直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨

目的建立直接多肽结合试验(DPRA)和人细胞系活化试验(h-CLAT)的皮肤致敏组合检测方法,对化学品及植物提取物的致敏性进行初筛。方法选择12种化学品和7种植物提取物为受试物,把不同受试物分别与两种肽(半胱氨酸肽和赖氨酸肽)共孵育24 h,采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。同时将不同浓度的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)共孵育24 h,通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标志物CD86和CD54的变化。再进一步比较DPRA和h-CLAT预测结果的一致性。结果 DPRA方法和h-CLAT方法准确区分了12种化学品的皮肤致敏性,其中2种判定为阴性,10种判定为阳性,两种方法检测结果一致。DPRA对植物提取物致敏性的预测中,除绿茶提取物无法判定外,其余6种均为皮肤致敏疑似物质。h-CLAT预测中,除绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物,其余4种植物提取物为致敏物。DPRA与h-CLAT预测的一致性为0.57。结论 DPRA与h-CLAT的简单组合可以实现对单一化合物的准确预测,对于复杂混合物可实现初步预测,确认需要进一步组合其他方法。

美白功效原料的分步体外评测方法及应用分析

介绍了美白功效原料分步体外评测方法原理,分析了肤色形成的生物学过程及内外影响因素,重点介绍了防晒、抗炎、抗氧化、关键酶抑制和黑色素合成抑制、黑色素转运抑制及角质层剥离6个步骤的体外评测方法及具体应用,讨论了多细胞相互作用模型的重要性,最后总结了不同体外方法的权重及选择原则。

替代方法在化妆品检测中的应用分析

体外方法是不可缺少的生物学检测与研究工具,已普遍用于化妆品法规性测试、生物学机制研究和功效性原料的筛查。体外方法包括法规认可和列入标准测试指南的替代方法,用于风险评估和毒性预测的非生物测试方法,以及大量多元和个性化的方法。这些方法可用于产品监管、原料筛查、配方优化、组合测试和定制化评估,覆盖化妆品质量和安全评价的整个过程。随着全行业共识的形成和应用经验的积累,建立在检测标准基础上的方法创新和优化将不断涌现,这些技术将支撑行业的健康发展,有助于提高竞争力和开发适应消费者需求的产品。

基于皮肤模型与THP-1细胞共培养建立皮肤致敏体外检测方法的初步研究

建立了皮肤模型与THP-1细胞共培养方法,对石化产品进行了致敏性评价。不同浓度测试物与表皮模型作用15 min,去除受试物后孵育6 h,使用MTT法检测皮肤模型组织活率,利用流式细胞法检测THP-1细胞表面标志物CD86、CD54表达变化情况以及细胞活率。对上述参数进行统计学分析及是否存在剂量效应关系,判定测试物是否具有潜在致敏特性。对SLS、肉桂醛、柠檬醛的测试表明,该方法可以正确区分刺激物和致敏物;对4种未知润滑油添加剂的预测结果表明,HVI60、Cuvan826、ATM PAN为非致敏物,Irgamet30为致敏物,高浓度时可导致表皮组织和THP-1细胞活性降低及表面标志物CD86、CD54的特异性升高。

基于树突状细胞激活建立皮肤致敏的体外方法

接触性过敏性皮炎是由外源化合物引起的多种细胞共同参与的IV型迟发变态反应,传统动物实验选用豚鼠或小鼠。随着皮肤致敏有害结局通路(AOP)研究的深入,为基于分子起始事件和关键事件的替代方法开发提供了思路。树突状细胞(DC)激活在AOP通路中起到了承上启下的关键作用,基于DC开发了多项替代方法,有的方法经过验证已被列入测试指南。本文从树突细胞的筛选,检测参数的特征,方法的局限性和适用性进行了讨论,并对树突细胞与其它细胞之间相互作用、共培养体系、人体芯片等方面的进展作了介绍,为进一步优化致敏检测的体外替代方法提供参考。

有害结局通路指南及毒性测试应用分析

综述了在21世纪毒性测试愿景与策略倡议下,以及现代科技发展和法规监管体系变革的背景下,有害结局通路(AOP)的提出和发展。重点介绍了AOP的概念和指南,AOP的基本组成、构建条件和信息共享,AOP的网络和评估;讨论了AOP在皮肤致敏和鱼类早期发育2个毒性终点的开发和应用情况,及其作为自上而下和从中间开始的2种AOP开发策略的实例;最后提出了AOP以现代科技发展为动力、毒性预测现代化为基础、推动法规监管模式变革为目标的发展策略。AOP指南也为替代动物测试方法的开发和检测技术创新提供了难得的机遇。

《日用化学品安全评价技术创新——替代方法》专题五 牛角膜浑浊和渗透性实验应用于个人护理产品评价的案例分析

采用标准化的眼刺激性测试替代方法牛角膜浑浊和渗透性实验(bovine corneal opacity and permeability,BCOP)用于化学品和个人护理产品的分类标识、危害识别、市场监督管理和产品评价;同时通过增加测试参数、改变暴露时间等方式建立特殊方案的BCOP,并将其用于原料筛选和安全浓度的确定、配方优化、特殊人群产品测试和口腔黏膜刺激性的评估。结果表明BCOP方法可以单独使用或者作为整合测试策略的核心方法用于区分刺激性/非刺激性和严重刺激/腐蚀性,采用特殊方案还可以满足产品差异化、温和宣称的需要。

鸡胚尿囊膜模型在化妆品毒性和功效评估中的应用

综述了鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)作为一种独特的测试系统在化妆品原料和产品毒性检测、功效评估和机制研究中的应用。重点介绍了CAM的优缺点,不同CAM测试方案的差异和在眼刺激组合策略中的使用建议。讨论了基于CAM的方法在眼刺激、光毒性、皮肤刺激、急性毒性和遗传毒性检测,以及在血管生成促进和抑制、抗氧化、抗刺激等功效评估中的应用。最后提出基于CAM的测试方法可替代传统动物试验,为化妆品评测提供可靠的数据支持。

广东2所农村学校儿童健康知识与卫生行为调查分析

目的了解广东部分农村地区1—6年级小学生的健康知识和卫生行为现状，为正确开展小学生卫生知识宣教提供科学依据。方法于2012年7—8月采用分层随机抽样的方法，从佛山市金本小学以及韶关市长江中心小学中随机抽取不少于250名小学生，进行有关健康知识、卫生行为及用纸情况的问卷调查，并实地考察学校厕所卫生状况。采用描述性流行病学方法进行分析。结果共调查学生263人，其中男生138人，女生125人。调查对象的健康知识总知晓率为61．2％（1769／2893），其中男性知晓率为57．0％（866／1518），女性为65．7％（903／1375）（P〈0．01），其中对不利于健康成长的习惯、和肥胖有关的因素等6项知识知晓率〈60％；调查对象的健康行为总形成率为56．1％（2805／4997），其中男性的行为形成率为54．6％（1431／2622），女性为57．9％（1374／2375）（P〉0．05），其中做到读书写字姿势正确、坚持每天做眼保健操等10项卫生行为形成率〈60％。16．0％（42／263）学生如厕完后依旧使用皱纹卫生纸或是报纸、作业纸等。结论被调查农村地区小学生健康知识知晓率与健康行为形成率均较低，卫生习惯有待提高，应加强学生卫生知识和健康教育的宣传。