阿霉素不同方式诱导SD大鼠建立局灶节段性肾小球硬化模型的比较分析

目的对比分析阿霉素3种不同诱导方式建立的局灶节段性肾小球硬化(Focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)大鼠模型的差异。方法将25只SD大鼠随机分为4组,即正常组及模型1、2、3组。正常组大鼠不做处理;模型1组大鼠分2次尾静脉注射阿霉素(4 mg·kg^(-1)),间隔14 d;模型2组大鼠一次性尾静脉注射阿霉素7 mg·kg^(-1);模型3组大鼠手术摘除右肾,分别于术后第4天和第8天尾静脉注射阿霉素(3 mg·kg^(-1)),复制FSGS大鼠模型。采用生化法检测各组大鼠的24 h尿蛋白、血清白蛋白(ALB)、血肌酐(Cre)和尿素氮(BUN)水平,连续观察7周;采用糖原(PAS)染色法和Masson染色法检测各组大鼠肾脏组织病理形态学变化。结果与正常组比较,各模型组大鼠的24 h尿蛋白含量都有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01);模型2、3组大鼠的血清白蛋白含量从第2、3周末时开始持续下降(P<0.05,P<0.01);第2周末各模型组大鼠的血清中尿素氮水平均明显升高(P<0.05);模型1组大鼠的血肌酐含量始终无明显变化(P>0.05),模型2组大鼠的血肌酐仅在第4、5周末有明显升高(P<0.05),模型3组大鼠的血肌酐含量则一直呈现明显上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01)。病理结果显示:模型1组大鼠肾脏组织未见明显毛细血管袢病变,肾小管轻度扩张,少量管型蛋白;模型2组大鼠肾脏有损伤,肾小球轻度系膜增生,但未见明显肾小球局灶节段性硬化;模型3组大鼠肾小球毛细血管襻与肾小囊粘连,有明显毛细血管袢狭窄、闭塞,肾小管扩张,管型蛋白等病理变化。与正常组比较,3个模型组大鼠肾脏组织Masson染色切片的平均光密度值均明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),肾脏组织有明显纤维化,其中模型3组的平均光密度值最大,表明其肾小球局灶性、节段性硬化更为严重。模型2组动物一般状态不佳,死亡率为33.3%;模型3组动物状况良好,无死亡。结论模型3组大鼠局灶节段性硬化特点突出,"单侧肾摘除+分次小剂量注射阿霉素"是建立FSGS模型的最佳方式,可为FSGS肾病研究提供参考。

芒果叶素对高尿酸血症鹌鹑尿酸的影响及其机制初探

目的:探讨芒果叶素对高尿酸血症(HUA)鹌鹑尿酸及相关代谢酶的影响,初步阐释芒果叶素降尿酸作用机制。方法:将72只鹌鹑,按体重随机分为正常组,模型组,芒果叶素高、中、低剂量(24,12,6mg/kg)及苯溴马隆组(20mg/kg),每组12只。除正常组喂饲鹌鹑普通饲料外,其余各组均给予高嘌呤饲料(普通饲料拌入酵母干粉15g·kg^-1·d^-1)复制HUA模型,造模的同时给予芒果叶素进行灌胃,正常组和模型组灌胃0.5%CMC-Na,连续14d,观察血清尿酸(UA)水平及UA代谢相关的酶活性的变化。结果:芒果叶素高、中剂量(24,12mg/kg)可显著性降低高尿酸血症鹌鹑血清尿酸水平(P<0.05);可明显抑制血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)、5'-核苷酸酶(5'-NT)及肝脏中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。结论:芒果叶素可有效降低高尿酸血症鹌鹑血尿酸水平,可能与其降低尿酸代谢相关酶XOD、5'-NT的活性有关。

急性肾损伤模型大鼠血清及尿白蛋白的变化及其相关机制的研究

目的探讨常见急性肾损伤大鼠模型病理过程中其血清、尿蛋白的变化及其形成的相关机制。方法分别尾静脉注射顺铂,腹腔注射庆大霉素,以及结扎肾动静脉所致肾缺血再灌(简称肾缺血再灌,renal ischemia reperfusion,RIR)等方法,造成大鼠急性肾损伤。观察肾组织形态学变化,检测血清和24 h尿总蛋白(total protein,TP),白蛋白(albumin,ALB)以及血清肝功肾功相关指标;观察肝脏组织TP,ALB的含量及ALB m RNA、蛋白的表达水平;观察肾组织ALB,肾病蛋白(Nephrin),足突蛋白(Podocin)及炎性坏死因子相关蛋白表达。结果顺铂、肾缺血再灌及庆大霉素大鼠血清中ALB显著下降(P<0.05),同时尿ALB,TP显著升高(P<0.05)。顺铂模型肝TP及ALB m RNA及蛋白表达下调,庆大霉素及肾缺血再灌模型肝TP含量显著升高(P<0.05),ALB m RNA表达上调。三种模型大鼠肾组织Nephrin,白介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNFα),ALB蛋白表达均明显升高(P<0.05);顺铂及肾缺血再灌大鼠肾Podocin表达明显下调;同时3种模型大鼠肾组织均可见基底膜损伤,肾小管上皮细胞出现不同程度的坏死。结论3种急性肾损伤大鼠尿蛋白排泄升高和血清ALB下降,与肾小球基底膜及肾小管上皮细胞损伤相关。同时肝脏和肾脏不同程度上启动了ALB表达合成。3种模型所致其病理生理变化不完全相同,因此在相关防治急性肾损伤中药研究中,还须对不同造模方法进行有针对性的观察。

特发性肺纤维化的发病机制及中药调节作用研究进展

特发性肺纤维化(IPF)作为一种肺部进行性疾病,预后不佳,目前尚无可靠手段进行根治。当下治疗IPF以器官移植和给予化学药为主,但效果欠佳且不良反应颇多,无法满足目前的临床需求。因此,开发更安全、有效的药物已成为亟需解决的问题,而研究IPF的发病机制将有助于新药的开发。现阶段关于IPF发病机制的研究主要集中在巨噬细胞极化、上皮-间质转化(EMT)、氧化应激和自噬作用等方面,但对于系统说明各发病机制原理及揭示各机制存在的联系尚未有研究报道。中医理论认为“气虚血瘀”“气阳虚弱”是IPF的关键病机,故临床常采用益气活血、温阳补气和祛瘀化痰类等中药或复方治疗IPF。现代药理学研究表明,此类中药在抑制巨噬细胞极化、改善氧化还原平衡、抑制EMT和调节细胞自噬等方面可发挥积极作用,但针对中药如何调节相关通路而治疗IPF,目前尚无系统的报道。该文通过总结国内外最新文献,将逐一并系统的阐述IPF的发病机制,同时更全面的概述中药中有效成分或复方调节IPF的作用机制。针对IPF的发病机制,结合中药的调节作用,着重挖掘系统治疗IPF的方案,以期为IPF的深入研究及相关药物研发提供新的思路。

温肺化纤颗粒通过调控TGF-β1/Smad信号通路改善肺纤维化

目的:探究温肺化纤颗粒抗博来霉素诱导小鼠肺纤维化的作用及其机制。方法:将C57BL/6J雄性小鼠随机分为Control组、Model组、WFHX-low-dose(12.5 g·kg^(–1))组、WFHX-high-dose(50 g·kg^(–1))组以及吡非尼酮(Pirfenidone,180 mg·kg^(–1))组,采用气管插管法灌注博来霉素(0.75 mg·kg^(–1))建立肺纤维化模型。自造模第2天起灌胃给药干预,持续给药28 d。HE和Masson染色法检测肺组织肺泡炎及纤维化程度;RT-qPCR法检测肺组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的mRNA表达;Western blot法检测肺组织IL-6、TNF-α、CollagenⅠ、EMT相关标志物以及转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)/Smad信号通路相关蛋白表达;免疫组织化学染色法(IHC)检测p-Smad3、Smad7表达。结果:与Control组比较,Model组的组织纤维化评分显著升高,IL-6、TNF-α、collagenⅠ以及间质标志物纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01),上皮标志物钙黏蛋白E(E-cadherin)显著下调(P<0.05)。同时,TGF-β1与p-Smad2、p-Smad3蛋白表达增加,Smad7表达减少;与Model组比较,给药干预后显著降低了肺组织纤维化程度,并且WFHX给药组均在不同程度上改善上述因子的表达,显著抑制炎症因子IL-6、TNF-α释放,减轻肺组织炎症反应,减少collagenⅠ的分泌,改善EMT,减少TGF-β1生成并抑制Smad2、Smad3磷酸化,上调Smad7的表达。结论:温肺化纤颗粒可通过减轻炎症反应,抑制EMT,抑制TGF-β1/Smad信号通路发挥抗纤维化作用。