肾周阿是穴注射生理盐水缓解肾绞痛的治疗作用及机理研究

研究肾周阿是穴注射生理盐水缓解肾绞痛的作用及相关机理。选出60例肾绞痛患者根据信封原则分组展开研究,对照组30例采用常规西药解痉止痛治疗,研究组30例仅采用肾周阿是穴生理盐水注射治疗,观察并比较治疗前后2组视觉模拟疼痛评分(VAS)、血清C反应蛋白(CRP)水平、白介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、前列腺素E2(PGE2)、5-羟色胺(5-HT)以及P物质(SP)水平。治疗后,研究组治疗总有效率90.00%高于对照组83.33%,P>0.05,差异无统计学意义;但研究组显效率53.33%,明显高于对照组33.33%,2组显效率相比较差异显著(P<0.05)。研究组VAS评分、CRP水平、IL-6水平及TNF-α水平均比对照组低,研究组血清中PGE2、SP及5-HT表达水平均低于对照组,P<0.05,统计学差异显著。肾周阿是穴注射生理盐水可有效缓解肾绞痛,主要是通过针刺及液体的注入刺激经络,降低PGE2、5-HT水平,调控炎症因子水平,调节神经递质SP水平以有效缓解疼痛。

K562细胞ssDNA适配子检测方法对慢性粒细胞白血病诊断价值的研究

目的评价K562细胞ssDNA适配子检测方法(简称适配子检测法)对慢性粒细胞白血病(CML)的临床诊断价值。方法采集18例CML患者、22例其他白血病患者、20名健康体检者(正常对照组)的血液标本各5 mL,分离粒细胞,用建立的适配子检测法检测荧光强度,绘制受试者工作特征(ROC)曲线。结果 CML组荧光强度为492.26±41.67,与其它白血病组(466.86±33.23)及正常对照组(469.33±37.13)比较,差异无统计学意义(P值分别为0.078、0.243);其它白血病组和正常对照组比较,差异亦无统计学意义(P=0.835)。适配子检测法诊断CML的ROC曲线下面积为0.702,最佳阳性临界值为475.13,灵敏度为83.33%、特异性为54.76%、阳性预测值为44.11%、阴性预测值为88.46%。结论适配子检测法对CML的诊断具有较低的准确性,实际应用还有一定的局限性。

细胞色素P450 2C19基因多态性与氯吡格雷抗血小板作用相关性的Meta分析

目的利用Meta分析的方法评估氯吡格雷抗血小板作用的效果和细胞色素P450 2C19基因(CYP2C19)多态性之间的相关性。方法计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Cochrane图书馆、SCI、EMBASE和PubMed数据库,并手工检索相关杂志,收集氯吡格雷使用患者CYP2C19 A/G位点多态性的基因频率和抗血小板效应的独立病例对照研究,提取有效的数据,用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共纳入8个病例对照研究,包括1 538例GG基因型患者和4 413例GA或者AA患者。Meta分析结果表明:使用氯吡格雷作为抗血小板药物的患者中,CYP2C19突变型(GA或者AA)携带者比野生型GG携带者的药物敏感性差[比值比=0.23,95%可信区间(0.13,0.40)];血浆药物浓度前者远低于后者[均数差=-17.38,95%可信区间(-25.59,-9.16)];血小板反应指数前者较后者明显降低[均数差=12.87,95%可信区间(8.48,17.26)];支架植入后血栓形成情况前者较后者有明显增加[比值比=3.68,95%可信区间(2.17,6.24)];血栓导致的死亡率前者也较后者增高[比值比=3.68,95%可信区间(1.82,7.43)];然而,对于心肌梗死的情况前者与后者之间无差异[比值比=1.25,95%可信区间(0.96,1.63)]。结论 Meta分析结果表明,CYP2C19基因多态性与氯吡格雷药物反应作用之间存在着一定的相关性,且易导致由于血小板凝集而造成的患者死亡。

养阴生肌散对患者压疮部位微生物的抑菌作用探讨

目的:观察中药养阴生肌散对压疮患者压疮部位微生物的抑菌作用。方法:采用琼脂扩散法分别研究养阴生肌散和安尔碘对压疮部位部分革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌的抑菌效果,37℃培养24小时,量取槽边缘抑菌区的距离。结果:革兰氏阳性菌(G+)亚组之间差异不具有统计学意义(P>0.05);革兰氏阴性菌(G-)亚组之间差异具有统计学意义(P<0.05);金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和类肠杆菌亚组两者之间差异有统计学意义(P<0.05);大肠杆菌和产气肠杆菌亚组两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:养阴生肌散对部分G+、G-具有一定的抑制作用。

龈上洁治术与牙周非手术治疗对单纯中重度牙周炎患者肱踝脉搏波传导速度、踝臂指数和sICAM-1的影响比较

目的比较龈上洁治术与牙周非手术治疗对单纯中重度牙周炎患者肱踝脉搏波传导速度、踝臂指数和血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)的影响。方法前瞻性选取106例单纯中重度牙周炎患者,随机分为常规组行龈上洁治术及研究组行牙周非手术治疗,两组各53例。比较两组患者治疗前后牙周指标[平均临床附着丧失(CAL)、探诊深度(PD)及探诊出血指数(BOP)]、肱踝脉搏波传导速度、踝臂指数和sICAM-1的变化情况。结果常规组患者治疗后1个月CAL、PD及BOP水平与治疗前比较均无显著差异(P>0.05),而研究组患者治疗后CAL、PD及BOP水平均优于治疗前(P均<0.05),且均优于常规组(P<0.05)。治疗1个月后,常规组肱踝脉搏波传导速度、踝臂指数和sICAM-1与治疗前比较均无显著差异(P>0.05),而研究组肱踝脉搏波传导速度与sICAM-1均低于治疗前(P<0.05),踝臂指数稍高于治疗前,但差异无显著性(P>0.05);治疗1个月后,研究组踝脉搏波传导速度与sICAM-1均明显较常规组低(P<0.05),而踝臂指数比较并无显著差异(P>0.05)。结论相比龈上洁治术,牙周非手术治疗更能够降低单纯中重度牙周炎患者肱踝脉搏波传导速度,降低sICAM-1的水平,进而有助于减轻发生心血管疾病的风险。

不同穿刺方法对透析患者动静脉内瘘的影响

目的:探讨不同穿刺方法对血液透析患者动静脉内瘘的影响,为患者选择最佳穿刺方法提供依据。方法:将透析1年以上的124例患者分为治疗组和对照组各62例,分别采用阶梯式或纽扣式穿刺法和常规穿刺方法,观察穿刺时渗血、血肿、内瘘血管内膜壁厚度及内瘘瘤、内瘘狭窄、堵塞等并发症发生情况。结果:治疗组不良事件发生情况均明显少于常规随意点穿刺法,差异具有统计学意义(P<0.05);在穿刺50次后实验组血管内膜壁厚度小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);穿刺1年后,治疗组患者动脉瘤、内瘘狭窄、堵塞等不良并发症发生情况均明显少于常规随意点穿刺法,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:阶梯式或纽扣式穿刺方法,能够明显减少穿刺渗血、血肿、穿刺失败等不良事件的发生率,减少血管内膜壁的增生,降低内瘘瘤、血管狭窄、血管堵塞等并发症的发生。

养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡102例

目的:观察养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡的临床疗效。方法:将307例患者随机分为3组。养阴生肌膜组给予养阴生肌膜口腔患处贴敷,3次/d。养阴生肌散给予养阴生肌散组口腔患处贴敷,3次/d。奥硝唑膜组给予奥硝唑膜口腔患处贴敷,3次/d。3组均以用药10天为1个疗程,治疗5个疗程后进行病例回访,随访时间1.5年。结果:临床疗效养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著(P<0.05)。养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异(P>0.05)。疼痛消失时间、溃疡愈合时间、复发间隔时间养阴生肌膜组、养阴生肌散组与奥硝唑膜组相比差异显著(P<0.05);养阴生肌膜组与养阴生肌散组相比,无显著差异(P>0.05)。结论:养阴生肌膜治疗复发性口腔溃疡临床疗效显著。

癌胚抗原ssDNA核酸适配子的体外筛选及鉴定

目的通过SELEX技术筛选获得癌胚抗原(CEA)特异性核酸适配子,为建立CEA适配子检测方法和肿瘤靶向治疗奠定实验基础。方法构建长度为88bp的随机ssDNA文库,体外筛选人血清CEA特异性适配子,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测特异性适配子结合蛋白。结果经过优化体外筛选条件,经12轮筛选,获得特异性核酸适配子,经SDS-PAGE证实了其识别并特异性结合的物质为人血清CEA。结论经体外12轮筛选,证实了所获得的CEA适配子可特异性地与人血清CEA蛋白结合,为后续建立CEA特异性检测平台提供基础,也为靶向治疗药物的研制提供一定的思路。

引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库

目的引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建高库容量的单链抗体库。方法收集不同年龄、性别、健康状态的人的静脉血各5 mL,提取单个核细胞总RNA,反转录为cDNA,PCR扩增VH和VL基因,应用易错PCR对VH和VL基因进行突变,同时用DNA-shuffling技术对全长单链抗体基因进行体外改组,获得的分子与T载体连接,转化E.coli DH5α,选取阳性克隆,经菌落PCR后酶切鉴定抗体库多样性,计算分析单链抗体库容量。结果成功构建了库容量为4.37×1013的单链抗体库,经酶切鉴定,初步判定抗体库多样性良好。结论引入易错PCR和DNA-shuf-fling技术,成功构建了单链抗体库,为后续筛选高亲和力抗体奠定了实验基础。

兰州地区健康女性血清糖类抗原125、糖类抗原153参考值范围的建立

目的建立电化学发光法测定血清糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)在兰州地区健康女性的正常参考值范围。方法通过Roche E601电化学发光分析仪进行血清CA125和CA153检测,采用SPSS17.0建立本实验室95%可信区间。结果兰州地区健康人群血清中CA125和CA153结果呈正态分布。结论 CA125健康人群参考范围为小于33.05 U/mL,CA153健康人群参考范围为小于21.92U/mL。

兰州地区健康人群甲胎蛋白、癌胚抗原参考值调查

目的：建立电化学发光法测定血清甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CEA）在兰州地区健康人群的参考值。方法：通过RocheE411电化学发光分析仪进行血清AFP和CEA检测，采用SPSS16．0建立本实验室95％可信区间。结果：兰州地区健康人群血清中AFP、CEA结果呈正态分布，男性与女性之间差异无统计学意义（P〉0．05）。正常人群AFP参考范围为0-4．33IU／mL；CEA〉61岁为0-4．33ng／mL，〈61岁为0-3．07ng／mL。结论：兰州地区健康人群AFP参考范围为〈4．33IU／mL；CEA〉61岁为〈4．33ng／ml，〈61岁为〈3．07ng／mL。

兰州地区健康人群tPSA、fPSA以及fPSA/tPSA参考值范围的建立

目的:建立电化学发光法测定血清总前列腺特异性抗原(tPSA)、游离前列腺特异抗原(fPSA)以及二者比值(fPSA/tPSA)在兰州地区健康人群中的正常参考值范围。方法:通过Roche E411电化学发光分析仪进行血清tPSA和fPSA检测,采用SPSS17.0建立本实验室95%可信区间。结果:兰州地区健康人群血清中tPSA、fPSA以及fPSA/tPSA结果呈近似正态分布。tPSA正常人群参考范围为<2.00 ng/mL(年龄小于60岁)和<3.7 ng/ml(年龄大于60岁),fPSA正常人群参考范围为<0.63 ng/mL(年龄小于60岁)和<1.27 ng/mL(年龄大于60岁),fPSA/tPSA正常人群参考范围为<0.66(年龄小于60岁)和<0.43(年龄大于60岁)。结论:兰州地区健康人群tPSA参考范围为<2.00ng/mL(年龄小于60岁)和<3.7ng/mL(年龄大于60岁),fPSA参考范围为<0.63 ng/mL(年龄小于60岁)和<1.27 ng/mL(年龄大于60岁),fPSA/tPSA参考范围为<0.66(年龄小于60岁)和<0.43(年龄大于60岁)。

兰州地区健康人群血清糖类抗原199参考值范围的建立

目的：建立电化学发光法测定血清糖类抗原199（CA199）在兰州地区健康人群的正常参考值范围。方法：通过Roche E601电化学发光分析仪进行血清糖类抗原199检测,采用SPSS 17.0建立本实验室95%可信区间。结果：600例中CA199最小值〈0.6IU/m,最大值36.05IU/m,平均（10.1±6.9）IU/m,总体健康人群的95%参考区间为0~23.62 IU/mL。健康人群参考区间男、女比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;21~40岁年龄组和其他年龄组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：兰州地区健康人群血清糖类抗原199正常人群参考范围为0~23.62 IU/mL。

2010—2020年某三甲医院患者病毒性肝炎实验室结果特征分析

分析2010-2020年某三甲医院实验室病毒性肝炎检测结果,旨在为兰州地区病毒性肝炎流行病学数据提供参考,为防控提供依据。查询2010年1月1日至2020年12月31日某三甲医院就诊人群为兰州地区的甲肝抗体、乙肝表面抗原、丙肝抗体、戊肝抗体结果,用Excel和SPSS软件分析数据。2010-2020年总计检测2141740例,病毒性肝炎阳性病例29659例,检出率最高的是2010年(157518例,1.94%),检出患病率最低的是2020年(217219例,0.99%),整体检测人数逐年升高,但患病率呈下降趋势,全年散在分布,其中乙型肝炎病例最多,占总检测阳性的72%(21479例),其次为丙型肝炎14%(4149例),甲型肝炎13%(3815例),最低为戊型肝炎1%(198例);病毒性肝炎阳性病例中男性17257例,女性12402例,男女性别之比为1.66∶1,男性年均检出患病率为2.77%,女性年均检出患病率为2.24%;40~49岁年龄组检出病例最多(8478例,28.58%),其次50~59岁年龄组检出病例(7000例,23.60%),20岁以下年龄组检出病例最少(322例,1.09%),20~29岁年龄组检出病例(2304例,7.77%),30~39岁年龄组检出病例(4707例,15.87%),60~69岁年龄组检出病例(4283例,14.44%),70岁以上年龄组检出病例(2565例,8.65%);阳性患者职业主要以农民和自由职业者为主,占总病例数的42.3%和36.8%;其次是离退休人员和企事业人员,占总病例数的10.5%和9.9%。2010-2020年病毒性肝炎阳性率逐年下降,乙型肝炎为其主要型别,但防疫形势依然严峻,需进一步提高疫苗的免疫接种工作,规范病毒性肝炎的报告流程。

白银地区女性生殖道感染HPV基因型调查分析

调查白银地区女性生殖道感染HPV基因型分布状况,了解不同亚型HPV在女性中的感染情况及流行病学意义。对甘肃省中医院白银分院健康体检、门诊和住院的患者共640例,采集阴道分泌物标本,采用PCR-反向斑点杂交法检测21个HPV基因型。640例样本中检出HPV阳性者65例,检出率为10.2%。共查出15种亚型。HPV阳性者中低危型占4.6%,高危型占78.5%,两型和两型以上混合感染占16.9%;640例样本中感染率最高的为高危HPV39型(2.2%)和HPV16(2.2%),其它分别为HPV58(1.9%),HPV52(1.3%),HPV66(0.7%),HPV6(0.6%),HPV51(0.6%),HPV56(0.6%),HPV18(0.5%),HPV53%(0.5%),HPV31(0.3%),HPV68(0.3%),HPV33(0.3%),HPV42(0.3%),HPV,81(CP8304)(0.2%)。白银地区女性生殖道感染HPV基因分布有区域特点,HPV检测具有重要的流行病学意义。

大容量人源肝癌核糖体展示单链抗体库的构建

目的:构建人源肝癌天然库容量大、多样性好的核糖体展示单链抗体库,为开发治疗性人源抗体奠定良好的实验基础。方法:分别收集40例人新鲜外周血各2mL(包括健康成年人和肝癌患者),进行淋巴细胞分离和总RNA的提取,通过设计合适的优化引物用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区基因(variable region of heavy chain,VH)、轻链可变区基因(variable region of light chain,VL)和作为间隔区的轻链恒定区基因(consis tregion of light chain,CK)。采用改进的重叠延伸PCR(SOEPCR)技术将VH和VL进行拼接,连接肽为Linker(Gly4Ser)3。之后引入构建核糖体展示单链抗体(scFv)库模板所需元件,包括一个T7启动子、一个核糖体结合位点(Kozak序列)和翻译起始密码,以及作为间隔区的CK基因。模板基因片段连接T-载体转化E.coliDH5a大肠杆菌,对所构建的单链抗体库进行菌落PCR鉴定和测序分析。结果:①构建了库容量为2.65×1013的人源肝癌单链抗体库;②经菌落PCR鉴定和测序分析阳性重组子的序列,我们发现该抗体库具有丰富的多样性。结论:采用改进的重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法,对构建库容量高、多样性好的人源性肝癌核糖体展示单链抗体库,提高了建库效率。成功构建的抗体库,为后续筛选抗体、抗体修饰等工作打下扎实的实验基础。

核酸适体电化学生物传感器的研究进展

核酸适体(aptamer)是一种体外筛选,功能类似于单克隆抗体的,能与靶物质高特异性、高亲和力结合的寡核苷酸片段。因其具有诸多优于抗体的特点,已被广泛应用到生物传感器领域。而电化学检测技术因其具有选择性好、灵敏度高,以及快速、简单、测试费用低和易于联机化等优点而在适体传感器的发展中占有重要的地位。本研究依据电化学适体传感器的构建原理中DNA链的数量和结构,对近几年电化学适体传感器的研究发展做一综述,包括单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器、双螺旋结构的核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器和两条单链核酸物质体系构建的核酸适体电化学传感器。

HBV血清学标志物与HBV DNA定量结果比较分析

探讨乙肝患者血清标志物HBV-M和HBV-DNA之间的关系及临床意义。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV-M,用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA载量,对结果进行比较分析。897例病人中得出17种血清学模式,各种组合的HBV DNA的阳性率存在显著性差异,HBeAg阳性组合模式的HBV-DNA检出率较高。HBV-M与HBV-DNA两种方法联合检测对乙肝患者的诊断和疗效观察有重要的临床价值。

白银地区丙型肝炎基因分型的变化及临床意义

研究白银地区2013~2019年丙型肝炎基因型的分布情况,并与2011~2012年分型情况进行对比,为临床根据变化趋势制定合理的抗病毒治疗方法提供参考。收集白银地区ELISA抗体阳性丙肝患者217例,采用PCR反向斑点杂交法检测基因型。204例HCV-RNA阳性标本中,1b亚型122例(66.7%),1a亚型2例(3.4%),2a亚型49例(24.1%);3a亚型12例(5.8%)。白银地区丙型肝炎病毒感染以1b型为主,其次是2a型,没有检出在我国常见的1b/2a混合感染的患者。但在白银地区发现了中国其它地区少有发现的2c、3a型的感染。区域特异性HCV-RNA基因分型结果为制定白银地区丙型肝炎的治疗和预防个体化方案提供强有力的依据。

基于ssDNA适配子的慢性粒细胞白血病K562细胞检测方法的建立

目的建立基于ssDNA适配子的慢性粒细胞性白血病K562细胞的检测方法。方法利用Cell-SELEX(Sys-tematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术获得针对K562细胞的高特异性ssDNA适配子,以双位点结合模式试验原理,结合生物素链霉亲和素磁珠技术,建立K562细胞的特异性检测方法,并验证其特异性及灵敏度。结果利用建立的方法分别检测K562细胞、HL-60细胞及空白对照细胞,K562组与HL-60组和空白对照组荧光强度值差异有统计学意义(P<0.01),HL-60组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),表明该方法特异性强;该方法能检测出数量小于100个的K562细胞,检测阈值低,灵敏度高。结论已成功建立了基于ssDNA适配子的检测K562细胞的新方法,为慢性粒细胞性白血病的分子诊断提供了一种新方法,也为分离K562细胞表面物质提供了新的思路。