甲状腺未分化癌中PD-1和PD-L1的表达及临床病理意义

目的:探究程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)和程序性死亡受体配体-1(programmed deathligand-1,PD-L1)在甲状腺未分化癌(undifferentiated thyroid carcinoma,UTC)中的表达及其临床病理意义。方法:回顾性选取2014年1月-2021年12月佛山市三水区人民医院及中山大学精准医学科学中心收治的48例甲状腺癌患者作为研究对象。按照病理类型将其分为观察组(28例UTC)及对照组[20例甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)]。收集两组临床特征,检查两组PD-L1、PD-1表达情况。比较两组临床特征。比较两组及观察组不同临床特征患者PD-L1、PD-1表达情况。分析观察组中肿瘤细胞、间质免疫细胞PD-L1表达与间质免疫细胞PD-1表达的相关性。结果:观察组年龄41~85岁,平均年龄为69岁;肿物最大径为2.1~7.0 cm,平均5.0 cm。对照组年龄23~59岁,平均年龄为43岁;肿物最大径为0.7~4.0 cm,平均1.3 cm。观察组年龄≥60岁、肿物最大径≥4 cm和血管侵犯占比均显著高于对照组(P<0.05)。观察组肿瘤细胞和间质免疫细胞PD-L1的阳性率均高于对照组(χ^(2)=9.002、5.486,P=0.003、0.019)。两组间质免疫细胞PD-1阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组不同临床特征患者肿瘤细胞、间质免疫细胞的PD-L1阳性率及间质免疫细胞中PD-1阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肿瘤细胞中PD-L1的表达与间质免疫细胞PD-1表达无相关性(P>0.05);间质免疫细胞中PD-L1的表达与间质免疫细胞PD-1的表达无相关性(P>0.05)。结论:UTC肿瘤细胞及间质免疫细胞中有较高的PD-L1阳性表达率。

FISH检测9号染色体GLP9 p16基因扩增在膀胱癌临床诊断中的意义

目的探讨GLP9 p16基因扩增在诊断膀胱癌中的临床意义。方法应用荧光标记的p16基因探针检测35例膀胱癌和10例腺性膀胱炎患者尿液脱落细胞的染色体及基因畸变情况。结果荧光显微镜下细胞核大且不规则者易观察到染色体基因异常,GLP9 p16多倍体细胞数在膀胱癌中的阳性率为85.7%(30/35),显著高于腺性膀胱炎中的阳性率10.0%(1/10)(P<0.05)。在各分期分级中GLP9 p16多倍体细胞数分别为Ta期17.3±14.9,T1期36.5±27.3,T2期61.8±21.9,T2vs.Ta(P<0.05);G1级14.5±12.0,G2级38.1±24.8,G3级73.5±12.7,随着病理分级的增高GLP9 p16多倍体细胞数显著增加(P<0.05)。结论 FISH检测GLP9 p16基因扩增对膀胱癌的临床诊断有辅助价值,同时也可以作为临床监测膀胱癌进展的一个生物学指标。

国内外心脑血管生物资源库现状、建立与应用研究现状

随着医学研究不断发展,生物资源库的建设越来越重要。精准医疗的提出使得医疗研究领域对生物资源库的需求日益凸显。国内外生物资源库逐渐形成规范化、规模化的体系。国内拥有强大科研平台和丰富的样本资源的综合性医院逐渐建立规范化、规模化的体系相关疾病生物资源库。本文就国内外生物资源库现状展开综述,同时探讨对我国的心脑血管生物资源库启示以及未来展望。

非小细胞肺癌中DPC4基因的表达及其与微血管形成的关系

目的:研究DPC4(deletedinpancreaticcarcinomalocus4,DPC4)基因在非小细胞肺癌NSCLC中的表达,及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达和肿瘤内微血管密度(microvesseldensity,MVD)的关系。方法:利用免疫组织化学S2P法检测52例NSCLC组织,19组相应的癌旁正常肺组织中DPC4、VEGF的表达和MVD值。结果:DPC4在肺癌原发灶中的阳性表达率为63.15%(33/52),与癌旁正常肺组织中的阳性表达率89.15%(17/?19)相比,DPC阳性表达水平显著降低,差别有显著性意义(P<0.05);DPC4阳性表达率在NSCLC不同组织学类型、不同细胞分化程度各组中差异均无显著性(P>0.05),但伴有淋巴结转移NSCLC组DPC4阳性率29.14%(5/?17)和无淋巴结转移NSCLC组DPC4阳性率80.10%(28?/35)比较,其差异具有高度显著性(P<0.001)。52例NSCLC中,DPC4表达与VEGF表达(r=-0.303,P<0.05)、MVD(t=-8.474,P<0.001)均呈高度负相关。结论:DPC4的低表达可能是肺癌发生过程的早期事件,并可通过直接或间接的作用促进肺癌血管生成,从而促进肺癌的淋巴结转移。

星形胶质细胞升高基因-1与肿瘤血管生成的关系

AEG-1对肿瘤多种生物学特性均有促进作用,并与肿瘤血管生成密切相关。实验证实AEG-1过度表达的肿瘤部分新生血管较多,AEG-1也可以提高VEGF启动子的活性以及相关分子的表达水平。与AEG-1介导血管生成有关的分子包括PI3k/Akt、Tie2、Ang1、H-ras和HIF-1α等。在信号转导途径中最为重要的是PI3k/Akt信号通路,PI3k/Akt起到联系H-ras和AEG-1的作用,并介导由AEG-1引起的Ang1/Tie2下游靶位点的激活。NF-κB,H-ras/MEK在AEG-1介导的血管生成中也起到重要作用。

Caspase-3及其底物DFF45在人肺癌组织中的表达及意义

目的:检测Caspase-3、DNA裂解因子(DFF45)在肺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:在57例肺癌组织中应用免疫组织化学SP法、Westernblot检测Caspase-3、DFF45蛋白的表达。结果:Westernblot实验结果与免疫组化基本相符。57例肺癌组织中Caspase-3、DFF45蛋白表达阳性率分别为66.67%,29.82%。Caspase-3和DFF45蛋白的阳性表达率与组织学类型无关(P>0.05),与肺癌的分化程度和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。在肺癌组织中,Caspase-3与DFF45的表达具有显著正相关性(P=0.024)。结论:Caspase-3和DFF45蛋白的低表达,促进了肺癌细胞的生长和淋巴结的转移。

6种常见的循环肿瘤细胞的分离与富集技术

在过去的几十年,循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)因其在肿瘤的早期诊断、预后判断、疗效评价、靶向药物的开发、个体化治疗中的潜在作用已经受到了广泛的关注和研究。在转移的肿瘤患者中,循环肿瘤细胞被视为一种微创的极具前景的诊断标志和判断预后的重要标志。许多敏感的筛选方法和设备已经应用于血液中循环肿瘤细胞的分离和富集。本文总结了6种CTCs的分离和富集技术以及他们的优缺点,以期为后续更加优化的新技术、新设备的开发提供更多的参考依据,同时也为后续肿瘤的精准医疗带来一些参考。

BALB/c与SCID裸小鼠高侵袭性人结肠癌肝转移模型的比较研究

目的建立裸小鼠人结肠癌肝转移的高侵袭性模型,比较BALB/c鼠与SCID鼠的人结肠癌肝转移模型,为侵袭性人结肠癌的研究寻找可靠的动物模型。方法首先将人结肠癌细胞株HT-29细胞悬液接种于免疫功能正常BALB/c鼠的脾包膜下,然后将其肝转移肿瘤组织通过原位移植方式分别种植于免疫缺陷BALB/c鼠和SCID鼠的盲肠浆膜下,而第三组直接将HT-29种植于结肠,最后观察三组的成瘤及死亡情况,以及淋巴转移率、肝转移率、肺转移率及腹腔种植率等。结果术后21 d观察,40只BALB/c鼠有38只成瘤,其余2只死亡;40只SCID鼠有33只成瘤,其余7只死亡;第三组40只(20只BALB/c鼠/20只SCID鼠)裸小鼠虽有29只成瘤,且仅1只死亡,但肝转移率(24.1%)较低,不适于建立高侵袭模型。前两组在原位移植瘤大小、转移和种植率上差异无统计学意义(P>0.05),而两组成瘤率和死亡率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论将筛选出的人结肠癌肝转移组织用于建立模型,能有效模拟高侵袭性等生物学特性,再结合BALB/c鼠价格较低的优势,所以更适宜作为人结肠癌肝转移的可靠动物模型。

治疗前NLR和PLR对宫颈鳞癌患者预后的影响

目的探讨经手术治疗的宫颈鳞癌患者治疗前中性粒细胞与淋巴细胞比(neutrophil-tolymphocyte ratio,NLR)及血小板与淋巴细胞比(platelet-to-lymphocyteratio,PLR)与总生存期(overall survival,OS)、无病生存期(disease-free survival,DFS)和各临床病理因素的相关性。方法回顾性分析中山大学附属第一医院于2005年1月1日至2009年12月31日期间初治的并且经过手术治疗的143例宫颈鳞癌患者的临床病理资料,根据统计学方法选取NLR和PLR截断值,将患者根据截断值分组,分析NLR和PLR与患者生存、复发情况的相关性以及与临床病理因素的相关性。结果选取NLR=2.8和PLR=125分别作为截断值,高NLR组5年生存率为30.3%,低NLR组5年生存率为80%,差异有统计学意义(P=0.000)。高NLR组复发率为69.7%,低NLR组复发率为24.5%,差异有统计学意义(P=0.000)。高PLR组5年生存率为53.7%,低PLR组5年生存率为81.6%,差异有统计学意义(P=0.000)。高PLR组复发率为50%,低PLR组复发率为22.4%,差异有统计学意义(P=0.000)。经过单因素和多因素分析,国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、术前化疗、病灶大小、外周血血小板计数(platelet,PLT),NLR值和PLR值是影响宫颈鳞癌患者总生存率和无病生存率的独立危险因素。结论治疗前NLR及PLR均是影响宫颈鳞癌患者总生存时间和无病生存时间的独立危险因素。

17-DMAG对人结直肠癌裸鼠移植瘤微血管形成的抑制作用

目的探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)对结直肠癌微血管生成的抑制作用。方法 24只BALB/C-nu/nu裸鼠用于建立裸鼠结直肠癌移植瘤模型,并将其随机分为17-DMAG、5-氟尿嘧啶(5-FU)及对照组各8只,分别腹腔注射17-DMAG、5-FU、生理盐水,4周后测量裸鼠移植瘤体质量、体积,采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF),采用蛋白免疫印迹法检测VEGF。比较3组结果。结果 17-DMAG组、5-FU组移植瘤体质量、体积与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);17-DMAG组MVD、VEGF水平均低于5-FU组与对照组(P均<0.05),而5-FU组与对照组的MVD、VEGF水平比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 17-DMAG可通过下调VEGF的表达减少结直肠癌组织中新生血管的生成进而抑制肿瘤的生长。

非小细胞肺癌组织中FAK和pY397FAK的表达

目的:探讨粘着斑激酶(focaladh sionkinase,FAK)和磷酸化FAK(phosph FAK,pY397FAK)在非小细胞肺癌(no smallcelllungcancer,NSCLC)和正常支气管 黏膜上皮中的表达,及FAK在NSCLC发生 浸润和转移中的作用。方法:应用免疫组织 化学方法检测FAK和pY397FAK在60例 NSCLC和19例正常支气管黏膜上皮中的表 达,并与临床病理指标和Ki 67表达进行联 合分析。结果:FAK和pY397FAK在NSCL 中表达为83.3%(50/60)和55.0%(33 60),高于正常支气管黏膜上皮[57.9%(11 19)和21.1%(4/19)],差异有统计学意义 P=0.030、P=0.010。FAK和pY397FAK表 达升高与TNM分期及淋巴结转移有关,在 Ⅲ期和淋巴结转移组的阳性率高于Ⅰ+Ⅱ 期和无淋巴结转移组,差异有统计学意义, 均<0.05。FAK的强阳性表达率在低分化 组中(73.1%,19/26)显著高于高 中分化组 (47.1%,16/34),P=0.043。结论:FAK和 pY397FAK过表达在NSCLC发生和进展中发 挥重要作用。FAK和pY397FAK可能作为判 断NSCLC生物学行为的指标和治疗的新靶 点。

FHIT基因在大肠癌中的表达及其意义

为探讨大肠癌中脆性组氨酸三联体 FHIT基因的表达状况及其与临床病理指标的可能关系 ,利用免疫组织化学 S-P法对 5 6例大肠癌和 3 3例正常大肠黏膜组织中 FHIT基因的蛋白表达进行了检测。结果显示 ,大肠癌 FHIT基因的蛋白表达状况可能与组织学分级、Dukes分期以及 5年生存率密切相关 ,提示 FHIT基因在大肠癌的演化和进展过程中具有重要作用 ,并可能成为一个新的预后指标。

中性粒细胞/淋巴细胞对初始手术治疗宫颈鳞癌患者预后的影响

【目的】探讨经手术治疗的宫颈鳞癌患者治疗前中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)与患者生存、复发情况以及各临床病理因素的相关性。【方法】收集中山大学附属第一医院于2005年1月1日至2009年12月31日期间初治的并且经过手术治疗的143例宫颈鳞癌患者的临床病理资料,根据统计学方法选取NLR截断值,将患者根据截断值分组,分析NLR与患者生存、复发情况的相关性以及与临床病理因素的相关性。【结果】选取NLR=2.8作为截断值,高NLR组患者(33例)1、3、5年生存率分别为66.67%、33.33%、30.30%,低NLR组患者(110例)的1、3、5年生存率分别为98.18%、85.45%、77.27%,差异有统计学意义(P<0.001)。高NLR组患者复发率为69.7%,低NLR组患者复发率为24.5%,两者之间差异有统计学意义(P<0.001)。NLR与FIGO分期、病灶大小具有相关性。单因素分析FIGO分期、病灶越大、NLR值是宫颈鳞癌患者总生存率和无病生存率的影响因素(均P<0.05),且经多因素分析,发现以上因素均为独立危险因素(均P<0.05)。【结论】治疗前NLR升高是影响宫颈鳞癌患者总生存时间和无病生存时间的独立危险因素。

Ⅲ期非小细胞肺癌的处理:共识与争鸣

由中国抗癌协会肺癌专业委员会和广东省临床试验协会/中国胸部肿瘤研究协作组主办的“第19届中国肺癌高峰论坛”于2022年3月5日在广州顺利召开。此次论坛中,来自肺癌临床研究、转化性研究、基础研究的专家们围绕可切除/不可切除Ⅲ期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的多学科综合治疗和生物标志物进行了深入交流和讨论,并最终达成了专家共识。

25例肢体软组织侵袭性纤维瘤病的MRI和病理大切片对比性的研究

目的为了完整观察肢体软组织侵袭性纤维瘤病(AF)的病理特征和边缘的完整性,旨在为临床提供有效理论依据,准确确定手术的安全切缘、指导手术安全范围。方法对25例肢体软组织侵袭性纤维瘤病进行病理大切片,HE染色,Masson三色染色,免疫组织化学的Vimetin、actin和HHF35等染色,对比不同MRI下的WI.T2WI信号和经历程度,对瘤组织MRI表现和病理行为进行全面观察。结果肿瘤平均直径为5.6 cm,92%(23/25)肿瘤边界不清,肢体软组织侵袭性纤维瘤起源于骨骼肌,92%(23/25)肿瘤边缘分叶状,所有肿瘤呈渗润性生长,核分裂易见,4%(1/25)肿瘤边缘有肿瘤细胞。结论影像MRI与病理形态结合,病理大切片比常规HE切片更能准确反映AF病大小,侵袭周围组织程度,以及手术周边是否有瘤细胞等,为临床提供有效依据。

吡柔比星联合二烯丙三硫抑制膀胱癌细胞生长的协同作用研究

目的探讨吡柔比星(THP)联合二烯丙三硫(DATS)对膀胱癌细胞T24的协同杀伤效应及其机制。方法 MTT法、TUNEL法、流式细胞仪分别检测THP、DATS及二者联合对T24细胞生长、细胞周期及凋亡的影响;western-blot测定Bcl-2、Bax的表达变化;比色法测定caspase-3活性。结果 THP、DATS均能抑制T24细胞生长,DATS可明显提高THP的杀伤效应;THP(0.25mg/L)联合DATS(3mg/L)作用48h的细胞生存率为(32.3±2.6)%,低于单独应用THP(63.2±1.4)%和DATS(61.9±4.2)%,二者具有协同抑瘤作用;联合药物组可明显提高细胞凋亡率及G2/M期细胞比率,并更能显著抑制Bcl-2的表达,促进caspase-3的活性增加。结论 THP联合DATS可通过共同诱导肿瘤细胞凋亡发挥协同作用,抑制膀胱癌细胞生长,该机制可能与细胞周期阻滞、Bcl-2的表达及caspase-3的活性变化有关。

广东省HER-2基因检测室间质控存在的问题分析

目的依托广东省临床病理质量控制中心分子病理组对广东省内医院开展的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法检测HER-2基因进行室间质控,全面了解HER-2基因检测的标准操作程序(standard operating procedure,SOP)的关键节点,以更好地指导乳腺癌靶向治疗。方法选择HER-2不同阳性模式的石蜡切片作为质控片,同一表达模式病例采取连续切片,首尾2张各做FISH检测以确保质控片质量的一致性。各参加实验室采用各自的荧光原位杂交法,根据实际情况选择相应的探针和消化酶等。质控结果由质控小组成员采取双盲形式进行结果判读。结果从我省参与HER-2基因检测质控的26家实验室汇报的结果来看,各实验室使用的试剂均为国家食品药品监督管理总局批准的试剂,3种试剂探针本身对质控结果的影响无明显差异;个别实验室仍存在一些细节操作及判读的问题,其中标本(1)结果吻合率96.15%,一家单位误判为簇状扩增,标本(2)结果吻合率84.62%,标本(3)结果吻合率100%;消化液使用了胃蛋白酶和蛋白酶K,2种酶的消化效果无特别明显差异,对质控片进行镜下观察发现有2家单位4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)通道下轮廓显示不清,提示存在消化过度的问题。结论各实验室应严格按照各实验室操作流程,保证染色过程中的温度、缓冲液及清洗液的浓度和p H值、探针的配置等参数准确。只有通过不断健全室间质控系统,科学设计基础与临床实验流程步骤和评价标准,配合孰知各项实验内容的检测团队,定期进行监查活动,才能确保提高我省HER-2检测的准确性和一致性。

FISH技术在不明血尿患者膀胱癌诊断中的应用

目的探讨细胞滴片质量对荧光原位杂交(FISH)技术诊断膀胱癌的的影响。方法采用3、7、17号染色体着丝粒探针和9号染色体p16基因位点探针对45例膀胱移行细胞癌患者和50名健康人群的新鲜尿液进行FISH检测,分析细胞滴片对FISH结果的影响。结果标准的尿液脱落细胞滴片为细胞均匀分布,细胞核轮廓清晰,背景干净,红、绿信号清晰明亮。细胞数量太多、细胞间黏液太多、大量的中性粒细胞和淋巴细胞混杂在脱落的上皮细胞中、尿液中含有大量的杆菌、球菌和精子都会导致细胞重叠或探针无法杂交到目的基因上,红、绿信号模糊不清,影响FISH结果的可靠性。结论细胞滴片的质量直接影响到FISH结果的可靠性。

ARMS法与下一代测序法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较

目的本研究旨在通过对突变扩增阻滞系统(ARMS)法与下一代测序法(NGS)检测非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因突变的比较分析,来探索更适合我国临床肺癌患者EGFR基因突变的检测方法。方法收集22例NSCLC患者标本,分别用ARMS法及二代测序法对标本进行EGFR基因突变检测,分析比较两种方法的优劣。结果本次实验的22例标本其中17例EGFR基因突变结果两种检测方法一致,结果为EGFR单突变6例,双突变1例,阴性10例;2例ARMS法检测为单突变,二代测序法检测为双突变;3例ARMS法未检测到突变,二代测序法检测到突变。结论 ARMS法与二代测序法检测EGFR基因突变结果基本一致,但各有优缺点,两种方法结合检测效果更好。

AEG-1在恶性肿瘤中的研究进展

星形胶质细胞升高基因(Astrocyte elevated gene-1,AEG-1)最初通过快速消减杂交技术(rapid subtraction hybridization,RaSH)鉴定发现,在HIV-1或肿瘤坏死因子-α诱导的原代人胎脑星形胶质细胞(primary human fetal astrocvtes,PHFA)中其表达升高。AEG-1的cDNA由3 611个碱基组成,定位于8q22,分子量64kDa,等电点是9.33。研究发现,AEG-1定位于核周和类内质网结构区。AEG-1是Ha-ras和c-myc的下游靶分子。此外,近几年研究证实,AEG-1的致癌作用与激活PI3K-Akt和NF-κB信号通路有关。AEG-1最初在2002年被成功克隆,目前已被证实在多种器官的致癌作用过程中发挥关键作用。AEG-1在神经母细胞瘤、乳腺癌、肝癌和前列腺癌等多种恶性肿瘤中高表达,且与患者的生存率负相关。在体内、外通过提高或抑制AEG-1表达的研究进一步探明AEG-1调节细胞的多种生理、病理过程,包括增殖、侵袭、转移、血管新生和基因表达等。虽然AEG-1的致癌作用已经得到证实,但它作为一个癌基因的潜在功能和作用机制需要进一步探讨。本文就AEG-1与恶性肿瘤的关系做一综述,旨在以AEG-1为合理的靶点介入肿瘤治疗提供新的视野。