基于核酸适体的高通量模型筛选抗大口黑鲈虹彩病毒药物

【目的】利用可特异性识别大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(Largemouth bass virus,LMBV)的核酸适体LBVA1建立药物高通量筛选技术(Aptamer LBVA1-based high-throughput screening,LBVA1-AHTS),以快速筛选有效抗LMBV药物。【方法】用探针FAM-LBVA1检测感染不同浓度[感染复数(MOI)分别为0、0.05、0.10、0.20]LMBV 48 h,以及感染LMBV 0、6、12、24和48 h的胖头鱥(Pimephales promelas)肌肉细胞(Fathead minnow cells,FHM)荧光值,并用激光共聚焦及荧光定量PCR(RT-qPCR)验证LMBV感染情况;将利巴韦林、阿昔洛韦、加巴喷丁、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯等9种药物分别以安全工作浓度与LMBV混匀,加入FHM细胞共孵育,运用探针FAM-LBVA1及RT-qPCR技术检测各组LMBV感染情况,比较两种方法检测的药物抗LMBV感染效果,筛选出有效抗LMBV药物。【结果】探针FAM-LBVA1检测及RT-qPCR技术验证结果均表明,在感染复数(MOI)为0.20、感染时间为48 h时,对LMBV感染的检测效果最佳。9种药物抗LMBV效果筛选结果表明,LBVA1-AHTS技术与RT-qPCR技术两种筛药方法筛选出利巴韦林、加巴喷丁、金刚烷胺、卡马西平、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯7种药物的抗病毒效果一致,其中茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯3种药物具有抗LMBV的效果,其余4种药物无明显抗病毒效果,两种方法一致率近80%。【结论】建立的LBVA1-AHTS模型可快速、准确、高效筛选出抗LMBV病毒药物,为快速筛选抗病毒药物提供理论和技术基础。

基于核酸适体LYGV1c的酶联吸附法检测石斑鱼虹彩病毒感染

【目的】利用核酸适体LYGV1c构建可快速、准确识别石斑鱼虹彩病毒(Grouper iridovirus Guangxi strain,SGIV-Gx)感染的酶联吸附法(Aptamer LYGV1c-based enzyme-linked apta-sorbent assay,LYGV1c-ELASA),为提高水产疫病检测及防控效率提供理论支持。【方法】基于生物素标记的LYGV1c(Bio-LYGV1c)开发核酸适体酶联吸附法(LYGV1c-ELASA)检测SGIV-Gx,通过对Bio-LYGV1c特异性、灵敏性、稳定性等实验评估其检测性能。通过珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂)SGIV-Gx感染试验进行活体验证,同时用荧光定量PCR(qPCR)测定衣壳蛋白基因(MCP)的表达,与LYGV1c-ELASA进行比较,验证该酶联吸附法检测的可信度。【结果】LYGV1c-ELASA的方法可特异性地识别SGIV的感染,Bio-LYGV1c识别SGIV感染的最适工作浓度为500 nmol/L,最适孵育时间为20 min,最适结合温度为4~28℃,LYGV1c-ELASA最低检测限为5×103 mL-1。活体验证结果表明,随着注射的SGIV-Gx浓度的升高,LYGV1c-ELASA检测出的石斑鱼体内病毒450 nm处的光密度(OD450)的值升高;qPCR结果表明,SGIV-Gx的MCP的表达量升高,与LYGV1c-ELASA检测结果相一致。【结论】建立的LYGV1c-ELASA技术不仅可用于体外检测,同时也适用于活体检测。LYGV1c-ELASA技术可实现对石斑鱼养殖过程中石斑鱼虹彩病毒病的快速诊断、实时监控。

老年人内在能力影响因素及提升策略的研究进展

老年人医疗照护模式正由关注疾病向关注功能转变,内在能力作为老年人发挥功能的核心,为老年人的照护提供了新思路和新策略。内在能力的提升对提高老年人的健康素养具有重要意义,该文就内在能力的测量维度及方法、影响因素进行综述,并在此基础上总结提升策略,以期为护理临床实践提供指导,为减缓甚至逆转老年人内在能力下降、提升老年人的生活质量、促进健康老龄化提供参考依据。

胎儿静脉导管分流率对妊娠期高血压疾病胎儿宫内窘迫及严重程度的诊断价值

目的探究胎儿静脉导管(DV)分流率对妊娠期高血压疾病(HDCP)胎儿宫内窘迫及严重程度的诊断价值。方法选择HDCP胎儿窘迫孕妇(窘迫组,n=92)、单纯HDCP孕妇(HDCP组,n=92)和同胎龄段产检结果正常的孕妇(对照组,n=92)为研究对象,依据胎儿宫内窘迫程度将窘迫组分为轻度窘迫组、中度窘迫组及重度窘迫组。测定研究对象的舒张压(DBP)、收缩压(SBP)及DV分流率;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析DV分流率诊断HDCP胎儿宫内窘迫及重度窘迫的价值。结果窘迫组的孕妇DBP、SBP及胎儿DV分流率高于HDCP组和对照组(P<0.05);HDCP组的孕妇DBP、SBP及胎儿DV分流率高于对照组(P<0.05)。窘迫组中,47例轻度窘迫,29例中度窘迫,16例重度窘迫;重度窘迫组的孕妇DBP、SBP及胎儿DV分流率高于中度窘迫组和轻度窘迫组(P<0.05);中度窘迫组的孕妇DBP、SBP及胎儿DV分流率高于轻度窘迫组(P<0.05)。ROC曲线结果显示,胎儿DV分流率对HDCP胎儿宫内窘迫和重度窘迫具有一定的诊断价值[曲线下面积(AUC)=0.802、0.868],灵敏度分别为77.2%和93.8%,特异度分别为77.2%和65.8%。结论胎儿DV分流率对HDCP胎儿宫内窘迫及严重程度的诊断效能较高。

老年人内在能力测评与结局指标范围审查的比较研究

目的:系统综述国内外老年人内在能力测评及结局指标相关研究。方法:聚焦内在能力,系统检索中英文数据库,由2名研究员使用标准化表格提取文献的出版物信息、研究地点、研究类型、样本量及年龄分布、样本信息获取方式、内在能力领域和用于评估相应领域能力的指标及方法、综合评分计算方式、生物学标记物、相关结局指标等。结果:共纳入63篇文献,共38项测评指标(运动领域10项、认知领域6项、感观领域3项、心理领域8项、活力领域11项)、7种内在能力综合得分计算方式、13项相关结局指标。结论:建议卫生保健机构和相关人员通过前瞻性的研究方法充实内在能力内涵,在综合和了解国内外内在能力测评方法的基础上,制定和发展适合我国国情、医疗和养老环境的内在能力测评工具及综合评分界值,以标准化工具促进老年人内在能力提升。

数字经济赋能金融业转型升级策略

在数字经济背景下,随着金融供给侧结构性改革的持续稳步推进,金融业不断寻求现代数字科技助力下的高质量发展之路,谋求现代化转型。与此同时,全球金融格局快速变化,使金融业整体竞争环境愈发复杂。从数字经济赋能金融业转型升级的机制层面入手,着重研究金融业转型的必要性和全新的转型升级策略。研究发现,在数字经济时代,金融业可通过数字金融科技拓展金融服务场景、完善金融风险管控机制、推进普惠金融扩容布局等具体对策实现转型升级,提升行业高质量发展水平。

基于能耗强度控制的用能预算管理研究

建立用能预算管理制度,对于完善能源消费总量和强度调控,推动能耗双控逐步转向碳排放双控具有重要意义。本文以江西省为研究对象,通过梳理回顾“十一五”以来全省能耗双控工作情况,分析能耗双控工作存在的短板和面临的挑战,进而提出了用能预算全流程管理框架设想,建立了能耗强度控制目标分解模型和年度用能预算控制预测模型。研究表明,非工业领域能耗增长、居民生活用能增长和经济增长存在极其显著的统计回归关系,工业领域能耗增长可通过项目节能审查进行合理预估,合理量化节能审查工作对未来能耗双控形势的影响,对建立健全地方用能预算管理制度至关重要。在此基础上,本研究提出合理分解能耗双控目标、强化节能监督检查闭环管理、加强能耗在线监测体系和能力建设、探索完善用能预算管理的不确定分析等措施建议,为进一步完善用能预算管理和能耗双控制度提供参考。

通识教育视角下大学英语听力教学模式研究

大学英语听力课程是大学英语教学体系中的重要分支,通识教育的有机融入为大学英语听力教学工作提供了引领,推动着大学英语教育事业的发展。这不仅有助于大学英语教学创新模式的探索,还能够促进学生知识积累和听力技能的提升。为了进一步推进高质量构建大学英语听力教学模式,我们需要明确英语听力课程教学要点,并通过增强通识教育意识、遵从因材施教原则、创新听力教学内容以及营造良好的教学情境来确保顺利进行大学英语教育工作。

我国运用智慧农业的现状及对策研究

智慧农业利用新一代信息技术与农业深度融合,有利于传统农业转型升级,实现现代农业高质量发展。本文首先基于文本资料,系统梳理了智慧农业的发展演变过程及智慧农业对传统农业的影响机制,然后利用中国乡村振兴综合调查数据,分析了智慧农业在我国小农户生产中的应用状况。研究发现,我国农村地区智慧农业基础设施薄弱,小农户采用智慧农业技术的比例低、门槛高、难以深度融合,智慧农业在小规模粮食生产的经济效益低等问题。为提高我国智慧农业发展,建议采取强化农村网络基础设施建设、提高农民应用人工智能的意愿与能力、探索带动小农户发展的组织模式等措施。

织锦巴非蛤稚贝与饵料微藻的脂质组成及分析

为了揭示织锦巴非蛤(Paphia textile)稚贝与3种饵料微藻的脂质组成特征及其相关性,本研究用氯仿-甲醇提取织锦巴非蛤稚贝和饵料微藻中的脂质,采用液液萃取技术分离,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对脂质进行分类和鉴定,采用色谱峰面积归一化法确定各组成成分的相对含量。结果显示,从5个样品中共鉴定出7类化合物,鉴定出的化合物占总峰面积的97%以上,主要为烷烃类化合物和脂肪酸。聚类分析结果显示,5个样品的长链脂肪酸可以聚类成2组,第一组包括织锦巴非蛤(湿、干)、球等鞭金藻(Isochrysis galbana)和牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri),第二组为青岛大扁藻(Tetrasemis helgolandica)。5个样品长链脂肪酸的主成分分析显示,主要分为主成分1(60.8%)和主成分2(23.0%),织锦巴非蛤、青岛大扁藻与主成分1显著相关,棕榈酸(C16:0)、亚麻酸(C18:3n3)、反油酸(C18:1n9t)、亚油酸(C18:2n6)、硬脂酸(C18:0)可作为其特征脂肪酸成分。研究表明,虽然织锦巴非蛤的长链脂肪酸和球等鞭金藻、牟氏角毛藻更相似,但是青岛大扁藻更能满足其脂质营养需求,是织锦巴非蛤稚贝培育期的优良饵料,建议在培育织锦巴非蛤稚贝时以投喂青岛大扁藻为主的同时混合投喂牟氏角毛藻和球等鞭金藻。

近江牡蛎活性物质的制备及其抗氧化活性的初步研究

通过对不同的酶类及水解方式得到的产物进行成分分析及其抗氧化活性的初步探讨,筛选出近江牡蛎活性物质的最佳提取方案,即采用超声波破碎结合双酶水解的制备方法。在此条件下,水解度达21.7%,对羟自由基的清除率达到22.6%。制得的活性物质中,功能性短肽的含量为13.31mg/mL,总氨基酸含量为7.60mg/mL。采用3%的活性炭对活性提取物处理后脱腥脱色的效果较好,但发现营养成分损失较大,其中短肽的损失达36.1%,氨基酸损失达40.6%。

深水智能完井关键设备组合优化模型的建立与应用分析

目前选择智能完井设备的标准往往是由经济因素所决定,并且智能完井设备优选多是侧重于某一种关键设备的选型或是安装位置,不能真实反映工程对设备组合的准确性、可靠性、兼容性等多目标要求。基于层次分析法(AHP)建立了深水智能完井关键设备组合优选模型:将井下控制系统、温压传感器、封隔器、流量控制阀、井下流量计、分布式温度传感器等完井设备组合作为AHP的方案层,将费用、可靠性、控制精度性、数据测量精确性、操作方便性、兼容性等6种最能代表设备组合特点和性能的参数作为AHP的标准层,将最优设备组合作为AHP的目标层;根据工程实际需求得到不同设备组合针对准则层以及准则层针对目标层的判断矩阵,然后通过层次总排序得到针对目标层的最优设备组合。实例分析结果表明,本文建立的优选模型可以在实际工程中进行应用,能够满足工程实际需要,可以得到适用于不同工况下的深水智能完井最优设备组合方案。

深水探井钻前含可信度的地层孔隙压力确立方法

针对深水探井钻井可参考信息有限的特点,提出改进的计算上覆岩层压力梯度和建立时深关系的方法。利用概率统计理论,研究Eaton法中各个参数对最终结果的影响规律和相互关系,提出基于层速度的有效应力法与Eaton法联合预测地层孔隙压力的方法,建立了含有可信度的地层孔隙压力剖面,使其不再是一条单一的曲线,而是具有可信度信息的区间。可信度越大,得出的地层孔隙压力梯度区间越大,其不确定范围越大;反之,虽然压力梯度的不确定范围缩小,但其可信程度也随之降低;地层孔隙压力的异常高压程度越剧烈,其压力区间也越大。西非深水区域一口探井计算结果与实测压力值具有较好的一致性。

西非深水JDZ-2-1井钻井工程整体风险分析

由于深水钻井具有高投资、高风险的特点,在西非深水JDZ-2-1井钻前对其进行风险评价,对做好应急备案具有重要意义。分别阐述了雷暴、暴风、波浪、潮汐、雾、水深、水下洋流、浅层地质灾害、天然气水合物、异常压力、狭窄的地层孔隙/破裂压力窗口和地震因素等对深水钻井作业的影响及危害,并结合JDZ-2区块的实际自然环境和地质条件,利用层次风险评价方法(APH),按照深水钻井常规作业的组成部分,建立钻井工程整体风险层次结构,对其进行整体风险评价。分析结果表明,JDZ-2-1井在钻井液性能受到各因素的影响较为明显时,其风险值最大,而钻进作业、取心和测井作业风险次之。该分析研究为制定应对风险的措施提供了参考。

常规超声及弹性成像在浅表淋巴结定性诊断中的研究进展

超声是评估浅表淋巴结的一种有效手段。通过灰阶超声检查可依据淋巴结的大小、形态、内部结构对浅表淋巴结进行评估;应用超声弹性成像技术可定性和定量评估淋巴结的硬度。本文主要对近年来灰阶超声、多普勒超声及超声弹性成像在浅表淋巴结良恶性鉴别诊断中的研究进展进行综述。

吸入甲醛对小鼠前脑NMDA-R基因转录的影响

通过测定小鼠前脑N—甲基—D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDA-R)的转录水平的变化,研究中低浓度甲醛暴露环境对小鼠中枢神经系统的影响.实验以昆明系小鼠为实验材料,经甲醛染毒后,立即脱颈处死并取其前脑组织提取总RNA,采用RT-PCR二步法对其中的NMDA-R亚基(Grin1,Grin2a,Grin2b)及管家基因β-actin进行扩增,通过光密度分析染毒前后基因转录水平的变化.实验结果表明,与对照组相比,0.5mg·m-3浓度的气态甲醛可使Grin1基因转录稍有上调,但无显著性差异;Grin2a基因转录上调且有显著性差异(p<0.05),Grin2b基因略有下调但无显著性差异.3.0mg·m-3浓度的甲醛可使Grin1基因转录上调并具有极显著差异(p<0.01),且上调幅度明显大于0.5mg·m-3染毒组;Grin2a基因转录显著性上调(p<0.05),但上调幅度小于0.5mg·m-3染毒组;Grin2b基因转录显著性下调(p<0.05).由此可见,低浓度甲醛(0.5mg·m-3)的吸入对NMDA-R(除Grin2a外)的各亚基的影响较小.中等浓度甲醛(3.0mg·m-3)的吸入对NMDA-R影响较大,这可能是持续性气态甲醛吸入对小鼠中枢神经系统产生影响的重要机制之一.

甲状腺影像报告与数据系统、声触诊组织量化技术及超声造影鉴别诊断甲状腺结节良恶性

目的探讨甲状腺影像报告与数据系统(TI-RADS)分类、声触诊组织量化(VTQ)技术及CEUS对甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值。方法对66例患者69个结节均于术前进行TI-RADS分类、CEUS,观察并分析其CEUS表现。采用VTQ测定结节剪切波速度(SWV),绘制ROC曲线获得SWV的曲线下面积及最佳临界值。计算3种方法单独及两两联合的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确率。结果 69个甲状腺结节中,良性37个,恶性32个。3种方法单独诊断时,VTQ诊断甲状腺恶性结节的敏感度最高[87.50%(28/32)],CEUS特异度最高[91.89%(34/37)],两两联合应用时,VTQ和CEUS联合诊断甲状腺恶性结节的敏感度最高[93.75(30/32)]。SWV以2.55 m/s为最佳临界值,ROC曲线下面积为0.808(P<0.01)。结论 3种方法均对诊断甲状腺结节良恶性有一定价值,VTQ联合CEUS的敏感度最高,是鉴别甲状腺结节良恶性的可靠检查手段。

超网络时代的电子金融和风险管理

为电子交易中的多层金融网络问题的建模、分析以及计算提出了解决方案,在该网络中,资金来源以及中介均为多目标决策者.特别假定这些决策者不仅寻求收益最大化,而且还寻求风险最小化,风险通过一个可变权重的惩罚项来衡量.揭示了不同决策者的行为,包括金融产品的消费者.导出了最优条件,并证明金融网络经济的均衡条件可表述为一个有限维变分不等式问题.同时,指出了均衡解的存在性条件和唯一性条件,提出了求解的算法.

禁忌-递阶遗传算法研究

结合禁忌搜索算法和递推遗传算法提出一种新的遗传算法——禁忌 -递阶遗传算法 ,该算法能在一定程度上克服早熟问题。通过求解复杂的非线性系统——分整增广 GARCH- M模型的参数优化问题 ,表明该算法具有较高的精确性和可行性。

ARCH模型的诊断分析

探讨了 ARCH模型的诊断分析和变结构建模问题 .所提出的分整增广 GARCH- M模型包括了几乎所有现有的 ARCH模型 ,基于分整增广 GARCH- M模型克服了 ARCH模型在模型设定检验 ,长记忆检验和参数估计等方面的障碍 .利用分段建模方法来检测模型结构变化点和分段变化模型的选择 .最后 ,以上海证券综合事业股票指数为数据 。