激酶锚定蛋白1抑制线粒体分裂减轻肾脏缺血再灌注损伤

目的:探讨激酶锚定蛋白1(AKAP1)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法:首先构建小鼠肾脏缺血再灌注模型,夹闭双侧肾动脉缺血28 min,再灌注24 h后采血并留取肾组织,检测血清肌酐、尿素氮、病理损伤及AKAP1表达情况,其次将小鼠肾小管上皮细胞培养至第2天进行干预,缺氧过程(H)将细胞置入1%O_(2)、5%CO_(2)、37℃三气培养箱内无糖无血清依次培养3 h,复氧(R)时更换含10%胎牛血清低糖培养基正常培养6 h。观察对照组和各缺复氧(H/R)组再复氧6 h时肾小管上细胞一般形态,最后通过转染过表达AKAP1的方式检测H/R各组ATP含量,线粒体膜电位以及线粒体Mito-Red染色情况。结果:AKAP1在肾脏缺血再灌注后表达下降(P<0.05);小鼠肾小管上皮细胞在H/R处理后出现AKAP1表达下降以及线粒体功能障碍(P<0.05);AKAP1通过线粒体动力相关蛋白1调控H/R诱导线粒体损伤(P<0.05)。结论:AKAP1可以通过抑制线粒体功能障碍减轻肾脏IRI。

热量限制对肾缺血损伤后纤维化的影响及机制研究

目的:探讨热量限制(CR)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后纤维化进展中的作用及机制。方法:构建小鼠单侧肾脏缺血再灌注纤维化模型。随机分为假手术组、假手术后CR组、IRI组、IRI-CR组。术后第3天,CR组小鼠限时喂食,每日饮食摄入量为正常水平的66%,对照组小鼠术后持续自由饮食,所有组均自由饮水。每天限食时观察并记录各组老鼠一般状态。再灌注第20天切除右肾,24 h后采血并留取肾组织。检测血清肌酐、尿素氮及相关实验分析。结果:CR组肾纤维化较重;CR增强了IRI后肾小管细胞自噬活性;抑制自噬可显著减轻CR对IRI后纤维化的影响。结论:CR可加重肾脏IRI后的肾纤维化进展,其机制可能是通过激活自噬实现的。

GDF15在肾移植缺血-再灌注损伤中的作用及机制研究

目的探讨生长与分化因子(GDF)15在肾移植缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法选取野生型供体小鼠9只,野生型受体小鼠9只,分别于术后4、24、72 h取3只受体小鼠的移植肾,进行GDF家族转录组学分析,检测各组肾组织GDF15的表达情况。选取野生型供体小鼠5只,GDF15敲除型供体小鼠5只,野生型受体小鼠10只,根据实验方案将小鼠分为野生型假手术组、野生型移植组、GDF15敲除假手术组、GDF15敲除移植组,于术后72 h提取血清及肾组织样本,对比各组肾功能、肾小管损伤情况、炎症细胞浸润、炎症因子及Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB表达水平。选取野生型供体小鼠9只,GDF15敲除型供体小鼠9只,野生型受体小鼠18只,根据实验方案将小鼠分为野生型移植组、GDF15敲除移植组,观察肾移植术后两组生存率。结果GDF15是移植肾转录组学中上调最多的GDF家族基因,主要在肾小管中表达。与假手术组比较,移植组小鼠肾功能下降;与野生型移植组比较,GDF15敲除移植组小鼠血清肌酐、血尿素氮水平升高(均为P<0.05)。野生型移植组小鼠术后1周生存率为87.6%,GDF15敲除移植组小鼠术后1周生存率为41.8%。GDF15敲除移植组肾损伤分子(KIM)-1表达增多,肾小管损伤评分更高。野生型移植组肾小管可见溶解或坏死,髓外和皮质中可见管型形成,而GDF15敲除移植组肾小管坏死及管型更加明显。移植组髓过氧化物酶(MPO)和F4/80表达增多,且GDF15敲除移植组炎症细胞浸润加重。与假手术组比较,移植组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6表达水平升高;与野生型移植组比较,GDF15敲除移植组TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平升高(均为P<0.05)。移植组肾组织中TLR4、NF-κB表达较假手术组增多;GDF15敲除移植组肾组织中TLR4和NF-κB表达较野生型移植组增多。结论GDF15可减轻移植肾IRI,其作用机制可能与抑制TLR4-NF-κB信号通路有关。

热量限制防治肾脏纤维化的作用机制

肾脏纤维化是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)进展过程中共同的病理改变,其特征是间质间隙的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积,这是CKD最突出的标志。既往研究证实,肾纤维化与线粒体、炎症、脂质代谢及自噬有紧密联系。热量限制能通过改善线粒体功能、抑制炎症因子分泌、减少脂质生成、增加脂质分解和增强自噬来减缓肾脏纤维化进程。鉴于肾脏纤维化的潜在患病率和不良预后,目前在临床上对肾脏纤维化的治疗手段相当有限,了解肾脏纤维化的机制和延缓肾脏纤维化的进展具有重要的临床意义。本文就热量限制在肾脏纤维化中的作用原理及研究现状进行综述,以期为临床治疗提供理论指导。