIFU组则分别为26.00d和24.76~27.25 d,生存率差异显著（P〈0.01）;从治疗后第20天起,两组小鼠的肿瘤体积差异明显,从HIFU处理后第20天开始,包括处理后第23、26天,辐照组小鼠肿瘤体积明显小于假照组（P〈0.05）;（2）实时荧光定量PCR结果显示HIFU组小鼠在治疗后第7天的MAGE-A3、MART1和PAX3三个指标都明显低于假照组（P〈0.05）,在治疗后第14天其MAGE-A3的表达量仍然明显低于假照组（P〈0.05）;（3）在HIFU治疗后14 d通过尾静脉再次移植相同肿瘤细胞,HIFU组肺转移灶的数量明显低于假照组（P〈0.05）,肿瘤转移抑制率为42.4%。结论 HIFU处理能够抑制黑色素瘤细胞在体内转移的发生,其机制可能涉及减少肿瘤细胞从原发灶的脱落和瘤细胞在肺部的定植能力。

JNK在小鼠毛囊周期中的动态表达

目的研究JNK在生后小鼠背皮毛囊周期中的表达规律及探讨其对毛囊周期的调控作用。方法选择生后不同时期(1、7、14、16、21、31 d)C57BL/6J小鼠54只,采用RT-PCR技术,检测JNK mRNA在小鼠背皮毛囊周期中的表达情况;采用Western blot和免疫组化技术,进一步检测JNK蛋白在毛囊周期中的表达规律。结果 RT-PCR检测结果表明,在毛囊周期中,JNK1在生长早期(生后7、31 d)表达最强,退化期(生后16 d)和静止期(生后21 d)维持较弱的表达;JNK2在各时相点均有中等强度表达。单因素方差分析显示,JNK1的表达水平在生长早期(0.99±0.02)与静止期(0.30±0.01)间存在显著差异(P<0.05),JNK2在生长早期(0.77±0.01)与退化期(0.97±0.03)间存在显著差异(P<0.05)。Western blot与RT-PCR检测结果一致。免疫组化结果显示,在毛囊生长期,JNK主要表达于毛母质和外根鞘;进入退化期,JNK表达于外根鞘和上皮索;静止期毛囊中无表达。结论 JNK在毛囊周期中呈动态表达模式,生长期JNK可能通过影响毛母质细胞的增殖和/或分化来调节毛囊生长;退化期JNK可能涉及毛囊细胞的凋亡过程。

老年2型糖尿病及并发症与糖化血红蛋白的相关性

目的探讨老年2型糖尿病及并发症与糖化血红蛋白的相关性。方法老年2型糖尿病患者74例为观察组,同期体检的老年健康受试者60例为对照组。对比两组糖化血红蛋白和空腹血糖的检测结果;通过Pearson相关性检验分析糖化血红蛋白和空腹血糖的相关性;对比观察组有糖尿病并发症和无糖尿病并发症、合并糖尿病慢性并发症和合并糖尿病急性并发症患者的糖化血红蛋白和空腹血糖检测结果。结果观察组糖化血红蛋白[(9. 35±2. 51)%],空腹血糖[(10. 17±4. 36)mmol/L]均显著高于对照组(均P<0. 05)。观察组空腹血糖的水平随着糖化血红蛋白水平的升高而升高,两者呈显著正相关(r>0. 8,P<0. 05)。有糖尿病并发症患者的糖化血红蛋白[(12. 19±2. 21)%],空腹血糖[(11. 13±5. 06)mmol/L]均显著高于无糖尿病并发症的患者(均P<0. 05)。结论糖化血红蛋白水平与老年2型糖尿病并发症的发生相关,定期监测和维持糖化血红蛋白达标有助于降低老年2型糖尿病并发症发病的风险。

检验科医院感染的危险因素与防控措施

检验科是发生医院感染的高危科室,如不进行严格的科学管理,医院感染不仅会严重危害医务人员的身体健康,还可能影响检验结果的准确性,降低医院诊疗效率,造成医疗资源的极大浪费。该文结合医院感染的传播过程,全面分析了检验科“人、机、料、法、环”5个方面的危险因素,并提出从医院、科室和个人层面建立有效的防控措施管理体系,以降低检验科医院感染发生率,保障医患的诊疗安全,提高医院的医疗服务质量。

不同类型珠蛋白生成障碍性贫血的基因型和血液学指标特征

目的分析血常规指标和血红蛋白(Hb)电泳在不同类型珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称地贫)中的差异及其对地贫筛查的重要意义。方法选取2017年1月至2019年3月遵义市第一人民医院/遵义医科大学第三附属医院经分子诊断确诊的地贫患者286例(地贫组)和健康对照者200例(对照组)为研究对象,行血常规及Hb电泳检测,并分析平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和HbA2等血液学指标在不同类型地贫中的差异,及其单项检测及联合检测对地贫诊断的灵敏度、特异度和准确度。结果286例确诊的地贫患者中,α、β和α/β复合型地贫占比分别为39.51%、58.74%和1.75%。α和β地贫患者的MCV、MCH,以及β地贫的HbA2、HbF与健康对照者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MCV、MCH和HbA2各单项指标检测诊断地贫的灵敏度和特异度分别为90.56%、91.96%、80.07%和76.00%、81.50%、96.50%;平行联合检测的灵敏度、特异度、准确度分别为100.00%、79.50%、91.56%;系列联合检测的灵敏度、特异度、准确度分别为79.37%、100.00%、87.86%。平行联合检测的灵敏度明显高于各单项检测,差异有统计学意义(P<0.05),系列联合检测的特异度明显高于各单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论将MCV、MCH和HbA2联合检测作为地贫的筛查指标具有较高的临床应用价值。

遵义地区孕妇珠蛋白基因突变趋势分析及其与血液学指标的相关性

目的研究遵义地区孕妇珠蛋白基因突变的流行趋势及其与血常规、血红蛋白(Hb)电泳等血液学指标的相关性。方法通过对142例确诊为珠蛋白生成障碍性贫血的孕妇和20例健康孕妇进行血常规、Hb电泳和α/β珠蛋白基因突变检测,分析珠蛋白基因突变类型的比例、与血液学指标的相关性以及贫血严重程度。结果142例珠蛋白生成障碍性贫血孕妇中有46例α-珠蛋白基因突变,93例β-珠蛋白基因突变,还有3例为αβ-复合型珠蛋白基因突变,涵盖了20种基因型。珠蛋白基因突变孕妇的红细胞计数(RBC)、Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和HbA2等血液学指标与健康孕妇相比差异均有统计学意义(P<0.05),且均存在不同程度的贫血表现。结论分析该地区孕妇的珠蛋白基因突变的流行趋势及其与血液学指标的关系,为当地政府制订合理的珠蛋白基因突变的干预计划提供理论依据。

综合ICU医院感染的目标性监测

目的了解该院综合重症监护病房(ICU)医院感染情况,为预防和减少医院感染的发生提供参考依据。方法对2016-2019年入住该院综合ICU的4165例患者进行医院感染的目标性监测,分析该院医院感染率、医院感染部位分布情况、器械使用及其相关感染的发生情况。结果监测的4165例患者中,医院感染人次率为4.39%,医院感染例次率为6.43%,连续4年综合ICU医院感染人次率及感染例次率呈逐年下降趋势(P<0.05)。医院感染部位以下呼吸道为主,占45.90%。导尿管相关尿路感染、中心静脉导管相关血流感染(CLABSI)、呼吸机相关性肺炎(VAP)分别占医院感染例次数的19.03%、13.06%、21.27%。与2016、2017年相比,2018年CLABSI发生率明显下降(P<0.05)。与2016年相比,2018、2019年呼吸机使用率明显上升(P<0.05),但VAP发生率明显下降(P<0.05)。结论对综合ICU医院感染进行目标性监测,可以获得医院感染情况的变化趋势,及时采取相应的预防措施,积极控制感染。

金黄色葡萄球菌生物膜防治研究进展

金黄色葡萄球菌(SA)在全球范围内引起了许多社区获得性及医院获得性感染,生物膜的形成是细菌适应其生存环境的一种生存策略。在生物膜的保护下,生物膜中的细菌对抗生素和免疫应答产生了耐受性和抗性,使得与生物膜相关的感染难以治疗。因此,SA生物膜的防治一直以来是研究的热点。本文概述了消除SA生物膜的形成和相关感染的最新预防和治疗策略。

PCR-荧光探针法检测婴幼儿和儿童人鼻病毒的初步评估

目的通过PCR-荧光探针法和Sanger测序法检测呼吸道感染婴幼儿和儿童人鼻病毒(HRV)的感染情况,以评估PCR-荧光探针法的病毒检测能力,并分析HRV载量对患儿临床指标的影响。方法收集2019年5—7月在遵义医科大学第三附属医院住院收治的具有呼吸道感染症状的175例患儿的鼻咽拭子标本,采用PCR-荧光探针法和Sanger测序法检测HRV感染情况并分析HRV载量对婴幼儿和儿童临床指标的影响。结果PCR-荧光探针法检出阳性标本51份(51/175,29.14%),阴性标本124份(124/175,70.86%)。Sanger测序法检出阳性标本48份(48/175,27.43%),阴性标本127份(127/175,72.57%)。与Sanger测序法相比,PCR-荧光探针法检测HRV的灵敏度和特异度分别为100.00%和97.64%,阳性预测值和阴性预测值分别为94.12%和100.00%,一致率为95.80%。两种方法对HRV的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高载量病毒组和低载量病毒组住院天数、入院前最高体温、发热天数、白细胞计数、淋巴细胞百分比及降钙素原比较,差异均无统计学意义(P>0.05),超敏C反应蛋白比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCR-荧光探针法检测HRV灵敏度高、特异度高、检测周期短、费用较低且操作简便快捷,可在临床检测HRV中广泛推广。此外,高载量HRV的婴幼儿和儿童的超敏C反应蛋白水平较低载量HRV的婴幼儿和儿童更高。

969例呼吸道感染儿童中人博卡病毒的感染情况与临床特征分析

目的了解遵义地区儿童急性呼吸道感染中人博卡病毒(HBoV)的感染情况,为儿童呼吸道感染的临床诊疗提供参考。方法收集2019年5月至7月遵义市第一人民医院急性呼吸道感染儿童鼻咽拭子标本969例,采用PCR-荧光探针法检测HBoV核酸,对PCR产物进行Sanger法测序,并收集感染患儿临床资料进行临床特征分析。结果在969例鼻咽拭子标本中,共检出45例阳性标本,阳性率为4.6%。其中男性患儿多于女性,两者检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);阳性病例主要集中在36月以内患儿(77.7%),不同年龄段检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄段阳性患儿的临床特征有所差异,其中各年龄段出现发热、扁桃体肿大、CRP增高的比例比较,差异有统计学意义(P<0.05);阳性患儿的临床诊断以社区获得性肺炎最多见(51.1%);单纯HBoV感染率为37.8%,混合感染比例高达62.2%。结论HBoV是2019年5至7月遵义地区儿童急性呼吸道感染的重要病原体,及时准确的检测和分析HBoV感染,对临床诊疗具有重要意义。

红细胞参数及公式在遵义地区β地中海贫血和缺铁性贫血鉴别诊断中的效能评价

目的探讨红细胞参数及公式在β-地中海贫血(β-thalassemia minor,β-TT)和缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)鉴别诊断中的效能,评价β-TT和IDA的11个鉴别公式在遵义地区的应用价值,并确定适用于本地区的最佳临界值。方法纳入2018年11月—2019年10月首次就诊于遵义市第一人民医院的213例β-TT和IDA患者,回顾分析2组患者血常规红细胞参数;计算每个鉴别公式的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数及正确识别率;根据受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)得出鉴别公式的最佳临界值(cut-off value)。结果β-TT组患者Hb、HCT、MCHC高于IDA组,差异均有统计学意义(P<0.05);MCV、RDW明显低于IDA组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者的RBC差异无统计学意义(P>0.05)。RDW、Green and king公式(GK)和England and Fraser公式(EF)曲线下面积(AUC)分别为0.993,0.961和0.954,具有较好的鉴别性能,Shine and Lal公式(SL)和RBC的AUC分别为0.637和0.128,不适合作为本地区鉴别β-TT和IDA的公式。确定不同于原始值的新cut-off值为临界值。结论红细胞参数对鉴别诊断β-TT与IDA有较好的临床价值;RDW、GK和EF公式适合作为遵义地区β-TT和IDA患者的鉴别公式;新cut-off值可能更适合遵义地区鉴别β-TT和IDA。

miR-451靶向调控肾小球系膜细胞Ywhaz基因的表达

目的探讨miR-451对肾小球系膜细胞Ywhaz基因表达的靶向调控。方法应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3′UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTMvector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-Ywhaz-3′UTR。将miR-451 mimics和NC mimics分别转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,将miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,采用Real-time RT-PCR和Westernblot法检测miR-451和Ywhaz的表达水平;将miR-451 mimics和NC mimics分别与pmiR-Ywhaz-3′UTR共转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别与pmiR-Ywhaz-3′UTR共转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,检测各组细胞荧光素酶活性。结果 Ywhaz基因3′UTR区有11个碱基与miR-451种子序列匹配,其中7个碱基呈高度保守性;荧光素酶报告质粒经测序鉴定构建正确;miR-451在miR-451 mimics组呈高表达,在miR-451 inhibitor组表达降低;miR-451可抑制Ywhaz的蛋白表达;荧光素酶活性检测发现,miR-451可通过与Ywhaz3′UTR的结合,抑制Ywhaz的表达。结论 miR-451可直接靶向糖尿病相关基因Ywhaz,抑制其蛋白表达,为进一步研究miR-451调控早期糖尿病肾病发生发展的机制提供了依据。

S100A6促宫颈癌细胞增殖、迁移及其可能机制研究

目的:探讨S100A6对人宫颈癌细胞系HeLa和SiHa增殖、迁移的影响及其机制。方法:首先采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测宫颈癌细胞HeLa、SiHa和CaSki中S100A6 mRNA的基础表达,再分别采用重组腺病毒AdS100A6和AdsiS100A6干预HeLa和SiHa细胞,Western blot验证腺病毒感染是否成功;MTT法检测细胞增殖能力,划痕愈合试验检测细胞迁移能力,Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)指标E钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)、N钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad)及p-Akt的蛋白水平,半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription and polymerase chain reaction,RT-PCR)检测PI3K-Akt信号通路下游靶基因Snail、Twist的表达。结果:与对照组相比,AdS100A6组的HeLa细胞3天时的OD_(492)值和划痕愈合率均明显升高,并伴随E-cadherin降低和N-cadherin升高;而AdsiS100A6组的SiHa细胞5天时的OD_(492)值和3天时的划痕愈合率明显降低,并伴随E-cadherin升高和N-cadherin降低;同时,在HeLa细胞中上调S100A6后p-Akt蛋白水平增加,该通路的下游靶基因Snail和Twist表达也明显上调。结论:S100A6可以增强宫颈癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能涉及EMT和PI3K-Akt信号通路的激活。

miR-451对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其机制

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-451对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其机制。方法在Lipofectamine 2000介导下,将miR-451模拟物(miR-451 mimics)及mimics对照分别转染高糖培养的肾小球系膜细胞,另设高糖未转染组和低糖未转染组,实时荧光RT-PCR法检测各组细胞中miR-451的表达水平;MTT法检测miR-451对小鼠肾小球系膜细胞增殖的影响;Western blot法检测靶蛋白Ywhaz、p-p38 MAPK和p-MKK3的表达水平。结果 miR-451组细胞中miR-451的表达水平较mimics对照组明显升高(P<0.01);miR-451组第2、3、4天的细胞增殖能力明显低于高糖未转染组(P均<0.05),第3、4天明显低于mimics对照组(P均<0.05);与mimics对照组和高糖未转染组比较,miR-451组细胞中Ywhaz、p-p38 MAPK和p-MKK3的表达水平均明显下降(P均<0.05)。结论 miR-451可抑制Ywhaz蛋白的表达,降低p38 MAPK信号途径中p-p38 MAPK和p-MKK3蛋白的表达,从而降低高糖诱导的肾小球系膜的增殖。本实验为研究糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的发病机制提供了新的思路。

S100A9对宫颈癌Hela细胞的增殖和迁移的影响及其机制探讨

为初步探讨S100A9在宫颈癌中的生物学作用,利用携带有人S100A9基因的腺病毒(Adh S100A9)感染于低表达S100A9的宫颈癌Hela细胞,通过MTT法检测细胞增殖能力,划痕愈合试验和Transwell试验检测细胞迁移能力,通过倒置显微镜观察细胞形态变化,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测上皮细胞标志蛋白E-钙黏着蛋白(E-cadherin,E-cad)、间质细胞标志蛋白波形蛋白(vimentin,Vim)及Wnt/β-联蛋白(β-catenin,β-cat)信号通路相关分子的表达。结果显示,与对照组相比,过表达S100A9的Hela细胞增殖活性增强、迁移率增高,细胞形态由"铺路石"样向"梭形"转变,排列紊乱,伴随E-cad降低(P<0.05)和Vim升高(P<0.01);同时,过表达S100A9的Hela细胞中Wnt/β-cat信号通路的关键分子β-联蛋白水平增加(P<0.01),并且入核增多(P<0.01),该通路的下游靶基因c-myc、Snail及Twist表达也明显上调。该研究结果提示,S100A9促进宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移和上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),激活Wnt/β-cat信号通路;S100A9促进增殖和迁移作用的机制可能与其促进EMT和激活Wnt/β-cat信号通路相关。