经犬肝动/静脉输入反义c-myc重组腺病毒的安全性研究

目的:经Beagle犬肝脏血管注射重组腺病毒介导反义c—myc基因(Ad-ASmye)载体,观测其体内分布及毒副作用,以评价Ad-ASmye治疗肝癌的临床前期安全性。方法:选择4只体重8-10 kg健康Beagle犬,全麻后开腹,经肝动脉或门静脉注射Ad-ASmyc,注射Ad-ASmye前及注射后第3,7,14,21天取肝组织及抽取静脉血化验,PCR检测Ad-ASmyc在各器官组织中的分布,常规切片观察各器官病理变化,ELISA方法检测血中抗腺病毒抗体的产生。结果:经Beagle犬肝脏血管注射后,Ad-ASmyc可持续转导正常肝细胞达3周,实验犬一般情况好,血、肝、肾功能无明显异常,在肝脏、脾脏、肾脏、胃、心脏、皮肤中可检测到重组腺病毒的分布,镜下可见Ad-ASmyc剂量依赖性的肝组织轻微的炎症反应,注射后7 d血中有抗腺病毒载体的抗体产生,14 d达高峰,21 d开始下降。结论:经Beagle犬肝动脉或门静脉途径注射Ad—ASmyc均可转导至肝细胞,Ad-AS-myc对实验犬的毒副作用较轻。

石墨炉原子吸收光谱法测定面粉中铁的研究

建立石墨炉原子吸收光谱法测定面粉中铁的方法。面粉试样选择微波消解法进行前处理,用石墨炉原子吸收分光光度计进行测定,标准曲线线性范围内线性相关性大于0.999。对河南小麦成分分析物质进行测定,精密度良好,结果在扩展不确定度范围内。对面粉样品进行3种含量加标,加标回收率在92.8%~109.0%。该方法操作简单、稳定性高、回收率好。

猪油中磺胺类药物残留量检测研究

建立超高效液相色谱-串联质谱法测定猪油中磺胺类药物残留的方法。试样经正己烷溶解,加入80%乙腈水溶液提取,经PRIME HLB小柱净化后,供超高效液相色谱-串联质谱检测。用甲醇-0.1%甲酸+2 mol/L甲酸铵水溶液为流动相,经质谱多反应监测(MRM)模式检测。结果显示:18种磺胺类药物均有良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限为0.5μg/mL,回收率在90.1%~100.0%,RSD在0.17%~5.94%。

人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的耐药机制

目的 研究人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系A5 4 9 Gem的耐药机制。方法 免疫组织化学法检测人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的P 糖蛋白的表达 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测多药耐药基因 (mdr1)以及脱氧胞苷激酶 (dCK)mRNA的转录 ,并采用基因芯片检测了A5 4 9和A5 4 9 Gem的基因表达谱。结果 A5 4 9 Gem中P 糖蛋白 (P gp)呈弱阳性表达 ,A5 4 9未见表达。A5 4 9 Gem细胞中出现mdr1的mRNA转录增加 ,却未检测到dCKmRNA的产物。基因芯片检测A5 4 9和A5 4 9 Gem基因表达谱 ,结果表明 ,18.8%的基因出现差异表达 ,包括癌基因和抑癌基因、细胞周期相关基因、热休克蛋白基因、细胞凋亡相关基因、DNA转录因子 (如锌指蛋白等 )、DNA修复和重组基因、信号传导基因、蛋白翻译基因以及大量的代谢相关基因。结论 肺腺癌细胞对吉西他滨的耐药既与dCK缺乏相关 ,也有mdr1/P gp高表达的参与。在肺腺癌细胞对吉西他滨产生耐药的过程中 ,发生了多种基因表达的变化 ,提示耐药的产生是多因素参与的复杂生化过程。