免疫增强剂提高禽流感疫苗效力的研究

为评价免疫增强剂（VA5）对鸡的免疫效力,将不同剂量免疫增强剂与H9禽流感抗原混合后制备疫苗,评价对SPF鸡的免疫效力.根据筛选结果,将最适剂量的免疫增强剂与H9禽流感抗原以共同混合的形式配制疫苗,并将免疫增强剂以伴侣形式与H5或H9禽流感疫苗混匀免疫商品鸡,评价免疫增强效果.结果表明,免疫增强剂与H9疫苗共同混匀,或将免疫增强剂制备成疫苗伴侣形式与H5或H9商品疫苗共同混合免疫商品鸡,均能使H5或H9疫苗免疫后抗体提前1周达到7lg2,免疫后2～3周抗体效价显著高于不含免疫增强剂的常规疫苗组.该免疫增强剂能提高H5和H9亚型禽流感疫苗对鸡的免疫效力,具有较好的应用前景.

免疫增强剂对禽流感疫苗免疫持续期、安全性和鸡淋巴细胞转化的影响

在配制H9亚型禽流感疫苗过程中添加免疫增强剂VA5制成VA5-H9疫苗免疫鸡,或将VA5制备成油乳剂以疫苗伴侣形式与商品化H5亚型禽流感疫苗混合(VA5-H5)后免疫鸡,监测鸡的抗体持续期、疫苗安全性和鸡淋巴细胞的转化情况。抗体检测结果表明,VA5与H5或H9亚型禽流感疫苗混用能有效延长抗体持续期4周,H5抗体提前1周达到7lg2。安全性研究表明,以VA5-H9疫苗经一次单剂量、一次2倍剂量和单剂量间隔2周重复免疫这3种方式免疫鸡后,含VA5的疫苗与常规疫苗的吸收类似,说明VA5不影响鸡体对疫苗的吸收。淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能提高免疫鸡淋巴细胞转化效率。可知,获得的VA5免疫增强剂能有效延长抗体持续期,且不影响疫苗的安全性,并提高免疫鸡的淋巴细胞转化活性。

免疫增强剂对不同肉鸡禽流感疫苗免疫效果探讨

试验将筛选获得的免疫增强剂与现有商品化禽流感疫苗混合后免疫10-15日龄的白羽肉鸡、黄羽肉鸡或麻鸡，在免疫后的第2、3、4周采血用于检测血凝抑制抗体效价，统计饲料用量，并在各品种鸡达到出栏日龄时，检测出栏重、料肉比和死淘率。结果显示，3种肉鸡免疫含免疫增强剂伴侣的H5亚型禽流感疫苗，抗体产生比常规疫苗提前1周达到710昏，平均HI抗体效价显著高于常规疫苗；不同疫苗免疫鸡与对照鸡在出栏重和料肉比方面无显著差异，在饲养期间无死淘情况。综合上述结果提示，免疫增强剂能显著提高禽流感疫苗在肉鸡的免疫效力，同时对生产性能无明显影响。

人工合成禽流感M2e/HA0多肽的免疫原性分析

为了解流感病毒M2及HA保守肽段的免疫原性,参照流感病毒M2及HA的氨基酸序列分别设计合成多肽并免疫SPF鸡,设H5和H9亚型禽流感灭活疫苗及空白组作对照。对免疫后2、4、6和8周的血清进行HI和ELISA抗体、MDCK细胞的病毒血清法中和抗体效价和间接免疫荧光抗体检测,8周采血结束后用H9病毒进行攻毒检测。结果表明两种多肽疫苗均不产生HI抗体,针对各自多肽的ELISA抗体效价均显著高于H5/H9常规灭活疫苗对照组。M2e/HA0多肽苗免疫血清最高中和抗体效价为1∶16,远低于H9血清中和效价(1∶256)。间接免疫荧光检测结果显示多肽苗(M2e/HA0)组含荧光颗粒的MDCK细胞比例约20%左右,低于H5和H9灭活疫苗组含荧光颗粒细胞数(分别为50%和70%)。H9亚型禽流感病毒攻毒结果表明,两组多肽免疫后都可以有效抑制排毒,其中M2e免疫组抑制效果略好于HA0免疫组。以上结果提示M2e/HA0多肽具有较好的免疫原性,但其免疫原性弱于常规疫苗。

禽流感疫苗的研究进展

禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类的疾病综合症。该病不仅给各国的养殖业带来了巨大的经济损失,而且也威胁着人类健康和公共卫生安全。疫苗接种是防治禽流感的主要手段。本文对目前预防禽流感的多种疫苗的研究进行简要综述。

H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒系统的表达及活性鉴定

通过PCR方法从人工合成的质粒(232HAc-T)扩增获得全长的HA基因和缺失信号肽及跨膜区的HA基因。将此HA基因克隆至杆状病毒表达系统,构建重组穿梭载体rBac-232HAc和rBac-232HAδST,转染Sf9细胞后获得重组的杆状病毒rAc-232HAc和rAc-232HAδST。重组病毒在Sf9细胞中表达2种重组蛋白232HAc和232HAδST。2种蛋白在SDS-PAGE和Western blot检测中均获得预期目的条带,间接免疫荧光(IFA)检测呈阳性。血凝试验结果显示,232HAc蛋白能够使红细胞凝集,血凝(HA)效价为8log2;而232HAδST的HA效价低于2log2。血凝抑制试验结果表明,232HAc蛋白与H5阳性血清反应良好,效价类似于H5检测抗原对照,但不与其他病毒血清反应。结果提示:2种重组蛋白均能在Sf9细胞中表达,但重组232HAc蛋白能具有较好的血凝性,并能被H5阳性血清特异性抑制。本研究为研发H5亚型禽流感HA蛋白亚单位疫苗提供了生物材料。

淫羊藿对青脚麻鸡免疫功能的影响

探讨淫羊藿提取物对青脚麻鸡免疫功能影响。选用400只青脚麻鸡,随机均分4组,分别为饮用淫羊藿提取物大剂量组(2g/L)、中剂量组(1g/L)、小剂量组(0.5g/L),对照组饮用自来水。从14日龄开始给药,连续饮用6周。每周末各组随机抽样8只,公母各半,空腹称重,心脏采血制备血清,测定新城疫血凝抑制价(ND-HI)、传染性法氏囊病(IBD)琼扩效价,解剖测定胸腺、脾脏、法氏囊重量,计算器官重及器官指数。结果表明,28日龄时,各给药组脾指数均明显降低。35日龄时,小剂量组脾指数、中剂量组法氏囊指数,42日龄时,大、中剂量组脾指数,大剂量组法氏囊指数,49日龄时小剂量组胸腺指数均升高。56日龄时,大剂量组胸腺指数有所降低。IBD琼扩效价自35日龄起,ND-HI效价自28日龄起各给药组抗体效价较对照组均高1～2个滴度以上。说明用适当剂量的淫羊藿提取物在鸡免疫的一定阶段可不同程度地促进胸腺、脾脏和法氏囊的发育,提高免疫效价。